端粒酶反义寡核苷酸对乳腺癌端粒酶活性及细胞生长的影响

目的　探讨端粒酶反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞端粒酶活性的影响及抑制端粒酶活性以控制乳腺癌细胞生长的可能性。方法　采用 10 μmol/L与端粒酶催化亚基 (hTRT )mRNA互补的反义寡核苷酸处理乳腺癌细胞 ;于处理后 2 4、72h用端粒重复序列扩增及酶联免疫吸附方法检测细胞端粒酶活性 ;于处理后 72h以流式细胞术测定细胞周期 ;于处理后 12 0h采用原位末端标记法检测细胞凋亡。结果　经hTRT反义寡核苷酸作用后 ,细胞端粒酶活性明显受到抑制 ,至作用后 72h ,端粒酶活性较对照组降低 65 .6% (P <0 .0 5 ) ;细胞生长明显受到抑制 ;细胞周期发生显著变化 :G0 /G1期细胞数增多 ,S期及G2 /M期细胞数则减少 ;细胞增殖指数由 0 .46降低至 0 .2 5 ;并可观察到凋亡细胞的出现 ,凋亡发生率为 12 .5 % ;而无义组及空白对照组以上各指标均无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论　端粒酶反义寡核苷酸可明显抑制乳腺癌细胞端粒酶活性 ,抑制细胞生长和增殖 ,诱导细胞凋亡 ;表明应用反义技术抑制端粒酶活性治疗乳腺癌具有广阔的前景。     

困难的腹腔镜胆囊切除术21例报告

自1999年12月-2005年3月．我们进行困难的腹腔镜胆囊切除术共21例，其中1例中转开腹。现报告如下：     

白银市1994～2003年餐具消毒效果监测情况分析

目的加强饮食业公用餐具消毒的卫生管理，保证消毒质量，保障人民群众的身体健康。方法对辖区内大、中、小型餐饮从业单位的餐具进行每年二次消毒效果监督监测，在现场卫生学调查的基础上，采集餐具样品，监测其大肠菌群和致病菌两项指标。结果自1994～2003年10年共监测饮食业1547户次，采集餐具样7833份，合格4399份，合格率56．16％，其中1996年合格率最高(86．52％)，2001年合格率最低(24．30％)。大型餐饮业餐具消毒合格率(100％)高于中、小型餐饮从业单位(64．99％、43．71％)；不同消毒方法的餐具合格率有显性差异，其中蒸汽、煮沸消毒合格率最高，同时，在合格率低的年份检出致病菌；有无保洁设备也对餐具消毒效果有显影响。结论必须加强餐具消毒效果的监督监测，尤其是中、小型企业单位消毒质量管理；正确使用化学消毒法，消毒后的餐具应存放在保洁设施中，以提高餐具消毒的合格率。     

核素显像对实验性绞窄性肠梗阻的早期诊断

用家兔制成闭袢型、肠系膜静脉阻塞型及肠系膜动脉阻塞型的急性绞窄性肠梗阻模型，并以单纯性肠梗阻组和假手术组为对照。制模后１、４小时从兔耳静脉注射显像剂９９ｍ锝焦磷酸盐，用单光子发射计算机断层（ＳＰＥＣＴ）进行腹部平面显像的动态观察，并测定感兴趣区的摄取比值。结果显示：在闭袢型和肠系膜静脉阻塞型于注射显像剂后，绞窄肠段所在腹侧出现放射性浓聚，显像部位感兴趣区摄取比值明显大于单纯性肠梗阻组和假手术对照组；肠系膜动脉阻塞型上述改变不明显。本实验结果提示：闭袢型和静脉阻塞型绞窄缺血肠段早期有显像剂的聚集；ＳＰＥＣＴ的核素显像技术可作为早期诊断闭袢型和肠系膜静脉阻塞型肠梗阻有价值的辅助手段。     

RT-PCR检测胃癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂mRNA水平表达

目的 研究尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)与胃癌的关系及其在胃癌浸润转移中的作用。方法 用荧光定量RT—PCR方法，分别检测45例胃癌及其癌旁组织中(uPAmMA)水平的表达，并结合患者的临床生物学特征进行分析。结果 45例胃癌组织中，38例为阳性表达，45例癌旁组织中12例表达阳性。在伴有淋巴结转移的胃癌中，uPAmMA阳性例数明显高于无淋巴结转移者，两组例数分别为27和11例。结论 尿激酶型纤溶酶原激活剂uPAmRNA水平在胃癌组织中明显升高，且与胃癌浸润、转移密切相关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在重症肝炎医院感染患者血清中的表达及意义

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)在重症肝炎并发医院感染患者血清中的表达及意义.方法 重症肝炎患者50例,分为发生医院感染组和非医院感染组,以20例健康献血者作为正常对照组,根据抗感染治疗效果又将感染组分为治疗有效组与治疗无效组;分别在治疗前、治疗第7、14天抽取静脉血;用ELISA法检测血清sTRAIL水平,同时检测肝功能相关指标.结果 重症肝炎感染组、非感染组血清sTRAIL水平分别为(10.23±3.31)、(7.43±2.88) pg/ml,正常对照组为(2.38±1.63)pg/ml,感染组和非感染组均明显高于正常对照组(P＜0.01),感染组又明显高于非感染组(P＜0.01);感染组血清总胆红素(TB)、血清白蛋白(ALB)、外周血白细胞(WBC)、中性粒细胞(N)分别为(580.49±140.95)μmol/L、(30.42±3.72)g/L、(8.54±3.58)×109/L、(6.68±3.11)×109/L,非感染组分别为(479.02±145.29)μmol/L、(33.98±4.04)g/L、(6.11±1.82)×109/L、(4.75±2.11)×109/L,感染组TB、WBC、N水平均高于非感染组,ALB水平低于非感染组(P＜0.05或P＜0.01),但血清sTRAIL水平与TB、ALB、WBC、N均无相关性;感染组抗感染治疗有效者在治疗过程中血清sTRAIL水平逐渐下降,治疗前为(10.12±3.11) pg/ml、疗程的第7天为(8.19±2.65)pg/ml、疗程的第14天为(6.72 ±2.83)pg/ml,疗程的第14天明显低于治疗前(P＜0.01);无效组治疗前为(10.36±3.64)pg/ml、疗程的第7天为(10.51±2.97)pg/ml、疗程的第14天为(11.74±3.44)pg/ml,3个时间点的差异无统计学意义;在疗程的第7、14天有效组血清sTRAIL水平均低于同时间点无效组(P＜0.05、P＜0.01).结论 TRAIL可能在重症肝炎医院感染的发生与发展中起重要的作用,可以通过检测血清sTRAIL水平了解重症肝炎医院感染的发生及转归.     

TLR4 shRNA质粒的构建及稳定转染人胰腺癌PANC1细胞株的筛选

目的 构建靶向人TLR4基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒,转染胰腺癌细胞,并筛选出稳定转染的克隆细胞株.方法 采用小分子干扰RNA(siRNA)软件设计3个靶向TLR4基因的shRNA,构建3个质粒表达载体,分别命名为TLR4-1、TLR4-2、TLR4-3;选取抑制效率最高的shRNA质粒,采用脂质体法转染胰腺癌PANC1细胞;实时定量PCR和流式细胞技术检测细胞TLR4 shRNA基因沉默效率和转染效率;G418抗性筛选和有限稀释单克隆形成法挑选培育稳定转染TLR4 shRNA的单克隆细胞系.结果 转染48 h后PANC1细胞瞬时转染效率为(46.72±5.06)％.转染TLR4-1、TLR4-2、TLR4-3的细胞的TLR4mRNA表达水平分别为0.025±0.004、0.027±0.003、0.019±0.006,均显著低于未转染组的0.061±0.018和阴性对照转染组的0.057±0.015(P值均＜0.05).以沉默效果最佳的TLR4-3转染细胞所获得的稳转细胞的转染效率为(82.79 ±8.16)％,较瞬转细胞显著提高(P=0.001);TLR4 mRNA表达水平为0.010±0.002,较瞬转细胞显著下调(P=0.001);TLR4蛋白表达率为(0.54±0.32)％,显著低于未转染细胞的(87.42±5.00)％和转染阴性对照细胞的(82.90±5.00)％(P=0.000).结论 成功筛选到TLR4基因沉默的稳转PANC1细胞.     

趋化因子IL-8与胃癌组织血管再生的相关性实验研究

目的 探讨胃癌组织中趋化因子IL—8的表达与肿瘤血管形成之间的相关性，企以为抗肿瘤血管形成提供新的临床应用途径。方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)半定量方法及酶联免疫吸附试验(ELISA)对胃癌组织中IL—8的基因表达和蛋白分泌情况分别进行测定，对肿瘤再生血管用免疫组织化学方法和抗Ⅷ因子相关抗原抗体进行测定并计数。结果 胃癌组织及转移淋巴结中的IL—8 mRNA水平大多呈高表达(分别是26／29，89．7％和17／20，85％)，蛋白分泌情况与基因表达水平相一致，肿瘤再生血管数与胃癌IL—8 mRNA表达水平呈显著正相关(P＝0．001)。结论 胃癌组织中IL—8的高表达可能与胃癌中血管的形成具有一定的关系，进而影响胃癌的生长与转移，针对IL—8的治疗对抑制肿瘤血管化，控制肿瘤的生长与转移具有一定的价值。     

包皮环切术的改良

包皮环切术,常规采用阴茎根部浸润麻醉,用药量偏大,时有毒副作用发作,并伴有局部组织水肿,甚至血肿.