Clusterin对膀胱癌细胞增殖能力机制的研究

摘 要：目的：Cluterin（CLU）又称载脂蛋白J,在生物体中有两种存在的形式：分泌型（sCLU）和核型（nCLU）。sCLU常常与肿瘤的发生发展有密切的关系。越来越多的研究表明,sCLU与膀胱癌耐药有关,高表达常提示预后不良。然而,鲜有针对sCLU调控膀胱癌参与肿瘤发生发展机制的研究。本次实验探讨sCLU调控膀胱癌发生发展的分子机制。方法：我们收集了16对膀胱癌组织样本,通过实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测sCLU的表达。利用Si-RNA抑制膀胱癌细胞clusterin基因的表达,利用CCK-8增殖实验,平板克隆实验研究sCLU对膀胱癌细胞增殖的影响。同时,我们利用蛋白印迹分析（Western Blot）检测MAPK通路蛋白研究sCLU对膀胱癌细胞的调控机制。结果：16对膀胱癌组织验证表明sCLU在膀胱癌组织中高表达。敲低膀胱癌细胞中sCLU的表达,细胞增殖能力明显受到抑制（P<0.05）,P38/MAPK信号通路相关蛋白表达降低。结论： sCLU可能通过P38/MAPK通路调控膀胱癌细胞的增殖能力。     

腹部手术后急性非结石性胆囊炎诊治策略

目的对腹部手术之后急性非结石性胆囊炎的诱因、临床症状和相关治疗措施进行研究。 方法回顾性分析2012年1月至2017年1月20例腹部手术后急性非结石性胆囊炎的病历资料。 结果只有2例表现出上腹轻压痛,还没有出现腹膜炎的相关体征,超声提示胆囊壁水肿状况一般,胆囊附近没有积液,行抗炎、纠正微循环保守治疗后好转。7例患者因年龄较大、病情危重,暂行经皮经肝胆囊穿刺置管引流术(PTGD),其中1例因引流效果不佳,开腹行胆囊切除;1例因并发感染性休克、呼吸衰竭死亡;其余5例病情稳定后3月均行腹腔镜胆囊切除术。11例患者均直接行胆囊切除术,其中行开腹手术3例,腹腔镜手术8例,因腹腔粘连严重中转开腹3例。2例患者因怀疑有胆总管穿孔可能,加胆总管探查T管引流术。 结论腹部手术之后出现急性非结石性胆囊炎是由多种诱因共同作用的结果,易于与原发疾病的并发症相混淆,出现误诊或者漏诊,且急性非结石性胆囊炎可诱发多器官功能衰竭,故及早发现、及早诊断并根据患者的耐受情况选择合理的手术切除是最佳治疗手段。     

聚合酶链反应检测嗜肺军团菌的实验研究

 目的探讨并建立聚合酶链反应(PCR)用于检测嗜肺军团菌的方法.方法用PCR方法扩增嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强子基因(mip)片段,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物;分析其特异性和敏感性.结果在嗜肺军团菌14个血清型参考株均扩增出特异的340bp片段,而三株非嗜肺军团菌及其他需鉴别诊断的常见病原菌均未扩增出此特异条带.检测灵敏度为2.6 pg/ul基因组DNA.结论依据mip基因建立的嗜肺军团菌PCR检测方法具有高度的敏感性和特异性,是诊断与鉴别诊断嗜肺军团菌感染的一种有效手段.     

结合冰冻病理特点探讨乳头状甲状腺微小癌的合理术式

目的 为避免二次手术,结合冰冻病理特点探讨乳头状甲状腺微小癌首次手术的合理术式.方法 随访近5年在首都医科大学附属北京天坛医院门诊复诊的乳头状甲状腺微小癌患者96例.比较患侧腺叶加峡部切除(单侧组)与患侧腺叶加峡部切除加对侧腺叶次全切除(双侧组)两种术式的转移复发率.比较中央区淋巴结清扫组(清扫组)与非清扫组(非清扫组)的转移复发率和喉返神经损伤率.结果 术中冰冻病理能够确诊为癌53例(55％).无论高低危人群,单侧组与双侧组转移复发率差异无统计学意义(P＞0.05).清扫组与非清扫组转移复发率在高低危人群差异均无统计学意义(P＞0.05).清扫组的喉返神经暂时性损伤率在高危人群(P =0.040,P＜0.05)和低危人群(P =0.037,P＜0.05)均较非清扫组高.结论 乳头状甲状腺微小癌术中冰冻病理确诊难度高,首次术式合理为患侧腺叶加峡部切除.术中探查无明确淋巴转移者不作预防清扫.     

幽门螺杆菌免疫兔血清抗体特异性分析

对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)抗原、抗体的研究是Hp分型、检测及疫苗开发的基础.Hp免疫血清的制备已成为常规技术,但血清制备过程中的各种因素均可能影响免疫血清的抗体谱,从而引起同类研究间因所用Hp抗体不同导致的结果的差异.本研究对Hp全菌免疫的兔血清抗体谱加以分析,讨论坳免疫血清制备中存在的一些问题和应对方法.     

辛伐他汀在模拟微重力环境对成骨细胞增殖和凋亡的影响

目的观察辛伐他汀在模拟微重力环境下对成骨细胞增殖和凋亡的影响。方法利用沿水平轴连续回转(30 r/min)细胞培养系统模拟微重力环境,使用MTT比色法观察小鼠成骨样细胞MC3T3-E1的增殖情况;细胞凋亡是根据4,6-二氨基-2-苯基吲哚所染细胞核形态的改变来辨认。结果模拟微重力环境可以降低MC3T3-E1增殖功能,辛伐他汀在模拟微重力环境可以增强MC3T3-E1增殖功能,但对细胞的凋亡并无显著影响。结论在模拟微重力环境下辛伐他汀对成骨细胞增殖功能具有保护作用,为辛伐他汀治疗微重力环境骨丢失提供了理论和实验证据。     

不同剂量锌摄入对SD大鼠主要脏器的影响

目的探讨不同剂量锌摄入对临床亚健康干预的合理剂量以及高锌对SD大鼠各主要脏器的病理形态学的影响。方法64只初断乳SD大鼠,分性别随机分为4组,即正常对照组、30μg／g组、150μg／g组、750μg／g组。运用HE、TUNEL染色等方法,观察不同剂量锌摄人对肝、肾、心、脑、睾丸等组织的损伤情况。结果①心、肾组织细胞凋亡结果各组比较（P〉0．05）,无统计学意义;②过度补锌可引起肝细胞捅亡数明显增加,且随锌摄入量的增加呈逐渐增加的趋势,与正常对照组比较P〈0．01;③过量补锌可引起SD大鼠海马各区神经元凋亡,且随锌摄入量的增加呈逐渐增加的趋势,与正常对照组比较P〈0．05;④与正常对照组比较,过量补锌可引起SD大鼠睾丸生精细胞的凋亡（P〈0．01）。结论过度补锌对机体是有害的,应在医生的指导下适量补锌。     

体外循环下P-选择素与D-二聚体变化的临床研究

目的探讨体外循环对血小板活化及血管内皮细胞损伤的影响及其相互之间的关系。方法对21例风湿性心脏病患者在体外循环前、中、后等5个时点采血,用流式细胞仪检测血小板膜P选择素的表达率及荧光强度,同时用ELISA检测血浆中P选择素及D-二聚体的含量。结果血小板膜P选择素的表达率从体外循环中15min开始上升,60min时达高峰,之后逐渐下降,术后24h仍高于术前水平,各时点之间的差异具统计学意义（P〈0．01）。血浆P选择素和D-二聚体浓度的变化规律与血小板膜P选择素阳性率基本类似,三者之间Pearson相关系数均〉0．85（P〈0．01）,呈明显的正相关。P选择素的荧光强度变化不明显（P〉0．05）。结论随着体外循环时间的延长,血小板活化增加,血管内皮细胞损伤加重,且两者之间互为因果。