一种合成多肽——PLNG自由穿膜现象初探

目的 研究人工设计合成的多肽PLNG在不同作用环境条件下的跨膜运动现象。方法 体外培养不同组织来源的鼠细胞及CHO细胞、BEL细胞,用免疫荧光观察不同浓度、不同温度、不同反应时间条件下,PLNG的穿膜能力及PLNG对不同类型的细胞（CHO细胞、BEL细胞、成年大鼠肝细胞、幼大鼠肝细胞、成年大鼠心肌细胞、幼大鼠心肌细胞、成年大鼠神经细胞、幼大鼠神经细胞）的穿膜特性。结果 PLNG在不同作用环境条件下对细胞膜都有穿透作用,且进入细胞的量近乎相同。结论 实验观察到PLNG具有广谱的穿膜能力,这种穿膜能力在一定范围内对温度、时间及PLNG浓度不敏感;而且这种穿膜能力不受组织特异性的限制。     

尿毒症患者载脂蛋白A—Ⅳ血清水平的初步研究

用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测了我国尿毒症患者血清中载脂蛋白Ａ－Ⅳ（ａｐｏＡ－Ⅳ）的水平,并分析了它与ａｐｏＡ－Ⅰ、ＴＧ和尿毒症指标之间的关系。结果显示,与正常人群组相比较,尿毒症患者血清ａｐｏＡ－Ⅳ水平显著增高（Ｐ〈０．０５）;ａｐｏＡ－Ⅰ、ＴＧ无显著差异（Ｐ〉０．０５,Ｐ〉０．０５）;ＢＵＮ、Ｃｒ、ＵＡ显著增高（皆Ｐ〈０．０５）．通过回归分析,两组回归分析,两组人群ａｐｏＡ－ＩＮ的血清水平     

医学生物化学教学的几点体会

为提高医学生的综合素质,培养具有扎实基础、宽领域的医学人才,通过对生物化学理论课和实验课的教学实践,探索有关能够提高医学生学习能动性、培养科学思维能力和科研工作能力、增强创新意识和创新能力的新的教学方法与手段。     

RGD肽类似物的合成及活性测定

 目的合成RGD(精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸)肽类似物-AoGDw(ω-氨基辛酸-甘氨酸-天门冬氨酸-色氨酸),研究其结构对血小板聚集功能的影响。方法采用固相法合成AoGDW,经Sephadex G-10纯化,RP-HPLC(反相高效液相色谱法)、质谱和氨基酸组成分析对其进行鉴定,并采用比浊法测定其抗血小板聚集的活性及稳定性。结果获得了纯度为98.3%的目的肽、质谱和氨基酸组成分析结果均与理论值一致。AoGDW及对照组抑制血小板聚集的IC₅₀分别为(4.7l±2.51)和(61.82±8.08)μmol·L^-1在血浆中孵育3 h,仍保持100%的活性。结论AoGDW具有更强的抗血小板聚集的活性及稳定性,说明与RGD序列紧邻的氨基酸残基对其功能有重要的影响。     

超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的体外标准化实验

背景:超顺磁性氧化铁颗粒标记成像可在体观察标记细胞移植后情况,但结合临床细胞治疗剂量,其标记浓度及标记时间对细胞标记率、标记活性及标记后成像效果的综合影响还需进一步分析.目的:筛选超顺磁性氧化铁体外标记大鼠骨髓间充质干细胞的标准化剂量,拟为体内成像提供最佳标记"浓度-时间".设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2008-02/10在山西医科大学完成.材料:清洁级Wistar大鼠10只,由山西医科大学动物实验中心提供.Resovist中含超顺磁性氧化铁铁颗粒28 g/L,为德国Schering公司产品.方法:全骨髓法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞.取Resovist,分别配制含终浓度为0,25,50,75,100,150 mg/L超顺磁性氧化铁的培养基,加入P3代骨髓间充质干细胞中进行孵育标记.主要观察指标:普鲁士蓝法检测细胞标记率,锥虫蓝拒染法检测标记细胞活性,观察标记细胞体外磁共振成像情况.结果:细胞标记率达100%,随着标记时间的延长,胞质内蓝染颗粒逐渐减少.标记1 d和3 d时,与0 mg/L超顺磁性氧化铁组比较,25,50 mg/L组锥虫蓝拒染率无明显差异(F=0.28～3.15,P0.05);与25 mg/L超顺磁性氧化铁组比较,50 mg/L组锥虫蓝拒染率无明显差异(F=0.28～0.79,P0.05).体外磁共振成像示标记3 d时,标记浓度为50 mg/L组的T2WI及T2·WI信号降低最明显.结论:超顺磁性氧化铁"50 mg/L-3 d"体外标记效率高,对细胞活性无影响,且磁共振成像信号降低最明显,为最适"浓度-时间"组合.     

农村停学留守儿童心理咨询案例及其相关思考

来访者,轩轩(化名),八年级学生,男,2019年春季学期期中考试后因被老师处罚而停学在家,被母亲带到心理咨询室。心理咨询师与来访者建立了良好的咨访关系。根据来访者的情况,咨询师采用了认知疗法和简快身心积极疗法。使用空椅技术对他与老师之间的心理冲突进行了处理,咨询取得良好效果。     

NOD鼠甲状腺炎动物模型T细胞克隆的建立

目的为了阐明实验性免疫性甲状腺炎的诱发机制,本研究以甲状腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)为抗原,树突状细胞(dendritic cells,DCs)为抗原提呈细胞(antigen-presenting cells,APCs),建立了T细胞克隆。方法NOD鼠饲养于无菌环境中喂养0.05%碘化钠8周后,每2周采血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测Tg水平,然后每只小鼠用100μg Tg的剂量混于完全弗氏佐剂(complete Freund adjuvant,CFA)中免疫小鼠2次,用增殖实验优化Tg的含量,寻找DCs摄取提呈Tg的最适抗原量,然后将免疫后鼠的脾细胞作为T细胞与同基因鼠的与抗原孵育过的DCs培养。结果建立了3个Tg特异性的T细胞克隆,这些细胞克隆在体外培养时间>2年以上,流式细胞仪检测其表型均为CD4+,而且分泌干扰素(IFN)-γ,不分泌白细胞介素(IL)-4。结论DCs起APCs的作用,在T细胞系及T细胞克隆的建立中起极为重要的作用。否则,T细胞即使在Tg及IL-2存在的培养环境中也仅能存活数天,此实验结论将为研究实验性免疫性甲状腺炎的诱发机制提供理论依据和实验手段。     

目的基因NCAM1在人神经管缺陷中的差异表达的研究

目的探究NCAM1在人类神经管畸形胚胎中的作用机制。方法提取NTDs组以及同周对照组胚胎脑组织，应用人类基因组U133Plus2．0芯片杂交，比较得出差异表达谱。所有差异表达基因按照功能分类。检测目的基因NCAM1的差异表达，并应用半定量RT—PCR方法以及免疫组化验证其mRNA及蛋白的改变。结果芯片显示出NTDs较正常对照组基因谱有较大的差异改变，总共检测到22209条基因的改变，其中2倍以上增高表达的74条，2倍以上降低表达的387条，分属于物质代谢、基因表达调控、信号转导、凋亡等途径。NCAM1呈21．8倍高表达。RT—PCR以及免疫组化也验证其mRNA及蛋白呈现高表达结果（P〈0．01）。结论人类神经管畸形是不同阶段发展的复杂事件，作为细胞表面粘附分子的NCAM1在神经管畸形的发生发展过程中起了重要的作用。     

蚯蚓提取物中蛋白质含量测定方法的研究

目的寻找能够精确反映蚯蚓提取物中蛋白质含量的测定方法。方法采用改良Lowry法和考马斯亮蓝染料结合法(Bradford法)测定蚯蚓提取物蛋白质含量;分别使用2法测定标准牛血清白蛋白(BSA)水溶液在碱性蛋白酶水解前后的蛋白质含量。结果改良Lowry法的测定结果明显高于Bradford法。BSA水溶液酶解前,2法测定的蛋白质含量相当;使用改良Lowry法,BSA水溶液酶解前后的蛋白测定值相近;而使用Bradford法测定BSA水溶液蛋白质含量时,酶解后的测定值较酶解前出现大幅下降。结论在测定多肽含量多的供试品中蛋白质含量时,改良Lowry法测定更为精确。蚯蚓提取物中存在大量的多肽成分,所以对其进行蛋白质含量测定时,改良Lowry法能够更加精确、真实地反映蚯蚓提取物的蛋白质含量。     

PGDH基因甲基化状态与散发性结直肠癌的相关性研究

[目的]探讨15-羟基前列腺素脱氢酶(15-hydroxyproglandin dehydrogenase,PGDH)基因甲基化状态与散发性结直肠癌发生发展的关系.[方法]利用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)检测散发性结直肠癌及相对应的癌旁组织中PGDH基因甲基化状态.[结果]PGDH基因在散发性结直肠癌中甲基化率为37.5%(10/32),有6例癌及癌旁组织都发生了甲基化;伴有淋巴结及远处转移的甲基化率为50%(7/14),高于无转移的甲基化率16.7%(3/18)(P<0.05).[结论]PGDH基因高甲基化是散发性结直肠癌中常见的分子改变之一,结直肠癌中PGDH基因高甲基化可能发生在癌变早期并与结直肠癌的恶性进展具有相关性.