外科学总论实验双语教学的实践和体会

<正>近年来,国际学术文化交流日趋频繁,来华留学生的数量也不断增长。在我校主要是医科留学生,主要采用双语教学模式,如何做好留学生教学工作已成为我们当前必须解决的问题。外科学总论是外科     

腺病毒介导的血管内皮生长因子体外靶向性转染心肌细胞

目的:构建以鼠心肌轻链蛋白基因(mlc-2v)为启动子、携带人血管内皮生长因子hVEGF165基因的重组腺病毒载体,检测该重组腺病毒载体对心肌细胞转染的靶向性.方法:酶切腺病毒载体PDC315自身启动子CMV,构建腺病毒载体PDC317,分别接入hVEGF165、mlc-2v基因,构建腺病毒载体PDC-mlc-hVEGF165.鉴定正确后,将PDC-mlc-hVEGF165与Lipofectamine共转染至293细胞,经同源重组获得以mlc-2v为启动子、携带hVEGF165基因的重组腺病毒Ad-mlc-hVEGF165,同步构建无靶向性的重组腺病毒Ad-hVEGF165.扩增并测定滴度后,Ad-hVEGF165、Ad-mlc-hVEGF165分别转染体外培养的心肌细胞、骨骼肌细胞及平滑肌细胞,利用ELISA、Western印迹分析等方法检测Ad-mlc-hVEGF165转染心肌细胞的靶向性.结果:构建的病毒正确,病毒滴度为2.8×109 pfu/ml.转染3 d后,Ad-hVEGF165组在各培养细胞的上清液及细胞内均检测到VEGF的表达,而Ad-mlc-hVEGF165组仅在心肌细胞中有VEGF的表达,且Ad-mlc-hVEGF165组心肌细胞分泌的VEGF要少于Ad-hVEGF165组.结论:成功构建了以mlc-2v为启动子、携带人VEGF基因的重组腺病毒Ad-mlc-hVEGF165;该重组载体能体外靶向性转染心肌细胞并使之表达VEGF.     

缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注（I／R）损伤的影响及其机制。方法18只雄性SD大鼠随机分为3组（n=6）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I／R组）和缺血后处理组（IPo组）。采用夹闭双侧肾蒂45min-再灌注6h制备肾脏缺血再灌注损伤模型。IPo组在夹闭双侧肾蒂45min后，再灌注10s，缺血10s，重复3次后，完全恢复肾血流。再灌注6h时开胸，取心脏血后处死大鼠，取肾组织。测定血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）和尿酸（UA）浓度，肾组织中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性；光镜下观察肾组织病理学改变；采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（TUNEL）法检测肾组织中凋亡细胞，光镜下计数凋亡细胞，并计算肾小管上皮细胞凋亡指数（AI）。结果与S组比较，I／R组和IPo组Cr和BUN浓度升高（P〈0．05），UA浓度差异无统计学意义（P〉0．05），肾组织SOD活性降低，MDA含量升高，肾小管上皮细胞凋亡指数增加（P〈0．05），病理损伤明显。与I／R组比较，IPo组Cr和BUN浓度降低（P〈0．05），UA浓度差异无统计学意义（P〉0．05），SOD活性升高，MDA含量降低，肾小管上皮细胞凋亡指数减少（P〈0．05），病理损伤减轻。结论缺血后处理能减轻大鼠肾缺血再灌注损伤，其机制与增强肾脏抗氧化能力和抑制肾组织细胞凋亡有关。     

老年肺肿瘤患者术后综合呼吸功能训练的康复效果

目的探讨综合呼吸功能训练对老年肺肿瘤患者术后肺部并发症的发生率、胸管留置时间、术后住院天数的影响,确定老年肺肿瘤患者术前及术后呼吸功能训练方法。方法便利抽取胸外科老年肺肿瘤患者60例为研究对象,按随机数字表法将其随机分为实验组与对照组,每组30例。所有患者均接受责任护士给予的常规护理,实险组的患者增加一对一的综合呼吸功能训练干预措施。结果两组研究对象术后并发症的发生率、胸管留置时间及术后住院天数的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论（1）综合呼吸功能训练可以有效降低老年肺肿瘤患者术后肺部并发症的发生率、缩短胸管留置时间与术后住院天数。（2）由有效咳嗽、腹式呼吸、缩唇呼吸和节段呼吸训练组成的综合呼吸功能训练适合老年肺肿瘤患者的掌握与应用,能有效提高老年肺肿瘤患者术后的康复效果。     

足三里注射东莨菪碱治疗术后膈肌痉挛11例临床体会

目的:观察东莨菪碱足三里穴位注射治疗术后膈肌痉挛的效果。方法:对11例术后膈肌痉挛患者取双侧足三里,分别穴位注射东莨菪碱稀释液0.15mg穴位注射2.5~3.0ml。结果:显效率为100%。结论:无明显不良反应,疗效满意,方法简单,值得进一步推广。     

白细胞介素-18mRNA在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的：检测IL-18mRNA在非小细胞肺癌及癌组织中的表达,探讨其对非小细胞肺癌发生和发展过程的影响。方法：为非小细胞肺癌患者35例,男24例,女11例,年龄42-76岁,平均56岁,其中鳞癌17例（48.57%）,腺癌13例（37.14%）,腺鳞癌5例（14.29%）。对照组均来自距离肿瘤边缘2-4cm的正常肺组织。肿瘤直径≥4cm者6例（17.14%）;肿瘤直径〈4cm者29例（82.86%）。用RT-PCR法检测35例肺癌肿瘤组织细胞内和癌旁正常组织中的IL-18mRNA水平的表达。结果：在35例非小细胞肺癌中IL-18mRNA阳性表达率为100%,与癌旁正常组织比较,肺癌IL-18阳性表达率明显增高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：IL-18mRNA在NSCLC发展过程中发挥重要作用,其表达与患者年龄、性别和肿瘤组织类型无明显相关性,而与病理学分级、肿瘤T分期和有无淋巴结转移相关。     

脂质体介导入钠/碘同向转运体基因转染肺癌A549细胞及其蛋白表达

目的:研究人钠/碘同向转运体(NIS)基因转染肺癌细胞及其蛋白表达。方法:将体外培养的肺癌A549细胞分为实验组和对照两组:以脂质体Lipofectamihe2000为载体,分别介导转染重组质粒pcDNA3-hNIS和空质粒pcDNA3。NIS基因重组质粒pcDNA3-hNIS进行扩增、纯化,并经酶切鉴定和DNA测序。采用Western Blot法和免疫组化法分别检测转染肺癌细胞中NIS蛋白表达。结果:酶切鉴定和DNA测序结果表明重组质粒pcDNA3-hNIS中插入的hNIS基因片段大小、方向正确。WesternBlot法和免疫组化染色结果显示实验组有NIS蛋白表达,其阳性率达70.6%且主要分布于细胞膜而对照组无表达。两组比较有显著性差异(P=0.000)。结论:脂质体Lipofectamine 2000介导转染人钠/碘同向转运体基因pcDAN3-hNIS肺癌细胞能够成功地表达NIS蛋白。     

某街道婴幼儿佝偻病患病情况调查

[目的]了解本街道婴幼儿佝偻病(维生素D缺乏性佝偻病)患病率,分析其发病原因,以采取有效的预防措施.[方法]对2006年来我所儿童保健科体检的3个月～3岁的婴幼儿400名进行佝偻病患病情况调查,同时进行骨碱性磷酸酶(BALP)活性测定.[结果]依据统一诊断标准,在400例婴幼儿中确诊为佝偻病患者有66例,患病率为16.5%.明显低于全国婴幼儿平均患病率40.7%,同时发现婴儿佝偻病患病率随年龄增加而逐渐降低,以9个月以内发病率最高.[结论]母乳喂养婴幼儿佝偻病患病率明显低于人工喂养组,预防佝偻病应提高母乳喂养率,合理添加辅食,人工喂养儿可选用维生素D强化配方奶;BALP检测为佝偻病早期诊断提供了参考依据,弥补了简易诊断的不足,两者结合,综合诊断可提高诊断质量,有利于佝偻病的早发现早防治.     

Livin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP)家族的新成员Livin 及其两种异构体Livinα和Livinβ在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC 临床病理的关系.方法: 采用逆转录多聚酶链式反应( RT- PCR) 检测NSCLC 组织中Livinα mRNA 和Livinβ mRNA 的表达.结果: 58例NSCLC 组织中Livin mRNA 表达阳性率为74.1%,而在癌旁组织低表达(5.1% ,P<0.01) .Livin mRNA 表达与患者年龄,病理分型﹑肿瘤分化程度﹑淋巴结转移及TNM分期均无明显相关关系.结论: Livin 在非小膈、胸壁等复杂疾病的诊断和治疗.细胞肺癌组织中特异性地高表达,可能与肿瘤的发生﹑发展密切相关,可能成为诊断和治疗的新靶点.     

Livin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的：探讨凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族的新成员Livin及其两种异构体Livinα和Livinβ在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与NSCLC临床病理的关系。方法：采用逆转录多聚酶链式反应（RT—PCR）检测NSCLC组织中LivinαmRNA和LivinβmRNA的表达。结果：58例NSCLC组织中LivinmRNA表达阳性率为74．1％,而在癌旁组织低表达（5．1％,P〈0．01）。LivinmRNA表达与患者年龄,病理分型、肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期均无明显相关关系。结论：Livin在非小细胞肺癌组织中特异性地高表达,可能与肿瘤的发生、发展密切相关,可能成为诊断和治疗的新靶点。