脑淀粉样血管病引起的脑出血

脑淀粉样血管病(CAA)是一种淀粉样蛋白限局性沉积于脑血管的疾病。随着年龄的增长,在正常老年人脑也可出现 CAA,是 Alzheimer 病(AD)最常见的病理变化,并作为脑出血原因之一已引起人们的关注。下面介绍由 CAA 引起脑出血的表现及最近开发的诊断方法。CAA 除了在蛛网膜下腔和脑皮质浅层小血管壁有淀粉样沉积外,还可见节段性的血管坏死、粟粒动脉瘤、血管闭塞、纤维化、管壁的双重化等,如此血管将变得脆弱和易出血。CAA 好发部位是在脑膜、大脑皮质和小脑皮质等处血管,而很少发生在易发生血管坏死等高血压性小动脉病变的大脑基底核和脑干。CAA 引起的脑出血患者血压多正常,既往很少有高血压,而且出血为多发性脑叶型和复发型。在 CAA 的脑出血中双侧脑叶型脑出血占20.5%,好发部位以额叶最多,基底核极少见。用上述病理学变化可解释这些特征。     

创建酿酒酵母细胞工厂发酵生产芳香精油瓦伦烯

瓦伦烯是一种具有柑橘气味的倍半萜类化合物,常被用于化妆品和食品添加剂,以及工业合成诺卡酮。本研究拟用合成生物学技术创建酿酒酵母细胞工厂发酵生产瓦伦烯。首先,在底盘细胞YTT-T5中引入北美金柏来源的瓦伦烯合酶(Cn VS),成功获得可生产1.1 mg·L^-1瓦伦烯的工程菌VAL-01;采用蛋白质融合技术,不同植物来源的瓦伦烯合酶筛选,并调整了关键基因拷贝数后,瓦伦烯产量提升至436.4 mg·L^-1。进一步工作中,删除转录因子ROX1,瓦伦烯的产量提高了17.4%。最后,对半乳糖诱导系统进行调控,并过表达多药耐药性调控因子PDR3和调控内质网大小转录因子INO2,所得工程菌株VAL-10经高密度发酵能生产2 798.6 mg·L^-1瓦伦烯(产量是初始菌株的2 500倍),为瓦伦烯绿色生产提供了基础。     

高等中医药院校本科生物化学课程建设与实践

基于创新型中医药人才培养目标的需要,从教材建设、教学方法、教学实验和成绩考评4个方面探讨生物化学教学改革思路与实践。通过对编写与中医药院校教学相适应的生物化学教材;推行＂以问题为导向＂、自主学习为主的PBL教学模式,以改变传统的教学方法;增补综合性实验,以训练学生的动手能力和创新能力;多因素、多环节、综合评价学生成绩等环节的教学改革工作,获得了明显的成效,促进了创新型中医药人才的培养。     

常春藤皂苷元生物合成解析及酵母细胞工厂的构建

常春藤皂苷元为威灵仙等药用植物的有效成分,在抗肿瘤、抗炎、抗抑郁、保肝、抑菌等方面有较好的药理活性。为获得高效生产常春藤皂苷元的酿酒酵母细胞工厂,该研究首先利用即插即用生物合成途径解析平台,在蔷薇科植物苹果Malus×domestica中成功筛选获得能催化齐墩果酸C-23位氧化的P450氧化酶基因Md MA02,其氨基酸同源性仅为已知活性的CYP72A68v2基因的32%。工程菌BY-OA-Md MA02经高密度发酵优化,其生产常春藤皂苷元产量能达到101 mg·L~(-1),是摇瓶发酵的337倍。该研究为推动齐墩果烷型五环三萜生物合成途径解析及常春藤皂苷元高效细胞工厂的创建提供了基础。     

右归丸对衰老大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴功能变化的影响

目的:观察自然衰老大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能变化,并通过右归丸干预,探索补肾方延缓衰老的机理。方法:以自然衰老SD雄性大鼠(24月龄)为肾虚衰老模型,大鼠随机分为老年对照组和右归丸组,每组35只,另设青年对照组(5月龄)35只,共3组。老年对照组大鼠常规喂养至24月龄。右归丸组大鼠自20月龄始,按相当于右归丸生药量7.5g/kg自由饮用稀释药液,每周停药2天,连续4个月;采用放射性配体结合分析法观察大鼠血中促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(CORT)含量;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western Blot)技术观察大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA及其多肽表达。结果:与青年组比较,老年组大鼠下丘脑CRHmRNA和CRH表达、血浆ACTH及血清CORT含量升高;与老年组比较,右归丸组大鼠下丘脑CRHmRNA和CRH表达、血浆ACTH及血清CORT含量显著下降(P0.05)。结论:自然衰老大鼠神经内分泌调控紊乱,HPA轴功能亢进;右归丸可调节HPA轴,使亢进的HPA轴功能得以改善,减轻对机体的危害而延缓衰老。     

补肾方药延缓老年大鼠学习记忆减退的分子机制

目的:观察补肾方药左归丸、右归丸对老年大鼠空间学习记忆能力,氨基酸神经递质以及NMDA受体、Ca2+/CaMKⅣ信号通路相关分子的mRNA表达变化的影响,以探讨老年大鼠学习记忆减退的分子机制以及补肾方药的药理作用。方法:以青年大鼠(5月龄)为对照,以自然衰老大鼠(23月龄)为模型;Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力;HPLC-荧光法检测大鼠杏仁核、海马氨基酸类神经递质含量;RT-PCR法检测大鼠海马NR1、CaMKⅣ、CREB、c-fos mRNA的表达变化;观察补肾方药左归丸、右归丸对老年大鼠上述各项指标的影响。结果:与青年对照组比较,老年大鼠上述指标都有不同程度的异常变化,而左归丸、右归丸可改善老年大鼠退化的空间学习记忆能力;降低老年大鼠杏仁核、海马Glu的含量;显著上调老年大鼠NR1、CaMKⅣmRNA的表达,对CREB及c-fos mRNA的表达也有升高。结论:左归丸、右归丸可以通过降低老年大鼠杏仁核、海马Glu含量,纠正NMDA受体介导的CaMKⅣ信号通路的异常变化,改善老年大鼠空间学习记忆能力,延缓衰老。     

基于“应用型”培养目标的中医院校《医用化学与生物化学》教材建设及教学建议

从中医药院校培养“应用型”人才目标出发,介绍4年制本科护理等非医学专业《医用化学与生物化学》课程的建设体会,并结合中医药院校生源情况和课程设置的特殊性提出课程教学的设想与建议。     

左归丸和右归丸对老年大鼠海马GRmRNA表达与HPA轴活性的影响

目的:观察左归丸和右归丸对老年大鼠海马糖皮质激素受体(GR)mRNA表达和下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴活性的影响,探索GRmRNA表达和HPA轴活性的关系。方法:以自然衰老SD雄性大鼠(24月龄)为肾虚衰老模型,大鼠随机分为老年对照组、左归丸组和右归丸组,每组35只,另设青年对照组(5月龄)35只,共4组。老年对照组大鼠常规喂养至24月龄。左、右归丸组大鼠自20月龄始,均按相当于左、右归丸生药7.5g·kg^-1(成人临床用量的15倍)自由饮用稀释药液,每周停药2天,连续4个月;采用原位杂交法检测大鼠海马组织GRmRNA表达,放免法检测大鼠血浆皮质酮(CORT)含量。结果:与青年对照组相比,老年对照组大鼠海马CA1区GRmRNA表达水平均显著下降(P<0.05),血浆CORT含量显著增高(P<0.05);与老年对照组比较,左归丸组和右归丸组大鼠海马CA1区GRmRNA表达水平显著升高(P<0.05),血浆CORT含量显著降低(P<0.05)。结论:左归丸和右归丸可能通过上调自然衰老SD雄性大鼠海马GRmRNA表达,加强对HPA轴的抑制作用,进而降低血浆CORT含量。     

调心方对氧化损伤型类AD大鼠脑组织淀粉样蛋白(APP) mRNA表达的影响

目的：观察调心方对活性氧所致的氧化损伤型类AD大鼠脑组织NF-κB转录因子和APPmRNA水平的影响．方法：用二羟延胡索酸(DHF)加FeCl3-ADP左侧脑室注射法复制氧化损伤型类AD大鼠模型；Morris水迷宫法检测An大鼠空间记忆能力；RT-PCR法检测鼠脑皮层和海马APPmRNA水平；免疫组化法检测鼠脑皮层和海马NF-κB转录因子表达，以及调心方对上述各项指标变化的影响。结果：与正常对照组比较，AD模型鼠空间记忆能力显下降，脑组织NF-κB转录因子和APP mRNA水平明显增高；调心方对上述指标有明显的改善作用。结论：调心方能够通过下调An大鼠脑组织NF-κB转录因子和APP mRNA表达水平，减少Aβ产生，改善AD大鼠的空间记忆能力。     

调心方对氧化损伤型类AD大鼠空间记忆能力和脑线粒体呼吸功能的影响

目的：探讨调心方对氧化损伤型类AD大鼠空间学习记忆能力，脑线粒体呼吸功能及其酶活性的影响。方法：采用二羟延胡索酸（DHF）加FeCl3-ADP左侧脑室注射，造成大鼠氧化损伤型类AD大鼠模型；Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力；Clark氧电极法测定脑线粒体呼吸功能各项指标，包括R3、R4、RCR、P／O、OPR及琥珀酸脱氢酶、NADH脱氢酶，CytC氧化酶活性变化及调心方的作用。结果：与对照组比较，模型鼠空间学习记忆能力，脑线粒体呼吸功能和CytC氧化酶活性显著下降，调心方对模型鼠上述指标有明显改善作用。结论：调心方具有改善氧化损伤型类AD大鼠空间学习记忆障碍提高脑线粒体呼吸功能和呼吸链复合酶活性作用。可能与其对抗自由基氧化损伤作用有关。