激光共聚焦扫瞄显微镜检测急性白血病骨髓基质细胞Cx43表达

目的 观察急性白血病骨髓基质细胞上connexin43蛋白的表达以及GJIC功能.方法 体外培养正常及急性白血病骨髓基质细胞,采用激光共聚焦扫瞄显微镜观察二者Cx43表达的变化;采用荧光漂白恢复技术比较二者之间GJIC功能的差异.结果 正常及急性白血病骨髓基质细胞上Cx43表达的像素密度分别为(81.04±8.84)%和(34.10±17.91)%,两组间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 急性白血病骨髓基质细胞间通讯功能较正常骨髓基质细胞明显减弱.     

富于T细胞间变型弥漫大B细胞淋巴瘤1例报道并文献复习

弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)是临床上常见的非霍奇金淋巴瘤(NHL)的亚型,占NHL的30％左右,其临床表现、组织学形态和临床预后等方面存在着很大的异质性,容易骨髓侵犯.根据WHO分类,其按组织学形态改变分为四种变异型:中心母细胞型、免疫母细胞型、富于T细胞/组织细胞型及间变型[1].富于T细胞/组织细胞型和间变型两种形态变异同时发生,十分少见.现报道1例少见的富于T细胞间变型DLBCL,对其临床实验室特征进行分析并文献复习.     

重庆市血液病实验室质量控制的现状及需求横断面调查研究

目的：了解重庆市血液病实验室质量控制的现状及需求。方法自行设计问卷,抽取重庆市各区县医院60家进行调查,主要调查内容涉及工作基础、规章制度、人员条件等问题。结果共发放60份问卷,有效问卷57份。研究对象中,仅14．04％为血液病专科实验室,大多数都能完成基本检验项目,66．67％有完整实验流程及标准操作规程（SOP）文件,人员以中级职称和本科学历为主。35．08％实验设备超过500万元,45．61％有专人检查记录。约45．61％出检验报告时会参考临床表现,并严格审签,大多数研究对象反应设备落后、人员缺乏,主要希望建立远程会诊系统和开展学习进修。结论重庆市各医院血液病实验室整体质量较好,建议加强全面质量控制,建设血液病应急救援系统,以提升实验室质量和水平。     

rhG-CSF联合rhTPO促进异基因造血干细胞移植后造血重建的临床研究

目的 探讨重组人粒细胞刺激因子(recombinant human-granulocyte colony stimulating factor,rhG-CSF)和重组人血小板生成素(recombinant human-thrombopoietin,rhTPO)促进异基因造血干细胞移植后造血功能重建的作用.方法 选取15例异基因造血干细胞移植患者,其中同胞间全相合移植6例,非血缘全相合移植7例,半相合移植2例,于移植后 1d予以rhG-CSF(300μg/d)和rhTPO(15 000u/d)治疗,观察患者造血重建的时间和相关并发症发生情况.结果 患者于移植 15d( 8～ 20d)N＞0.5×109/L,移植 19d( 11～ 23d)PLT＞30×109/L,提示造血功能重建.移植 30d复查短串联重复序列(STR)检测,均提示重建造血为供者造血.随访至今,所有患者造血稳定重建.15例患者中10例出现感染、发热;15例患者均出现不同程度的皮下出血,多表现为皮肤淤点淤斑,2例患者出现鼻出血;3例患者在造血重建前夕出现全身骨痛.3例出现Ⅱ度以下急性移植物抗宿主病(GVHD),2例患者出现轻度的慢性GVHD.结论 rhG-CSF联合rhTPO促进异基因造血干细胞移植后造血重建疗效肯定,减少移植感染、出血等并发症的发生率,缩短层流病房住院日,减少血小板、红细胞等血液制品的输入量,降低移植费用.     

骨髓切片组织病理检查在血液病诊断中的临床应用

目的 研究骨髓切片组织病理检查对血液病的诊断价值.方法 采用骨髓活组织病理学、骨髓涂片细胞形态学检测方法.结果 300例血液病患者中骨髓细胞形态学检查与骨髓活检结果完全吻合者215例(占71.67%),骨髓形态学不能肯定诊断而经骨髓活检结果确诊的病例30例(占10%),骨髓细胞形态学检查与骨髓活检结果不相吻合的有55例(占18.33%).结论 骨髓活检病理诊断是对骨髓形态学检查的补充和修正,二者合用能提高血液病诊断的正确率.在MDS、AA、MF的诊断上,骨髓活检病理检查具有决定性的意义,对转移性肿瘤和急性髓细胞白血病是否合并骨髓纤维化的诊断也具有特殊价值.     

放烧复合伤骨髓基质细胞某些粘附分子表达的意义

目的：深入探讨放烧复合伤对造血微环境损伤的机制。方法：采用流式细胞仪观察了５．０Ｇｙγ线放射损伤、１５％Ⅲ度体表面积烧伤和放烧复合伤小鼠骨髓基质细胞表达血管细胞粘附分子（ＶＣＡＭ－１）、纤维连接素（Ｆｎ）、层粘素（Ｌｎ）和Ⅳ型胶原（ＣｏｌⅣ）等细胞外基质成分的变化。结果：在本实验条件下，随着伤后时间的延长，骨髓基质细胞表达ＶＣＡＭ－１、Ｆｎ、Ｌｎ和ＣｏｌⅣ的水平具有以单烧组＞正常组＞复合伤组＞单放组的趋势；单烧组具有以伤后３、７、１４ｄ最高，单放组具有以伤后３、７ｄ最低的时效特点。结论：骨髓微环境基质细胞粘附功能的损伤可能是放烧复合伤造血功能障碍发生的重要机制之一。     

小剂量MIP-1α联合IL-8对培养人造血干/祖细胞的保护作用

目的 了解小剂量巨噬细胞炎症蛋白-1α(Macrophage inflammatory protein-α，MIP-1α)联合白细胞介素-8(Inter-Ieukin-8，IL-8)在大剂量化疗药物阿糖胞苷(Ara-C)存在的情况下，对正常造血干／祖细胞的体外保护作用。方法 取患者骨髓，离心分离单个核细胞，根据随机单位组方差分析设计(The random complete block design variance analysis),将每例标本分为空白组(不加MIP-1α和IL-8)；10ng/ml联合组(加入10ng/ml的MIP-1α和IL-8)；1ng/ml联合组(加入1ng/ml的MIP-1α和IL-8)；单用MIP-1α组(加入20ng/ml的MIP-1α)；单用IL-8组(加入20ng/ml的IL-8)。将所得细胞培养在含IL-3和GM-CSF的液体体系中，先后经MIP-1α和／或IL-8以及大剂量Ara-C处理(以上步骤简称为“Ⅰ期处理”)。之后作胎盼蓝拒染实验，流式细胞仪计数各组CD34^ 细胞，Ⅱ期液体培养，集落培养，以了解经Ⅰ期处理后不同组别中正常造血干／祖细胞的存活情况及增殖能力。部分标本在Ⅰ期处理时只经MIP-1α和／或IL-8处理，不经Ara-C处理，用流式细胞仪检测所得细胞的周期分布。结果 10ng/ml浓度下MIP-1α与IL-8联合组中，无论是Ⅱ期液体培养细胞生长情况、集落生长情况，还是CD34^ 细胞计数，均高于其它组；而周期分析结果则表明，10ng/ml MIP-1α和IL-8联合组中的G0／G1期细胞低于处理前组而高于其它对照组。结论 10ng/ml浓度的MIP-1α与相同浓度的IL-8联合使用，能相互协同，将CD34^ 细胞抑制在G0／G1期，进而增强正常CD34^ 细胞抗Am-C的作用。     

-80℃冻存外周血干细胞21例分析

目的：探索一种操作简单、干细胞回收率和存活率高、成本低廉的外周血浆存方法。方法：采用终浓度为5％二甲基亚砜（DMSO），3％羟乙基淀粉（HES）和4％人血白蛋白（HSA）的干细胞保护剂直接－80℃冰箱冰存外周血干细胞，并检测不同时相点（1、3、6、9、12个月）外周血干细胞的细胞活性，单个核细胞（MNC）和CFU－GM、CD34^ 细胞的回收率。结果：随着保存时间的延长，观察到12个月时，冻存干细胞的细胞活性、MNC回收率和CD34^ 细胞回收率分别为86．46％、88．58％、87．65％，与冻存1个月相比无统计学差异（P＞0．05），足以保障干细胞移植后造血重建的成功。结论：5％DMSO，3％HES和4％HAS作为干细胞冷冻保护剂直接－80℃冰箱冻存外周血干细胞是一种简便、实用、安全、可靠、成本低的外周血干细胞冻存方法，具有广泛的临床推广价值。     

血小板相关抗体检测对血小板减少症的临床应用价值

目的 探讨多种疾病患者因免疫紊乱导致血小板减少症时血小板相关抗体(PAIgG)的变化与血小板数的关系。方法 用ELISA方法检测病人血浆中的PAIgG。结果 PAIgG在原发性血小板减少性紫癜阳性率为83％，系统性红斑狼疮阳性率为66％，甲状腺功能亢进症阳性率为43％，脾亢阳性率为45％，骨髓纤维化阳性率为44％，再生障碍性贫血阳性率为25％。结论 多种血小板减少症均存在PAIgG值的升高；PAIgG值与血小板计数成反比；检测PAIgG对血小板减少症临床诊断及疗效判断有意义。     

腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰对骨髓基质细胞功能的影响

目的　通过腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰骨髓基质细胞 (bonemarrowstromalcells,BMSCs) ,探讨基因修饰对BM SCs主要功能的影响。方法　以CTLA4Ig 重组腺病毒转染BMSCs,通过测定粘附于BMSCs层的3 H TdR标记CD34+ 细胞的cpm值 ,观察基因修饰对其粘附力影响 ;通过观察骨髓基质细胞支持CD34+ 扩增的细胞总数及集落形成细胞数 (colonyformingcell,CFC)的变化 ,评价基因修饰对BMSCs支持CD34+ 细胞扩增能力的影响。结果　转染组与对照组BMSCs对CD34+ 细胞的粘附力及支持CD34+ 细胞扩增的能力均无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　适当条件下 ,腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰BMSCs不影响其对CD34+ 细胞的粘附力及支持CD34+ 细胞扩增的能力