鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药分子机制的研究

目的了解鲍曼不动杆菌对亚胺培南产生耐药的分子机制。方法收集对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌(imipenem resistant Acinetobacter baumannii，IRAB)无重复株共9株，采用琼脂稀释法进行药敏检测，协同抑制试验、质粒接合试验、Southern杂交、等电聚焦电泳、PCR扩增blavIM、blaIMP、baooxA-23、blaoA-24相关基因及整合子编码序列及其分子克隆和测序，以阐述其分子耐药机制。结果本组IRAB具有多重耐药性；耐药基因分子克隆、测序并结合等电聚焦分析证实均产OXA-23型碳青霉烯酶，质粒接合试验、Southern杂交显示其编码基因定位在染色体上。9株细菌均检测出Ⅰ型整合子基因结构(大小约1．2～4kb)；3株菌检测出Ⅱ型整合子基因结构(1．8～2kb)，均携带了多种耐药基因。结论产OXA-23型p内酰胺酶是本组鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素产生耐药性的重要原因；IRAB整合子基因携带的多种耐药基因与其多重耐药性相关。     

静脉药瘾者继发感染21例的临床特点与诊治

目的：探讨静脉药瘾继发感染的临床特点和诊治要点。方法：诊治21例静脉使用海洛因继发感染患,并作临床资料的回顾性分析。结果：均有肺部感染和右心感染性心内膜炎;痰培养阳性率90．5％,分离出5种病原菌,以肺炎克雷伯菌、葡萄球菌属及白色念珠菌为主;血培养阳性率61．9％,分离出3种病原菌,绝大多数为金葡菌(10／13);尿培养等分离出病原菌7株。经敏感抗生素治疗,19例痊愈。结论：吸毒极易继发多脏器多病原菌感染,应及时、足量应用敏感抗生素治疗。     

头孢哌酮钠／他唑巴坦钠体外抗菌活性和影响因素

目的：评价头孢哌酮钠／他唑巴坦钠（8：1）的体外抗菌活性和影响抗菌活性的因素。方法：采用琼脂平板二倍稀释法测定头孢哌酮钠／他唑巴坦钠（8：1）复方制剂对临床分离致病菌的体外抗菌作用,并与头孢哌酮钠、头孢哌酮钠／舒巴坦钠（1：1）和哌拉西林钠／他唑巴坦钠（8：1）进行比较。结果：头孢哌酮钠与他唑巴坦钠以8：1配比,体外抗菌谱较头孢哌酮扩大,对产酶菌珠,二者合用可不同程度的提高头孢哌酮单用的体外抗菌活性,与头孢哌酮钠／舒巴坦钠（1：1）和哌拉西林钠／他唑巴坦钠（8：1）的抗菌活性相似。杀菌活性的结果显示头孢哌酮钠与他唑坦钠以8：1配比合用对所测产酶菌的MBC90的值是MIC90值的4－8倍,提示头孢哌酮钠与他唑巴坦钠以8：1配比合用对产酶菌有较强的杀菌活性。MIC值随细菌接种量的增高而增高;对G杆菌的MIC值随p;H值升高而下降,对金葡菌、表葡菌的MIC值随pH值升高而上升;MIC值随血清蛋白浓度的提高而增高。结论：他唑巴坦增强了头孢哌酮对β－内酰胺酶的稳定性,头孢哌酮钠／他唑巴钠（8：1）有较强的抗菌和杀菌活性。细菌所处的条件不同会影响其抗菌活性。     

携qnrA基因肠杆菌科细菌的耐药性及其分子机制研究

目的了解质粒定位的喹诺酮类耐药基因qnrA在肠杆菌科细菌中的发生率、耐药表型特征及其分子机制。方法收集2003-2004年深圳地区临床分离的肠杆菌科细菌332株,采用引物特异性PCR结合测序识别qnrA阳性株、gyrA和parC基因耐药变异及超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）或AmpC酶基因;K-B法、琼脂倍比稀释法和E-test法进行qnrA阳性株的药敏检测,表型确认实验识别产ESBLs细菌。结果qnrA阳性株的总检出率为3.9%,以阴沟肠杆菌（15.6%）为高;qnrA阳性株具有多重耐药的特征,多数伴产ESBLs并存在gyrA及parC基因的耐药变异;qnrA基因定位在Sul1型Ⅰ类整合子In37或InX上。结论质粒定位的qnrA基因,是导致肠杆菌科细菌对喹诺酮类抗菌药物产生耐药的重要原因,其潜在的水平传播能力及多重耐药的遗传学背景,是临床抗感染治疗的严峻挑战。     

鲍曼不动杆菌中CarO表达、序列突变与亚胺培南敏感性关系的研究

目的研究外膜蛋白CarO的表达、序列突变与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的关系。方法收集鲍曼不动杆菌8株．E—test鉴定亚胺培南敏感性;用脉冲场凝胶电泳（PFGE）鉴定菌株同源性;PCR法检验CarO基因,并进行序列分析：RealtimePCR法检验CarOmRNA的表达;SDS电泳法比较CarO蛋白的表达。结果本实验发现4株耐药菌株CarO序列同源性高;所有菌株中均存在CarO基因,但亚胺培南敏感及耐药菌株基因序列相似性仅87％,敏感菌株与耐药菌株均有CarOmRNA基因表达,且两者表达水平差异无统计学意义;SDS电泳也发现其基因序列不同者CarO蛋白分子量不同。结论CarO基因序列改变可能与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的变化有关。     

细胞内抗嗜肺军团菌药物有效浓度测定

【目的】 探讨红霉素､环丙沙星､左氧氟沙星､莫西沙星4种抗菌药物对细胞内嗜肺军团菌的抗菌活性｡【方法】 分别采用E-test法和有限稀释法测定上述4种药物对嗜肺军团菌ATCC 33152的细胞外抗菌活性,再用噻唑蓝比色法(MTT法)测定上述药物对嗜肺军团菌ATCC 33152的细胞内抗菌活性｡【结果】 细胞外抗菌活性E-test法:红霉素0.047 μg/mL､环丙沙星0.38 μg/mL､左氧氟沙星0.125 μg/mL､莫西沙星0.125 μg/mL;有限稀释法:红霉素0.125 μg/mL､环丙沙星0.03 μg/mL､左氧氟沙星0.016 μg/mL､莫西沙星0.016 μg/mL｡4种药物的细胞内抗菌活性分别为:红霉素0.25 μg/mL､环丙沙星0.016 μg/mL､左氧氟沙星0.016 μg/mL､莫西沙星0.004 μg/mL｡【结论】 氟喹诺酮类药物在U937细胞模型中对嗜肺军团菌ATCC 33152具有很强的细胞内抗菌活性｡其中莫西沙星的细胞内抗菌活性最强｡MTT法是一种行之有效的用于检测药物对细胞内嗜肺军团菌抗菌活性的方法,可同时检测并对比各种药物样本的细胞内抗菌活性｡     

抗菌药物诱导大肠杆菌内毒素释放的研究

目的：探讨不同类型的抗菌药物释放细菌内毒素潜能和速率的不同。方法：选择５ 种不同类型抗菌药物单独或联合作用于大肠杆菌，比较４ ｈ 期间游离内毒素，同时作菌落计数和细菌形态学检查。结果：亚胺培南西司他丁杀菌作用和释放内毒素最快，但释放内毒素量较少；头孢他啶释放内毒素较快，量较多；环丙沙星释放缓慢，量中等；阿米卡星释放缓慢，量最小；头孢曲松致细菌丝状体形成，杀菌并释放内毒素最慢但量最大；阿米卡星和头孢曲松联合用药有协同抗菌作用，且明显减少头孢曲松释放内毒素的量，与单独使用阿米卡星释放内毒素的量近似。结论：不同类型抗菌药物诱导细菌内毒素释放的量和速率不同。     

静脉使用海洛因致继发感染的临床特点及诊疗

目的 探讨静脉使用海洛因继发感染的临床特点和诊断治疗要点。方法 对１７例静脉使用海洛因继发感染患者的临床资料作回顾性分析。结果 均有肺部感染和右心感染性心内膜炎;痰培养阳性率８８％,分离出５种病原菌,血培养阳性率６５％,分离出３种病原菌,尿培养等分离出病原菌６株。经敏感抗生素治疗,１５例临床痊愈。结论 吸毒极易经发多脏器多病原菌感染,应及时、足量应用敏感抗生素治疗。     

业务测验(124)答案与题解

答案１．Ｃ１０．Ｃ１９．Ｂ．Ｄ２．Ｅ１１．Ａ．Ｃ．Ｅ２０．Ａ．Ｂ．Ｃ．Ｄ．Ｅ３．Ｅ１２．Ｂ．Ｄ２１．Ａ．Ｂ．Ｄ．Ｅ４．Ａ．Ｃ．Ｅ１３．Ａ．Ｄ．Ｅ２２．Ａ．Ｃ．Ｄ５．Ａ１４．Ｂ．Ｃ２３．Ｂ．Ｃ．Ｄ．Ｅ６．Ｂ．Ｅ１５．Ｄ２４．Ａ．Ｂ．Ｄ．Ｅ７．Ａ．Ｂ．Ｄ...     

结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药的分子机制及其快速鉴定

目的：了解结核分枝杆菌乙胺丁醇(EMB)耐药的临床分离株embB基因突变的情况，并探索快速检测结核分枝杆菌EMB耐药性的实验方法。方法：应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术和PCR扩增产物测序方法。分析结核分枝杆菌EMB耐药和敏感各30株的embB基因。结果：以结核分枝杆菌H37RV标准株为对照。发现30株EMB耐药株中有11株(36．7％)embB基因扩增产物SSCP泳动异常，部分耐药菌株测序分析证实为306位密码子突变；而30株敏感株的embB基因扩增产物SSCP泳动均无异常。结论：embB基因突变是结核分枝杆菌EMB耐药的重要机制之一；PCR-SSCP技术可能成为一种检测结核分枝杆菌EMB耐药性的准确和快速的实验方法。