一种新的蝮蛇蛇毒磷脂酶A2同源物的分离纯化及其对Hep3B细胞基因谱的影响

目的从中国蝮蛇蛇毒中分离纯化出一种新的磷脂酶A2（PLA2）同源物,并研究其对Hep3B细胞基因谱的影响。方法用C18反相高效液相层析从蛇毒粗毒中分离纯化出PLA2同源物,并检测其纯度。用电喷雾质谱仪测定PLA2同源物分子量。体外培养Hep3B细胞,以139μg／mlPLA2同源物处理12h,应用基因芯片检测基因表达的改变。结果从蛇毒粗毒中分离纯化出一种新的PLA2同源物,纯度为97．2％,相对分子质量为13900。139μg／mlP乙嘘同源物处理Hep3B细胞12h后．19个基因表达下调,20个基因表达上调。表达改变的基因按功能分主要为以下6类：细胞周期控制和DAN损伤修复类、细胞调亡和衰老类信号转导分子和转录因子、细胞黏附类、血管生成类以及肿瘤细胞入侵和转移类。结论PLA2同源物作用于Hep3B细胞后,可影响细胞多种基因的表达,表达改变的基因主要参与肿瘤细胞的生长和转移。本研究为进一步深入研究PLA2对肿瘤细胞的作用机制提供线索和依据。     

复方骨肽注射液对髁突骨折后大鼠颌骨发育的影响

目的观察复方骨肽注射液对单侧髁突颈部骨折大鼠的颌骨发育及其血清类胰岛素一号生长因子(IGF-1)及血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)表达的影响。方法实验于2019年10月25号开始。通过手术建立大鼠单侧髁突颈部骨折的动物模型, 分别设立手术组、手术给药组(骨肽)和空白对照组, 每组24只。术后手术给药组每天按0.9 mg/kg剂量注射复方骨肽注射液。然后分别于1、3、5、9周处死实验动物, 每次每组处死6只。期间观察大鼠咬合对称性、下颌骨长度、下颌升支高度与血清中IGF-1、PDGF-BB含量的变化。采用方差分析、LSD检验。结果单侧髁突骨折后, 手术组正常侧下颌骨发育超过患侧下颌骨, 下颌骨出现偏斜现象;手术给药组的下颌骨出现偏斜的程度较手术组轻, 且X片上骨折的愈合加快。血清学结果显示, 术后1周时手术组、手术给药组和空白对照组PDGF-BB分别为(104.21±15.01)ng/L、(241.69±22.49)ng/L、(406.47±26.88)ng/L, 两两比较差异均有统计学意义(均P<0.001);术后5周时手术组、手术给药组和空白对照组IGF-1分别为(2...     

SARS冠状病毒S蛋白S1区多肽与SARS病人血清的免疫反应

目的 测定根据计算机预测的SARS冠状病毒S蛋白S1区的抗原表位多肽与SARS病人血清的免疫反应,以寻找和确定SARS相关冠状病毒的中和抗原表位。方法 采用多肽合成仪合成SARS冠状病毒S蛋白S1区的多肽,并用ELISA方法检测合成的多肽与SARS病人血清的免疫反应。结果 合成的8个多肽与SARS病人血清免疫反应的光密度值是其与正常人血清免疫反应的光密度值的1.5～2.6倍。结论 合成的多肽与SARS病人血清的免疫反应较低,提示这些多肽是否为SARS冠状病毒的抗原表位还要进一步研究。     

环孢霉素A对NIT-1胰岛β细胞基因表达谱的影响

目的采用基因芯片技术,观察免疫抑制剂环孢霉素A(CsA)对NIT-1胰岛β细胞基因表达谱的影响。方法体外培养NIT-1胰岛β细胞,以10μmol/LCsA处理24h。应用基因芯片分别检测CsA处理24h及空白对照组NIT-1胰岛β细胞的基因表达谱。结果CsA作用于NIT-1胰岛β细胞24h后,在4096条基因中,有38条基因表达上调,其中已知功能基因13条,主要是与应激反应、蛋白质合成及细胞生长相关的基因。有46条基因表达下调,其中已知功能基因25条,主要是与细胞生长发育、氧化磷酸化过程及蛋白合成有关的基因。RT-PCR技术验证了Zfr、Tpi和Pax63个基因表达的变化。结论CsA作用于NIT-1胰岛β细胞24h后,可影响NIT-1细胞中多种基因的表达,其中对细胞生长发育、氧化磷酸化等有关基因表达的抑制作用,可能与CsA抑制NIT-1细胞胰岛素释放的作用机制相关。本研究为进一步深入研究CsA对胰岛β细胞的作用机制提供了线索和依据。     

现代药学实验室建设与改革

从药学实验室仪器的购置、实验教师队伍的建设、管理水平的提高三个方面探讨如何建设适应现代药学发展的实验室、培养符合现代药学发展需要的药学人才。     

盐酸洛拉曲克在小鼠体内的血药浓度和生物利用度测定

目的 建立测定盐酸洛拉曲克血浆药物浓度的高效液相色谱-质谱联用分析方法,研究盐酸洛拉曲克在小鼠体内的药代动力学和绝对生物利用度。 方法 C57小鼠静脉（50 mg/kg）或口服（200 mg/kg）给予盐酸洛拉曲克,在给药后不同时间取血,分离血浆,用高效液相色谱-质谱联用法测定血浆中盐酸洛拉曲克浓度。用DAS软件计算盐酸洛拉曲克的药代动力学参数,根据口服和静注的药时曲线下面积之比来计算绝对生物利用度。 结果 盐酸洛拉曲克在0.01～40 mg/L浓度范围内线性关系良好(r=0.9995,P<0.001),样品在血浆中的回收率大于85％,日内和日间RSD小于15％。小鼠静注50 mg/kg盐酸洛拉曲克后药代动力学参数半衰期、药－时曲线下面积、分布系数、清除率分别为（3.02±0.017）h、（89.972±0.425）mg·L-1·h-1、（0.831±0.106）L/kg、（0.556±0.093）L·h-1·kg-1;小鼠口服200 mg/kg盐酸洛拉曲克后药代动力学参数半衰期、药－时曲线下面积、达峰时间、峰浓度分别为（5.046±0.191） h、（84.893±9.923） mg·L-1·h-1、（1.000±0.012） h、（18.000±0.014） mg/L。经计算盐酸洛拉曲克在小鼠体内的绝对生物利用度为23.58％。 结论 用高效液相色谱-质谱联用方法测定的盐酸洛拉曲克在小鼠体内的绝对生物利用度为该药的口服制剂的研发提供了实验依据。     

Amberlite XAD-1600吸附树脂精制白芍活性成分的实验研究

目的:探讨白芍乙醇提取物中主要活性成分的提取、分离与精制的方法.方法:采用多聚体吸附树脂Amberlite XAD-1600,分离精制75%乙醇提取物.以芍药苷的含量和抗炎作用为评价指标,比较评价乙醇提取物经XAD-1600处理前后的化学和生物等效性.结果:XAD-1600除去乙醇提取物中杂质的程度达62.75%,同时能有效保留芍药苷,其保留率为98.80%.结论:XAD-1600树脂可有效地分离与精制白芍活性成分.     

反相高效液相色谱法测定人血浆洛拉曲克浓度

目的建立测定人血浆洛拉曲克浓度的反相高效液相色谱法。方法以DiamonsilTM C18反相柱（150 mm×4.6 mm, 5 μm）为色谱柱,流动相为0.03 mol&#8226;L 1醋酸铵 甲醇（40：60）;流速：0.8 mL&#8226;min 1;柱温：40 ℃;检测波长： 233 nm。以乙酸乙酯与二氯甲烷（80：20）为提取剂。结果洛拉曲克的高、中、低（50.0, 10.0,1.0 μg&#8226;mL 1）3种浓度平均回收率分别为98.72%,97.86%,101.27%,日内、日间差RSD均＜7%（n＝5）;分析方法的检测限为1.0 μg&#8226;mL 1;线性范围为1.0～50.0 μg&#8226;mL 1。标准曲线方程： Y＝1.73X－5.29,r＝0.999 8（n＝8）。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。