芪贞银翘汤联合坎地沙坦酯治疗对2型糖尿病肾脏疾病患者尿UACR、L-FABP的影响

目的:探讨芪贞银翘汤联合坎地沙坦酯治疗对2型糖尿病肾脏疾病患者尿白蛋白/肌酐(UACR)、尿肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)的影响.方法:选取2017年12月～2019年6月期间天津市中医药研究院附属医院收治的80例2型糖尿病肾脏疾病患者作为研究对象,根据其治疗方式的不同分为两组,其中对照组(n=38)在常规控制血...     

补肾活血法浅析

补肾活血法是一种新兴的中医临床治疗大法。此法自 1 978年由张大宁教授在国内首先提出 ,至今已 2 5年。 2 5年前 ,张氏在总结肾病、老年病的实验统计结果时 ,发现绝大多数慢性病及老年病患者 ,均存在着不同程度的“肾虚与血瘀” ,符合古人“久病及肾、久病多瘀”的观点。实际上也构成多种慢性病、老年病及人体衰老的基础。为此 ,张大宁教授提出了“补肾活血法”。活血法即活血化瘀法 ,是运用调畅血行 ,祛除瘀滞的方药 (或其它施治方法 ) ,治疗由于血瘀、血滞所致的各种疾病的方法 ,即《内经》所谓“坚者削之 ,留者攻之”之传统疗法。补肾活…     

洛沙坦对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及Fas和Fas-L表达的影响

目的：探讨血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂（AT1Ra）对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响。方法：单侧肾切除大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病模型,每日灌胃给予AT1Ra洛沙坦（40mg/kg),共12周。采用原位末端标记法检测肾脏细胞凋亡情况,流式细胞术和免疫组织化学检测肾皮质Fas和Fas-L表达。结果：糖尿病组较对照组肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多,Fas和Fas-L的表达亦显著增强;洛沙坦治疗组糖尿病组凋亡细胞数减少,Fas和Fas-L的表达减弱。结论：洛沙坦可能通过影响凋亡相关蛋白Fas和Fas-L的表达而抑制肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用。     

补肾活血法对肾小球系膜细胞MMP-2、TIMP-2表达的影响

摘要: 目的 观察补肾活血法组方中药对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在高糖培养的肾小球系膜细胞（GMC）中表达的影响。方法 将体外培养的GMC分为高糖组（30mmol/L）、正常糖组（5.4 mmol/L）和高糖+补肾活血组方中药组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定GMC上清液中Ⅳ型胶原的分泌;免疫细胞化学法及流式细胞仪（FCM）检测MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2的蛋白表达。结果 与正常糖组比较,随着培养时间的延长,高糖组细胞培养上清液中Ⅳ型胶原分泌明显增加,MMP-2、MT1-MMP表达减少,TIMP-2表达升高（p<0.01）。补肾活血法组方中药可以上调MMP-2的表达,下调TIMP-2的表达。结论 补肾活血法组方中药可以加速细胞外基质降解,减少细胞外基质积聚,从而防治肾小球硬化。     

Raf/MEK/ERK信号转导通路在糖尿病肾病发生发展中的作用

丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）广泛存在于真核细胞内,在上游蛋白Ras蛋白、蛋白激酶C作用下将细胞外有关信号转导到细胞核内部而引起多种细胞反应。Raf／MAPK／细胞外信号调节激酶通路是MAPK家族中的重要一员,糖尿病状态下高血糖、血流动力学异常、肾素一血管紧张素系统激活、内皮素（ET）-1以及转化生长因子（TGF）-β、血小板源性生长因子等均可使之激活,诱导肾小球系膜细胞肥大,细胞外基质合成增加,降解减少,从而参与和促进糖尿病肾病的发生、发展。     

环氧化酶-2与肺癌

环氧化酶-2（COX-2）在肺癌细胞呈过表达,并且促进肿瘤增殖、侵袭、血管生成和抗凋亡。COX-2抑制剂在动物实验中可抑制肿瘤生长。进一步了解COX-2介导的肿瘤生成及其与其它分子的相互作用机制可能为肺癌的治疗提供新的途径。     

补肾活血法治疗慢性肾小球肾炎疗效观察

[目的] 观察补肾活血法治疗慢性肾小球肾炎的临床疗效。[方法] 100例患者随机分为两组,对照组50例和治疗组50例。对照组采用西医常规治疗,治疗组加用补肾活血的中药汤剂,12周后统计疗效。[结果] 治疗组总有效率为94%,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）.两组经治疗后24 h尿蛋白定量、血尿素氮（BUN）均显着下降（P<0.01）,治疗组优于对照组。治疗组尿红细胞数、血肌酐（Scr）与治疗前相比显着下降,差异有统计学意义（P<0.01）.[结论] 补肾活血法对慢性肾小球肾炎有良好的疗效。     

白细胞介素-1β在人肾小管上皮细胞转分化中的作用及Janus激酶2抑制剂AG490的影响

目的 探讨Janus激酶2抑制剂AG490对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响. 方法 将体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKCs)分为空白对照组、IL-1β(5 ng/ml)刺激组及AG490干预组(IL-1β 5 ng/ml+AG490 10 μmol/L).分别于处理后24、48、72 h收集细胞,采用免疫细胞化学染色和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测细胞角蛋白-18(CK-18)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达. 结果 正常肾小管上皮细胞内其自身标志物CK-18高表达(1.25±0.08),而α-SMA表达很少(0.17±0.01).IL-1β刺激组随刺激时间延长CK-18表达逐渐减少(24 h:0.69±0.04,48 h:0.52±0.03,72 h:0.30±0.01),而α-SMA蛋白合成逐渐增加(24 h:0.56±0.04,48 h:1.05±0.07,72 h:1.43±0.07),与空白对照组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).AG490干预能使CK-18的表达逐渐恢复(24 h:1.07±0.07,48 h:0.93±0.06,72 h:0.83±0.06),并减弱IL-1β对肾小管上皮细胞α-SMA蛋白的诱导作用(24 h:0.33±0.01,48 h:0.52±0.01,72 h:0.61±0.04),且作用显著(均P＜0.05).免疫细胞化学染色观察结果与其一致. 结论 炎症因子IL-1β通过降低肾小管上皮细胞CK-18表达,上调α-SMA表达,促使肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞;Janus激酶2抑制剂AG490能部分阻断IL-1β对肾小管上皮细胞的促转分化作用.     

靶向抑制人SREBP-1基因对高糖刺激下人肾小管上皮细胞脂滴形成的影响

目的构建人SREBP-1基因的shRNA载体并转染人肾小管上皮细胞(HKC)明确是否沉默SREBP-1基因的表达可减轻高糖环境引起的细胞内脂滴形成。方法设计两对针对人SREBP-1基因的干扰靶序列及短链寡核苷酸和线性化的pGenesil-1质粒进行连接,筛选鉴定并最终命名为pGenesil-1-SREBP1-1和pGenesil-1-SREBP1-2。体外培养人肾小管上皮细胞并随机分组,采用阳离子脂质体法转染细胞后给予高糖刺激48h,在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,半定量RT-PCR和Westernblot分析目标基因表达丰度的变化,并采用油红O染色检测细胞内脂滴。结果经酶切及测序鉴定证明构建的重组载体pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2序列正确;转染HKC细胞后均可表达绿色荧光;RT-PCR和Westernblot显示pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2能够有效抑制高糖环境下HKC细胞SREBP-1的表达,与阴性质粒对照组相比,差异有统计学意义。进一步研究发现在HKC细胞内,SREBP-1基因表达沉默明显抑制了脂肪酸合成酶(FAS)的转录,细胞内脂滴明显减少。结论有效沉默高糖刺激下HKC细胞SREBP-1的基因表达可通过抑制FAS转录而减少细胞内脂滴形成。     

高糖通过SREBP-1促进人肾小管上皮细胞转化生长因子β1和纤维黏连蛋白表达

高糖刺激人肾小管上皮细胞(HKC)48 h后,固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)、转化生长因子β(TGF-β1)和纤维黏连蛋白(FN)表达增Jm(均P<0.01).以RNA干扰技术下调SREBP-1表达后,高糖刺激的TGF-β1和FN蛋白表达分别减少17.9%和24.6%(均P<0.01).