火炭母总黄酮对D-氨基半乳糖诱导的肝损伤小鼠的保护作用及其机制

目的:研究火炭母总黄酮对D-氨基半乳糖(D-Gal N)建立的急性肝损伤小鼠的保护作用及机制。方法:将60只昆明种小鼠随机分为正常对照组,模型组,水飞蓟素组(200 mg/kg)及火炭母总黄酮剂量组(400 mg/kg、200 mg/kg、100 mg/kg),每组10只,适应性喂养一周后,各给药组小鼠每天灌胃给药1次,连续7天,正常对照组及模型组小鼠灌胃生理盐水,末次给药1 h后,除正常对照组,其余组均腹腔注射D-Gal N(500 mg/kg)建立小鼠急性肝损伤模型。模型建立16 h后,收集血清及肝组织,生化法检测小鼠血清中AST、ALT、TBIL、T-SOD、MDA和GSH-Px的活性或含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠肝组织中Th1型细胞因子TNF-α与IFN-γ以及Th2型细胞因子IL-10与白IL-4的表达水平;HE染色,显微镜下观察小鼠肝组织病理变化。结果:与正常对照组相比较,模型组小鼠血清中AST、ALT和TBIL水平显著升高,肝组织切片显示,模型组小鼠肝组织严重受损,肝细胞明显坏死,提示肝损伤模型建立成功。与模型组相比,火炭母总黄酮剂量组(400 mg/kg和200 mg/kg)小鼠血清或肝组织中AST、ALT、TBIL、MDA、TNF-α和IFN-γ水平不同程度显著下降,而T-SOD、GSH-Px、IL-10和IL-4水平显著升高;HE染色结果显示,火炭母总黄酮能够显著改善肝损伤病变程度。结论:火炭母总黄酮具有显著的护肝作用,其作用机制可能与抗氧化及调节肝组织Th1/Th2细胞平衡有关。     

狗肝菜多糖对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤的保护作用

目的 观察狗肝菜多糖对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤的影响.方法 建立D-半乳糖胺(D-GalN)诱发的大鼠急性肝损伤模型,不同浓度狗肝菜多糖干预后,测定动物血清ALT、AST.肝组织常规制片及HE染色观察组织病理学改变.结果 狗肝菜多糖能使肝损伤动物血清ALT、AST水平显著降低.组织病理学检测发现狗肝菜多糖处理后肝组织损害程度降低 .结论 狗肝菜多糖对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤具有保护作用.     

狗肝菜生药学研究

目的:为制定狗肝菜质量标准提供参考依据。方法:采用性状、显微和理化鉴别方法。结果:发现狗肝菜根横切面木栓层、皮层散有分泌腔。茎横切面表皮可见非腺毛与腺鳞;内皮层凯氏点明显;髓部细胞壁稍厚,无间隙,散有少量针晶。叶横切面表皮可见腺鳞;栅栏组织通过主脉;主脉维管束外韧性。叶表面及粉末:钟乳体上表皮较下表皮多,多呈长圆形,棒槌状;腺鳞下表皮较上表皮多,腺头以8个细胞为多,扁球形;非腺毛基部膨大、角质纹理明显;气孔多不定式,少直轴式。结论:以上特征可作为鉴别狗肝菜的参考依据。     

不同产地火炭母中槲皮素的含量测定方法研究

目的 建立火炭母药材中槲皮素的的含量测定方法,测定10个产地火炭母中槲皮素的含量.方法 采用RP-HPLC测定药材中槲皮素含量,色谱柱:Agilent TC-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.6%磷酸(52:48)等度洗脱;流速:1 mL·min~(-1);柱温:(25±1)℃;检测波长:365 nm;洗脱时间:20 min;进样量:20 μL.结果 槲皮素标准曲线回归方程为:Y=85 355X -48.16(r=0.999 3),在0.004～0.012 mg·mL~(-1)浓度范围内线性关系良好,平均回收率为100.3%,RSD:1.44%,不同产地火炭母中槲皮素的含量范围为183.0～848.1μg·g~(-1).结论 所用方法简便、准确,可用于火炭母药材的质量控制;相同季节、不同产地火炭母中槲皮素的含量差异较大.     

基于HPLC指纹特征关联 O2PLS-DA模型分析低温干燥当归药材、饮片、标准汤剂物质基础差异

目的 基于HPLC指纹特征整合O2PLS-DA模型,阐明低温(阴干、30→60℃)干燥、加工(切片)和煎煮对当归临床药用药物质基础影响的关系。方法 采用HPLC指纹特征整合O2PLS-DA模型、SPSS统计等方法,分析低温干燥(阴干、30→60℃)、切片、煎煮对当归药材及其制备的饮片、标准汤剂HPLC指纹特征差异的影响和主要差异成分的相关性。结果 当归低温(阴干、30→60℃)药材、饮片、标准汤剂HPLC指纹特征相似度高,分别在0.979～0.998、0.890～1、0.864～0.994。鲜切当归及其制备标准汤剂与低温干燥组相似度低,分别在0.890～0.910与0.530～0.792。当归饮片及标准汤剂HPLC指纹特征O2PLS-DA模型聚类为3组：阴干和30～50℃组、60℃组、鲜切组。当归药材、饮片、标准汤剂HPLC指纹特征O2PLS-DA模型VIP值：8号峰>3号峰>4号峰>6号峰>7号峰>5号峰>1号峰>2号峰,指认出藁本内酯(8号峰)、绿原酸(3号峰)、阿魏酸(4号峰)(VIP>0.88)为关键差异成分。Pearson分析显...     

白粉藤的显微鉴别研究

目的：研究白粉藤的植物形态和显微结构特征,为鉴定、开发利用和制定其质量标准提供参考依据。方法：采用植物形态和显微鉴别方法。结果：根具初生射线;茎皮层簇晶断续排列成环,厚角组织将皮层分隔成两部分,木质部导管多单个纵向排列;叶主脉维管束数个排列成环;粉末中可见大量黏液细胞,草酸钙晶体。结论：以上特征具有鉴别意义,可做为鉴别白粉藤的参考依据。     

杠板归抗二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化的作用及其机制研究

目的:研究杠板归对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化的作用及其机制.方法:80只SD大鼠随机分为正常组、模型组、杠板归高、中、低剂量组和秋水仙碱组共6组.除正常对照组以外,其余各组大鼠均以0.5％ DMN溶液(1.6mL·kg-1)腹腔注射,每周连续3天,每天1次,第1周用2/3剂量,以后用全量.秋水仙碱组剂量为0.1 mg·kg-1,杠板归高、中、低剂量组分别为7.5,5.0,2.5 g·kg-1,各组给药1次/d,连续4周.4周末摘大鼠眼球取血,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C);苏木精-伊红染色(HE染色)观察肝纤维化(HF)的形成;免疫组化检测转化生长因子β1(TGF-β1).结果:与模型组比较,杠板归高、中剂量组大鼠血清HA,LN,PCⅢ,Ⅳ-C水平均显著低于模型组(P ＜0.05或P＜0.01),免疫组织化学显示杠板归高、中剂量组中大鼠肝脏TGF-β1表达明显降低(P ＜0.05或P＜0.01),低剂量无统计学意义(P＞0.05).结论:杠板归对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化具有较好的作用,作用机制可能与杠板归通过保肝、降低TGF-β1表达,从而抑制肝纤维化的启动.     

正交试验优选狗肝菜中多糖提取工艺

目的:优选狗肝菜中多糖的最佳提取工艺。方法:以狗肝菜多糖得率为指标,提取时间、温度、次数和料液比为考察因素,采用正交试验优选最佳提取工艺。结果:最佳提取工艺为提取时间2h,提取2次,温度85℃,料液比1∶20。在此最佳工艺条件下狗肝菜多糖得率为(3.26±0.3)%。结论:该工艺稳定、简单、可行,适用于工业化生产。     

七味净肝灵对卡介苗联合脂多糖诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用及其机制

目的：研究七味净肝灵（牛大力、黑老虎、地耳草、叶下珠、虫牙药、白花蛇舌草、甘草）对卡介苗（BCG）+脂多糖（LPS）诱导的免疫性肝损伤小鼠的保护作用及其作用机制。方法：建立BCG+ LPS致小鼠免疫性肝损伤模型,取血,收集肝脏,脾脏和胰腺。生化法测定血清中ALT, AST, MDA, SOD的活性或含量,ELISA法检测肝组织中IL-4,IL-6和NO含量,Western-blot分析肝组织中TNF-α和NF-κB蛋白的表达情况;HE染色,显微镜观察肝组织病理改变。结果：七味净肝灵各剂量组可降低免疫性肝损伤小鼠血清或肝组织中ALT、AST、MDA、IL-4,IL-6和NO的活性或含量,抑制肝组织中TNF-α和NF-κB蛋白的表达,升高SOD活性;病例检查显示其各剂量组均能显著改善肝组织坏死损伤。结论：七味净肝灵对BCG+ LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤有明显的保护作用,其机制可能通过抗脂质过氧化、抑制肝内的炎症反应及细胞毒性作用来介导保肝作用。     

叶下珠对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的保护作用及机制研究

目的:以四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠为模型,探讨叶下珠对CCl4诱导的肝纤维化大鼠的保护作用及机制。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱(0. 12 mg/kg)组和叶下珠(16 g/kg、8 g/kg、4 g/kg,生药量)组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均腹腔注射40%CCl4花生油溶液(1 ml/kg),每周2次,连续8周,建立大鼠肝纤维化模型。从第一次注射CCl4花生油溶液开始,各治疗组分别灌胃给予相应药物,正常组和模型组给予等体积的生理盐水,每天1次,连续8周,8周末摘除眼球取血,收集肝脏。生化法检测血清中谷氨酸转氨酶(ALT)和门冬氨酸转氨酶(AST)活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)表达水平;生化法检测肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平; ELISA法检测肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)含量;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)测定肝组织中α-SMA、TGF-β1相对表达量;通过苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色,显微镜下观察比较肝组织病理学变化。结果:与模型组比较,叶下珠各剂量组能明显降低大鼠血清中ALT、AST、LN、HA、PCⅢ和Ⅳ-C含量;并显著降低肝组织中MDA、TNF-α、IL-6及IL-1β水平,升高GSH-Px和SOD活性;下调肝组织纤维化相关蛋白TGF-β1、α-SMA表达;病理切片显示肝组织炎症坏死程度和肝纤维化病变程度明显改善。结论:叶下珠对CCl4诱导的肝纤维化大鼠具有明显保护作用,其机制可能与抑制氧化应激、炎症反应,调控α-SMA、TGF-β1蛋白表达有关。