血友病甲患者血浆中修饰型组织因子途径抑制物的研究

目的：探测血友病甲患血浆修饰型组织因子途径抑制物（TFPI）水平的变化及其与活化部份凝血酶时间（APTT）时间的相关性，方法：以ELISA法测定修饰型TFPI含量，以凝血一期法在半自动凝血仪上测定APTT与FⅧ：C。结果：28例血友病患血浆修饰型TFPI含量与正常组相比差异无显性，与APTT呈正相关，与FⅧ：C不相关。结论：血友病甲患修饰型TFPI含量与正常无差异，完全可能通过低调TFPI水平而达到止血治疗的目的。     

植入性胎盘15例临床分析

植入性胎盘是指由于子宫蜕膜发育不良或创伤性内膜缺陷、胎盘绒毛穿透底蜕膜侵入子宫肌层等引起。根据植入面积的大小分为完全性和部分性。是产科较少见的并发症，常导致严重的产后出血、子宫穿孔和继发感染，甚至威胁产妇的生命。对我院近10年来15例植入性胎盘作临床分析，以探讨植入性胎盘的相关因素、预防、治疗。[第一段]     

三七片DNA条形码分子鉴定及方法学考察

目的为研究DNA条形码技术在中成药鉴定中的应用,以三七片为研究对象,对方法的适用性、专属性与精密度进行考察。方法收集15批次市售三七片样品,考察三七片DNA提取条件,并对"中药材DNA条形码分子鉴定法指导原则"中PCR扩增、序列获得、结果判定等方法适用性进行确认;收集三七、人参、西洋参,制作三七片及其掺伪品,考察方法的专属性和重现性。结果三七片取样量100 mg,56℃水浴8 h所获得DNA的质量浓度平均值为60.7 ng/μL,PCR扩增、序列获得和结果判定均可获成功;三七、人参和西洋参的ITS2序列长度均为230bp,三七与人参、三七与西洋参的序列间均存在7个稳定的SNP位点,自制三七片和掺伪三七片均可成功获得ITS2序列,不同比例三七与人参、三七与西洋参的测序峰图在SNP位点处呈现相应峰高比的SNP套峰具备专属性;重复性、中间精密度和重现性考察符合《中国药典》2015年版(通则9101)相关要求。结论 ITS2序列作为DNA条形码能够稳定、准确鉴定三七片的原料药材,具备良好的专属性和精密度,三七片DNA条形码分子鉴定法将为保障三七片临床用药安全提供新的技术手段,并对《中国药典》其他收载单方制剂的鉴定提供参考。     

赤芝FPS基因酵母单杂交文库构建及其上游转录因子的筛选

目的筛选赤芝三萜合成途径中法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPS)基因的上游调控转录因子。方法首先克隆了FPS基因启动子,并连接至pAbAi质粒构建诱饵载体pAbAi-FPS。将pAbAi-FPS转化Y1H酵母感受态细胞构建诱饵菌。采用SMART技术构建赤芝酵母单杂交cDNA文库,再将纯化的双链cDNA、pGADT7-Rec共转化诱饵菌株,筛选FPS上游的转录调控因子。结果构建了含pAbAi-FPS的诱饵载体并筛选出诱饵菌株,构建了cDNA文库并转化诱饵菌株,筛选出阳性克隆37个,得到作用FPS基因上游的转录调控因子18个,包括转录因子3个、核糖体蛋白5个及其他家族蛋白10个。结论筛选出转录因子GlSNF2、GlMHR和GlZn2Cys6为调控FPS表达的候选基因,为深入研究FPS基因的表达调控机制奠定了研究基础。     

基于ITS2条形码序列的山豆根基原植物及其混伪品的DNA分子鉴定

山豆根是我国常用中药材,对山豆根基原植物及其易混伪品进行DNA分子鉴定研究具有重要意义。本文对5科9属38个物种84份山豆根基原植物及其混伪品样品的ITS2序列进行序列变异分析、K-2p遗传距离比较及NJ系统发育聚类树构建。结果表明所研究山豆根基原植物样品种内ITS2序列无变异,与其同属密切相关物种的ITS2序列变异位点为102个,平均K-2p遗传距离为0.072,与其他混伪品的ITS2序列变异位点为200个,平均K-2p遗传距离为0.594。山豆根基原植物在NJ系统发育聚类树上聚为一支,支持率为98。因此,ITS2作为DNA条形码序列能够有效的区分山豆根基原植物及其混伪品,为山豆根药材及其混伪品的鉴定提供基础。     

血乳酸测定在小儿腹泻并脱水中的应用价值探讨

目的探讨血乳酸测定在小儿腹泻并脱水中的应用价值。方法检测62例腹泻患儿血酸和尿素氮水平,其中无脱水组33例,脱水组29例。结果腹泻并脱水组血乳酸水平均高于无脱水组（P〈0．01）,血尿素氮水平无明显差异（P〉0．05）。结论血乳酸水平可用于腹泻患儿脱水评估,从而有效指导小儿补液,动态检测可用于评估液体疗法的效果。     

miRNA-497抑制卵巢癌细胞中FASN的表达

目的:研究miRNA-497在上皮性卵巢癌组织/细胞中的表达情况,miRNA-497对脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FASN)表达水平的影响,探讨miRNA-497与FASN之间的关系,为临床卵巢癌诊治以及选择性靶向药物应用提供新的实验研究依据?方法:qRT-PCR分析10例上皮性卵巢癌组织及10例正常上皮性卵巢组织中miRNA-497?FASN的表达水平,Person相关性分析二者表达水平有无相关性?从卵巢癌细胞株SKOV3?A2780中筛选出miRNA-497表达量较低的SKOV3细胞株,转染miRNA-497 mimics?miRNA-497 inhibitor至卵巢癌细胞株SKOV3中,转染miRNA-497 mimics control,miRNA-497 inhibitor control作为阴性对照,未转染组为空白对照,qRT-PCR检测不同组中FASN的mRNA的表达情况,Western blot分析各组细胞中FASN蛋白表达改变情况?结果:①miRNA-497在上皮性卵巢癌组织中的表达较正常卵巢组织明显降低,而FASN基因却存在异常高表达;Pearson相关性分析表明,卵巢癌组织和正常卵巢组织中miR-497与FASN mRNA表达存在负相关(r=-0.458 84,P < 0.01);②miRNA-497可以调控FASN的表达?与对照组相比,增加miRNA-497的表达后FASN的蛋白及mRNA表达水平明显降低;抑制miNRA-497的表达可增加FASN蛋白及mRNA的表达?结论:miRNA-497在上皮性卵巢癌组织中的表达较正常卵巢组织明显降低,而FASN基因却存在异常高表达,二者表达水平存在负相关;miRNA-497能够抑制卵巢癌SKOV3细胞中FASN的表达,FASN可能是miRNA-497的靶基因?     

血清胱抑素C、β2-微球蛋白及肌酐在多发性骨髓瘤诊断中的价值

目的 探讨血清胱抑素C（cystatin C,Cys-C）、β2-微球蛋白（β2-microglobulin,β2-MG）及肌酐（creatinine,Cr）在多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）中的诊断意义.方法 使用日立7600全自动生化分析仪检测2010年2月-2014年1月海南农垦那大医院及南方医院住院的43例初诊MM患者和30例健康体检者血清Cys-C、β2-MG、Cr、尿酸（uric acid,UA）及尿素的水平.应用受试工作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）评价Cys-C、β 2-MG和Cr在MM诊断中的价值.结果 MM患者Cys-C水平（2.06±0.82） mg/L明显高于健康对照组（0.71±0.18） mg/L（P＜0.01）;并且与β2-MG呈明显正相关（r=-0.523,P＜0.05）.Durie-Salmon分期中,Ⅲ期CysC水平（3.14± 1.38） mg/L明显高于Ⅱ期（1.35±0.16） mg/L和Ⅰ期（0.97±0.18） mg/L（P＜0.01）;Ⅲ期与Ⅰ期、Ⅱ期血清Cr和β2-MG水平比较差异有统计学意义（P＜0.05）.不同免疫分型中,轻链型血清Cys-C水平（2.75±1.01） mg/L明显高于不分泌型（1.49±0.53） mg/L（P＜0.05）;IgA型血清β2-MG水平（7.48±4.52） mg/L明显高于不分泌型（5.37±2.64） mg/L（P＜0.05）.ROC分析显示,CysC的曲线下的面积（area under curve,AUC）及其95％置信区间（0.912,95％CI：0.891～0.960）高于β2-MG（0.853,95％CI：0.821 ～ 0.894）和Cr（0.741,95％CI：0.702 ～ 0.795）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 Cys-C可以作为诊断MM患者肾功能早期损害的指标之一,且优于β2-MG和Cr,对临床分期、肿瘤负荷及判断预后有一定的帮助.