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狂犬病毒核蛋白单抗和荧光抗体中和试验的建立与应用 总被引:6,自引:0,他引:6
目的建立狂犬病毒血清中和抗体效价的快速检测方法,以实现狂犬疫苗免疫效果的定量评价,指导高危人群及动物种群的免疫预防。方法采用常规方法建立杂交瘤细胞株并制备抗狂犬病毒核蛋白单抗,以亲和层析法进行纯化,异硫氰酸荧光黄标记制备荧光抗体;以BHK-21细胞系培养狂犬病毒细胞适应株CVS-11,以染毒细胞测定荧光抗体的工作浓度后,通过荧光抗体染色法测定CVS-11细胞半数感染量(TCID50);利用狂犬病毒灭活疫苗免疫犬制备抗狂犬病毒血清,并以国际兽疫局标准品进行标定;参考世界卫生组织及国际兽疫局推荐方法,确定中和试验程序,对51份样品血清进行测定,并与国际狂犬病参考实验室的检测结果进行比较,评价其精确及可靠程度。以Kaber法公式和Microsoft Excel软件为基础,设计被测样品中和效价计算方法。结果制备的抗狂犬病毒核蛋白单抗的亚型为IgG2a;纯化、标记后的荧光抗体工作浓度为1:400;CVS-11株的使用量为每孔100 TCID50;本研究建立的检测程序对51份人及犬血清测得的中和效价结果与国际参考实验室的测定结果一致;自行设计的计算方法操作简便,计算快捷。结论成功建立了与国际标准相当的狂犬病毒中和抗体效价测定和计算方法。 相似文献
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检测人和动物体内狂犬病抗体的主要目的有三个方面,第一,对暴露前预防免疫的人或动物进行抗体监测,确定人的预防免疫效果和动物的免疫水平及免疫覆盖率;第二,对暴露后免疫治疗的人体内的中和抗体进行检测,以确定暴露后治疗效果;第三,对狂犬病疑似患者或患畜,通过测定患病早期和 相似文献
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目的比较荧光抗体病毒中和试验(FAVN)和快速荧光灶抑制试验(RFFIT)两项技术用于动物和人血清狂犬病中和抗体检测的差异。方法以FAVN和RFFIT两种方法分别对60份动物及人血清进行狂犬病中和抗体的平行定量检测,应用配对定量资料的t检验对所得数据进行统计学分析。结果以0.5IU/mL的国际推荐标准,对同一样品经FAVN和RFFIT两种方法测定的中和抗体效价进行定性判定,二者对全部60份样品的检测符合率为96.67%(58/60)。统计学分析显示,两种检测方法对总体样品及不同动物样品的定量检测结果差异均无统计学意义(P0.05)。结论 FAVN和RFFIT可通用于动物和人血清的狂犬病中和抗体检测。 相似文献
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狂犬病(rabies)是由狂犬病病毒(rabies virus)感染引起的一种人兽共患传染病,全世界每年报告的狂犬病死亡人数约有5.5万例,实际死亡人数应明显高于该统计数字。目前除日本、英国、夏威夷等国家和地区没有狂犬病发生以外,本病呈世界性分布流行。 相似文献
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目的研制一种能够定量检测狂犬病血清中和抗体的直接竞争ELISA试剂盒,以满足我国动物狂犬病免疫监测的需要。方法以表达狂犬病病毒糖蛋白的真核细胞培养物为包被抗原,捕获抗体为具有病毒中和活性的酶标单克隆抗体,标准血清为经荧光抗体病毒中和试验(FAVN)准确定量的犬血清。结果本试剂盒的最低检测限为0.25U/ml,线性检测范围为0.25~8U/ml,标准曲线的平均板内变异系数为2.8%,板间平均变异系数为4.9%,在4℃下至少可以存放6个月。结论本研究提供了一种操作安全、定量准确的动物狂犬病中和抗体检测试剂盒,具有良好的实际应用前景。 相似文献
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目的为表达狂犬病病毒糖蛋白的犬2型腺病毒(CAV-2)重组狂犬病口服疫苗的投放工作提供流行病学依据。方法通过病毒中和试验对随机采自河北省,北京市,吉林省等地的387份犬血清进行犬腺病毒中和抗体检测,以确定犬群腺病毒感染率。结果河北、吉林农村流浪犬或家养犬腺病毒中和抗体阳性率较低,阳性率为16%(30/192),而北京市犬腺病毒中和抗体阳性率高达69%(135/195),说明城乡犬只犬腺病毒中和抗体存在明显差异。结论农村流浪犬或家养犬腺病毒中和抗体阳性率较低,适用于CAV-2及其重组疫苗首次免疫、尤其是口服免疫。 相似文献
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患者,男,48岁。因鼻出血、鼻塞3月伴右面部肿胀1月于1998年10月22日收住我院。检查:T37℃,P88次/min,BP16/1kPa,自动体位,神志清,查体合作。右面部膨隆伴压痛,右鼻腔流出少许血性分泌物,右鼻腔内被新生物堵塞,口腔右上腭见3cm×4cm隆起伴粘膜溃烂,副鼻窦CT片示:右上颌骨占位伴骨质破坏。上颌窦新生物活检,病理报告为上颌窦内癌肉瘤复发,浸润生长,破坏骨质伴大量坏死。病理免疫组化染色结果示:肿瘤细胞的耐药基因(GSTPi)阳性率80%,显色()。入院后先行化疗,方案:(… 相似文献
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应用PCR法对大连地区性传播疾病门诊患者感染情况进行了研究。在201份性传播疾病标本中,总的沙眼衣原体感染率为26.9%。不同的性病NGU、淋病、尖锐湿疣的感染率分别是30.03%,27.3%,16.7%,三者之间无显著性差异(P>0.05)。性传播疾病门诊患者的感染率明显高于健康人(P<0.001)。结果提示我们,三种性病均可伴发沙眼衣原体感染,且感染机会相仿;性病患者是沙眼衣原体感染的危险因素之一。这一结果为性传播疾病的防治提供了参考依据 相似文献