核桃楸树皮乙醇提取物乙酸乙酯相的质谱分析

目的:为进一步开发和利用核桃楸树皮的药用成分提供参考。方法:从核桃楸树皮70%的乙醇回流提取物中,分别经溶剂分级萃取,取乙酸乙酯萃取相,经硅胶柱色谱分离,得到2个条带,收集后进行质谱分析。结果:供试品Ⅰ的2个主要成分的分子量在317和437左右,供试品Ⅱ的3主要成分分子量在303、437和453左右,其中质谱分子量303、317、437的组分在供试品Ⅰ和Ⅱ中均有出现。结论:初步判定两样品中可能含有槲皮素及杨梅苷,另外还可能含新的未知成分,需要做进一步的分离鉴定。     

复合中药多糖对人肝癌Bel-7402细胞株抗癌作用研究

目的：探讨复方中药多糖对人肝癌Bel-7402细胞株的影响。方法：采用T淋巴细胞转化试验观察复合多糖对人肝癌小鼠细胞,屯疫功能的影响;采用MTT法观察复合多糖对Bel-7402株的细胞增殖抑制;采用流式细胞仪观察复合多糖对Bel-7402株细胞凋亡的影响。结果：复合多糖为1．5、0．75、0．25g,kg剂量时可提高Bel-7402小鼠的淋巴细胞转化功能;复合多糖在40、20mg／L浓度时对Bel-7402细胞株增殖具有抑制作用;复合多糖浓度在40、200、10mg／L时作用24、48、72h使Bel-7402株细胞凋亡率增加。结论：复合多糖可提高Bel-7402小鼠的淋巴细胞转化功能;对Bel-7402细胞株增殖具有抑制作用;使Bel-7402株细胞凋亡率增加,并呈现时间、浓度依赖性。     

鼠伯氏疟原虫CSP基因真核表达载体的构建及在Hela细胞中的表达

目的分别构建携带绿色荧光蛋白报告基因的伯氏疟原虫(Plasmodiumberghei)环子孢子(CSP)全长基因和去除中央重复序列的CSP的融合蛋白真核表达质粒,并检测其在Hela细胞中的表达。方法采用PCR技术,从伯氏疟原虫基因组中扩增全长CSP基因,将其定向克隆入pEGFP-N1,构建pEGFP/PbCSP全长基因重组质粒,酶切、PCR及序列分析鉴定;同样,采用PCR技术扩增PbCSP的N端和C端两个片段,先将C端片段定向克隆入pEGFP-N1,构建pEGFP/PbCSP-C重组质粒,再将PbCSPN端片段定向克隆入pEGFP/PbCSP-C,构建pEGFP/PbCSP'重组质粒,酶切、PCR及序列分析鉴定。将pEGFP/PbCSP和pEGFP/PbCSP′分别用脂质体介导转染体外培养的Hela细胞,荧光显微镜及RT-PCR检测融合蛋白的表达。结果PCR、酶切及测序证实目的基因PbCSP全长和片段分别正确连接至pEGFP-N1的多克隆位点,两种重组质粒转染Hela后,荧光显微镜及RT-PCR均检测到目的蛋白在Hela中表达。结论成功构建了携带绿色荧光蛋白报告基因的伯氏疟原虫CSP全长基因和该基因片段的融合蛋白真核表达质粒,并在Hela细胞中获得表达。