人苯丙氨酸羟化酶突变体p.R243Q、p.R241C和p.Y356X的体外表达及功能研究

目的 分析3种苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase, PAH)突变体(p.R243Q、p.R241C和p.Y356X)的体外表达,确定3种突变体的致病性。方法 利用生物信息学技术预测PAH突变体对PAH蛋白结构和功能的影响。构建相应的PAH突变型质粒,在人胚胎肾细胞HEK293T中进行表达,采用定量逆转录聚合酶链反应检测3种PAH突变体的mRNA表达水平,利用蛋白质印迹法与酶联免疫吸附试验检测突变体的PAH蛋白表达水平。结果 生物信息学分析预测结果显示,3种突变体均具备致病性。突变体p.R243Q和p.R241C质粒在HEK293T细胞中的mRNA表达水平与野生型类似(P>0.05),而p.Y356X突变体质粒的mRNA表达水平明显下降(P<0.05)。3种突变体PAH蛋白的表达水平与野生型相比均显著降低(P<0.05)。p.R241C和p.Y356X的细胞外PAH蛋白浓度较野生型降低(P<0.05),p.R243Q与野生型相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 p.R243Q、p.R241C和p.Y356X降低真核细胞中...     

哮喘和慢性阻塞性肺疾病重叠综合征研究现状

<正>支气管哮喘(简称哮喘)和慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)在理论上分属于两种不同的疾病,但有时在临床实践中哮喘和慢阻肺却难以明确区分开来。2014年GOLD科学委员会共同制定的专家共识根据现有的文献和共识进行详细回顾,该文件将哮喘和慢阻肺重叠综合征(ACOS)作为一个独立章节进行了论述。一、ACOS的定义及诊断支气管哮喘是一种公认的变态反应性疾病,通常从儿童时期开始发病,其特点是气流阻塞完全可     

适宜电刺激对成骨细胞平面培养下细胞增殖分化及BMP-2表达的实验研究

目的:观察适宜电流刺激成骨细胞在平面培养下成骨细胞增殖及分化,明确是否具有促进增殖、分化作用,并观察电流刺激下BMP-2表达的变化。方法:将来自家兔幼仔颅骨提取的成骨细胞进行平面培养,2代之后进行分类培养,实验组进行电流刺激,并给予相同的刺激时间和刺激强度,对照组未进行电流刺激。之后在不同时间点进行细胞增殖、分化检测及BMP-2蛋白表达分析。结果:实验组8d内光镜下可见大量成骨细胞增殖,成骨细胞呈多形性改变,6～8d细胞内出现少量钙化点,而对照组骨细胞增殖缓慢。实验组分化明显,碱性磷酸酶及钙结节染色阳性,碱性磷酸酶定量分析显示逐渐增加。实验组经免疫组化分析显示BMP-2量逐渐增加。结论:电刺激可促进成骨细胞的增殖分化而达到实现细胞数目的短时间增加,细胞内部经过免疫组化染色后显示BMP-2表达增加。     

关节镜联合内固定治疗后外侧胫骨平台骨折疗效分析

目的探讨关节镜联合内固定治疗后外侧胫骨平台骨折患者的临床疗效及安全性.方法将90例(90膝)后外侧腔骨平台骨折患者按手术方式不同分为关节镜组45例,传统组45例,关节镜组采用膝关节镜辅助下实施内固定手术治疗,传统组采用传统切开复位内固定手术治疗,术后观察6个月.比较两组手术时间、切口长度、术中出血量、住院时间、切口愈合时间、骨折愈合时间;采用Rasmussen评分标准评定膝关节功能;随时记录两组术后并发症发生情况.结果关节镜组术中出血量显著少于传统组(P<0.0l),切口长度、切口愈合时间、住院时间显著短于传统组(P<0.01).术后6个月关节镜组Rasmussen评分行走能力、膝关节疼痛、伸膝关节、关节稳定性、膝关节活动度及主观评分总分显著高于传统组(P<0.05或0.01);髁部变宽、关节面塌陷、成角畸形及放射学评分总分显著高于传统组(P<0.05或0.01).关节镜组术后并发症发生率(2.2%)显著低于传统组(13.3%)(P<0.05).结论膝关节镜辅助下实施内固定手术治疗后外侧胫骨平台骨折具有手术创伤小、术后恢复快等优点,有利于患者术后膝关节功能恢复,安全性高,值得在临床推广应用.     

外科护理学虚拟临床病例软件的设计和开发

介绍了外科护理学虚拟临床病例软件的设计和开发过程,为护生提供开展自主、协作、研究性学习的临床虚拟情境平台和资源,可以更好地辅助外科护理学的教学工作,提高护理教学效果和效率;建立一个临床病例相关资源库,为教师和学生提供系统、丰富的临床病例资源库。     

影响管理效能的因素分析

管理效能是管理活动中的重要方面,是管理活动的最终目标和归宿,也是评价和衡量管理活动有效性的基本维度.在我国目前的管理学和行政学的研究中,"效能"问题已引起了很多研究者的重视.     

正交设计研究金银花总黄酮提取工艺

目的优选金银花中总黄酮乙醇提取最佳工艺。方法建立金银花总黄酮含量测定的比色法,并利用正交试验设计,以总黄酮得率为指标,考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间和提取次数对金银花总黄酮乙醇提取工艺的影响。结果最佳提取工艺为金银花粉末用12倍量90％的乙醇回流提取3次,每次1h。结论该提取工艺条件简单、稳定、可行。     

沉默IL-37表达对骨肉瘤细胞的影响及其作用机制研究

目的 探讨IL-37对骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法 定量逆转录PCR（RT-qPCR）检测人正常成骨细胞（hFOB1.19）和骨肉瘤细胞（U2OS、MG63、Saos-2）中IL-37 mRNA的表达情况;设计沉默IL-37的小干扰RNA（siRNA）序列转染骨肉瘤细胞系,将转染干扰序列si...     

利福平硫酸钙植入剂的活体内药代动力学研究

目的研究利福平硫酸钙植入剂的活体内局部植入药代动力学特点。方法绘制血浆和肌肉组织利福平校正曲线,将植入剂植入大鼠肌袋内,定时处死动物,取血浆和肌肉组织测定利福平药物浓度。结果利福平硫酸钙植入剂在肌肉内释放的初期释药量大,局部缓释时间可持续45d以上,即使45d时其释放浓度(0.55μg/ml)仍然高于对结核分枝杆菌的最小抑菌浓度(0.018μg/ml),全身血药浓度一直保持较低的安全水平,血药浓度在术后第1天达到最高(0.18μg/ml),随后缓慢下降,在术后10d不能被检测到。结论利福平硫酸钙植入剂在局部植入时,具有良好的局部缓释效果和较低的全身浓度。