不同地区幽门螺杆菌cagA基因羧基端可变区及其蛋白序列差异分析

目的:比较不同地区H pylori cagA 3'端可变区序列差异及序列的地域特征,分析差异与疾病的相关性.方法:选择本实验室所收集的20例CagA 的PCR产物进行测序,并通过ExPASy-Translation软件推测其氨基酸序列,搜索并收集GenBank中已公布的不同地区3-6个H pyloricagA 3'端可变区序列及其氨基酸序列进行比较分析.结果:cagA蛋白的氨基酸序列可分为具有明显地域特征的东亚型和西方型两类;部分东亚型菌株表现出西方型变异.87.4%的菌株具有3个串联排列的EPIYA基序,8.2%的菌株具有4个或以LEPIYA基序.新发现1条具有区域特征的含有3个氨基酸的序列.cagA蛋白氨基酸序列中的EPIYA数目与临床结果没有相关性.结论:Hpylori cagA基因及其cagA蛋白序列具有明显多态性,可以根据Hpylori cagA 3'端可变区的主要序列差异进行地域分型,cagA 3'端可变区的EPIYA基序的数目与临床结果没有相关性.     

DNA甲基化与胰腺癌的研究进展

表观遗传学调控机制在肿瘤发生、发展过程中起着重要的作用.DNA甲基化是重要的基因表观修饰方式之一.目前关于胰腺癌发病的分子机制尚未完全阐明,这大大限制了胰腺癌治疗领域的发展.DNA甲基化的研究对明确胰腺癌的发病机制及其早期诊断、靶向治疗等方面具有十分重要的意义.此文就DNA甲基化与胰腺癌关系的研究进展作一综述.     

镇江地区幽门螺杆菌cagA、vacA基因及亚型与胃肠病患者的相关性

我们利用分子生物学技术，研究镇江胃肠疾病患者感染幽门螺杆菌（Hp）菌株的cagA基因型、vacA基因型，探讨基因型与胃肠疾病的关系。     

幽门螺杆菌vacA基因型和cagA基因及其表达产物

幽门螺杆菌（Ｈｐ）的ｖａｃＡ基因和ｃａｇＡ基因分别表达ＶａｃＡ和ＣａｇＡ蛋白两种毒力因子。两种毒力因子之间有着相互的关联，在Ｈｐ引起的胃肠疾病中具有重要作用，Ｈｐ感染的临床发病与Ｈｐ的ｖａｃＡ基因型，具有ｃａｇＡ基因Ｈｐ以及ＶａｃＡ和ＣａｇＡ蛋白的表达有着密切的关系。     

幽门螺杆菌对原癌基因c-Fos和c-Jun表达的影响

目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)刺激胃癌细胞AGS后,对细胞内原癌基因c-Fos和c-Jun表达的影响.方法:分别将从不同种类(胃炎,溃疡及胃癌)患者分离到的H.pylori与AGS细胞共同培养1 h,用Western blot方法检测细胞内c-Fos和c-Jun基因表达的变化.结果:不同类型的菌株刺激细胞后,c-Fos和c-Jun蛋白的表达变化存在明显差异.溃疡类菌株只促进c-Fos表达的升高,胃炎类菌株只促进c-Jun表达的升高,而胃癌菌株刺激的细胞c-Fos和c-Jun表达均无明显升高.在不同类型菌株混合刺激下,即胃炎和溃疡菌株,及胃炎、溃疡和胃癌菌株3重混合,刺激后的细胞中c-Fos和e-Jun的表达量均升高.结论:不同H.pylori刺激AGS细胞后原癌基因c-Fos和c-Jun的表达变化有差异,多类型菌株的混合刺激下c-Fos和c-Jun的表达量同时升高.提示多种类型菌株的复合刺激可能更易促进癌变的发生.     

彩色多普勒超声预测食管静脉曲张破裂出血和Child—pugh分级价值评估

目的探讨肝硬化门脉高压患者门脉系统血流动力学改变与食管静脉曲张破裂出血的关系，研究其与肝功能Child-pugh分级的相关性。方法通过对121例肝硬化患者其中74例出血患者和47例非出血患者进行彩色多普勒超声检查，测定其门脉内径、平均血流速和血流量，比较各组问差异有无统计学意义。结果随肝硬化损害程度加重，门静脉宽度逐渐增加，而平均流速下降，且各组有显著性差异（P〈0．05）。门脉血流量在各组无显著性差异（P〉0．05）。门静脉内径在出血组和非出血组之间有显著性差异（P〈0．05）。结论彩色多普勒超声测定门静脉宽度和平均血流速对肝功能Child-pugh分级有价值。门静脉宽度测定对判断肝硬化出血有一定意义。     

RNA干扰沉默中期因子基因表达诱导肝癌细胞凋亡

目的:探讨RNA干扰(RNA interference)沉默中期因子(midkine,MK)基因表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法:根据中期因子基因mRNA序列特点,设计合成中期因子基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染肝癌SMMC 7721细胞后,分别以实时定量PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞中期因子表达情况,分别通过检测caspase-3活性和琼脂糖凝胶电泳方法了解肝癌细胞凋亡,以软琼脂集落培养试验检测对各组细胞增殖的影响.结果:中期因子siRNA可有效抑制肝癌细胞中期因子 mRNA和蛋白水平.转染组肝癌细胞caspase-3活性增高,呈浓度和时间依赖性;转染组出现明显的DNA条带.中期因子转染组细胞增殖受到明显抑制,且呈浓度依赖性.结论:采用RNA干扰沉默肝癌细胞中期因子基因表达,可抑制癌细胞增殖和诱导凋亡.     

幽门螺杆菌vacA基因型及其表达产物与胃十二指肠疾病关系的研究

目的 探讨幽门螺杆菌ｖａｃＡ基因型及其表达产物－ＶａｃＡ与胃十二指肠疾病之间的关系。方法 用聚合酶链反应技术测定６２株从慢性胃炎,消化性溃疡和胃癌患者中分离获得的幽门螺杆菌（Ｈｐ）菌株的ｖａｃＡ基因型,用Ｈｅｌａ细胞测定Ｈｐ菌株体外ＶａｃＡ活性。     

幽门螺杆菌提取物体外对人胃癌细胞SGC-7901形态的影响

目的:探讨幽门螺杆(H pylori)刺激人胃癌细胞SGC-7901后,对细胞形态,迁移以及细胞骨架的影响.方法:从人胃黏膜组织中分离培养H pylori,将得到的H pylori菌体超声裂解,用超声提取物刺激SGC-7901细胞,直接观察SGC-7901细胞形态的变化:细胞迁移活动用Boyden迁移槽和划线法分析;用phalloidin对细胞内F-actin进行荧光染色,研究其对细胞骨架的作用.各组间细胞迁移数量比较用单因素方差分析,组间两两比较用SNK检验:对照组和刺激组细胞发生蜂鸟表型的百分率进行t检验.结果:H pylori菌体超声提取物刺激人胃癌细胞SGC-7901后,细胞的活动性增强,高浓度和低浓度刺激组与对照组相比细胞迁移数明显提高(F=12697.314,P＜0.01),两两之间相比也具有统计学意义(P＜0.01).受刺激后蜂鸟表型细胞数较对照组大大提高(t=29.626,P＜0.01).对照组细胞仅有少量应激纤维形成,H pylori刺激10 min后,应激纤维增加.结论:H pylori可诱导胃癌细胞SGC-7901发生形态改变,促进其迁移,并且增加细胞内细胞骨架的形成.     

槲皮素对结肠癌细胞侵袭和畸胎瘤衍生生长因子-1表达的影响

槲皮素(quercetin)是一种天然的黄酮类化合物,广泛分布于蔬菜、水果及常见中草药中.已有研究发现,槲皮素可抑制多种肿瘤细胞的增殖[1,2],是颇具应用前景的抗癌药物之一,但机制尚不清楚.