表达大肠杆菌LT—B／pro—ST融合抗原的减毒鼠伤寒沙门？…

目的：构建表达ＬＴ－Ｂ／ＳＴ融合蛋白的产肠毒素大肠杆菌口服活菌疫苗候选要。方法：编码ＬＴ＿Ｂ／ＳＴ融合蛋白的基因插入ｐＹＡ２４８载体中,构建了重组质粒ｐＸＺＬ６６。该重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门菌ＳＲ－１１,ΔＣｙａ,ΔＣｒｐ,ΔＡｓｄ菌株Ｘ４０７２。结果：此无抗药性的杂合菌株Ｘ４０７２（ＰＸ－ＺＬ６６）表达的ＬＴ－Ｂ／ＳＴ融合蛋白具有耐热及不耐热肠毒素的免疫原性而没有可检出的生物毒性。结论：为研究     

幽门螺杆菌重组粘附素rHpaA生物学活性及免疫原性的体外评价

目的：体外评价幽门螺杆菌（Hp)重组粘附素rHpaA的生物学活性及免疫原性,探讨其在Hp疫苗应用中的可行性。方法：流式细胞术和光镜定量计数法检测rHpaA及其抗体对Hp与胃上皮细胞粘附的影响;ELISA法测定Hp感染者血清中抗HpaA抗体,^3H-TDR掺入法测定人外周血淋巴细胞（PBL）对rHpaA的增殖反应,评价rHpaA对体液和细胞免疫的细胞;流式细胞术检测rHpaA对T辅助细胞（Th）表型的选择作用,探讨rHpaA可能的免疫机制。结果rHpaA和抗rHpaA抗血清均能部分阻断Hp与胃上皮细胞系的粘附;ELISA法能检测出Hp阳性患者血清中存在抗HpaA抗体,检测出率与Hp超声破碎抗原（HpSON)包被下的检出率相近（50%vs54%,P＞0．05）;不论培养基中是否加入IL－2,rHpaA均可刺激Hp PBL的增殖（P＜0．05）;Hp阳性或阴性PBL细胞与rHpaA孵育后均能显著提高IL－4阳性T细胞比例（P＜0．05）。结论HpaA是具有免疫原性的Hp菌体成分,且能选择性增加Th2细胞比例,有望成为Hp疫苗研制中一种有效的新抗原。     

幽门螺杆菌粘附素基因babA2的克隆及免疫应答的初步研究

目前，幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)疫苗的研制仍处在抗原的筛选阶段，已经评价的基因重组抗原基本上是着眼于阻断Hp的毒力因素，而与Hp定植密切相关的粘附素评价较少。babA是迄今为止唯一明确受体的Hp粘附素，研究表明babA基因存在两个等位基因：babA1和babA2，其中只有babA2：具备与Le^b结合的功能。本实验对babA2基因进行了克隆和表达并研究了其免疫反应。     

产肠毒素大肠杆菌混合载体疫苗的免疫原性评价

本研究在构建表达ETEC菌毛抗原CFA/I、CS6和CS3、融合肠毒素LTB/STm的混合活载体疫苗的基础上 ,以两株福氏志贺载体疫苗 ,同等剂量相混合进行免疫。通过口服免疫 ,该混合多价活疫苗能够诱导机体产生相应的抗ETEC特异的血清和黏膜抗原抗体反应 ,达到了与各单独疫苗株一致的免疫效果 ,同时保持了载体志贺菌自身的免疫原性。     

肠毒素性大肠杆菌CS3菌毛呈现载体的构建

目的 构建大肠杆菌ＣＳ３菌毛呈现载体,实现外源表位在细菌表面的呈现。方法 通过对ＣＳ３亚基蛋白二级结构、抗原表位、亲水性及柔韧性的预测分析,确定外源表位的插入位点,重叠延伸ＰＣＲ方法进行定点突变,将口蹄疫病毒ＶＰＩ插入到ＣＳ３中以验证表现呈现能力;用重组菌腹腔注射免疫小鼠以探讨其抗原性。结果 在大肠杆菌ＣＳ３的１３６位氨基酸残在后突变插入ＢａｍＨⅠ酶切点构建成呈现载体,全细胞ＥＬＩＳＡ、电镜和免疫     

逆向疫苗学及其研究进展

基于基因组的疫苗研发途径被称为逆向疫苗学，它不仅省时、经济，而且可为传统方法难于或根本无法开展的疫苗研究提供新的解决方法。逆向疫苗学的研究过程始于硅片，用计算机预测疫苗的所有抗原。不依赖于抗原是否丰富，也不需要微生物是否能够体外培养。本文介绍逆向疫苗学的概况。特别是近年来在研制某些病原茵新疫苗方面的进展。     

霍乱毒素B亚基融合蛋白表达载体的构建

霍乱毒素Ｂ亚基（ＣＴ－Ｂ）具有很强的免疫原性。口服时，在宿主小肠内ＣＴ—Ｂ与神经节苷脂ＧＭ１结合，能够激发机体产生粘膜免疫球蛋白Ａ（ＳＩｇＡ）和全身免疫球蛋白Ｇ（ＩｇＧ）。近几年的研究表明，ＣＴ－Ｂ还能辅佐其他抗原刺激机体产生ＳＩｇＡ，具有免疫佐剂作用。ＣＴ－Ｂ亚基被认为是亚单位疫苗和肽苗的良好载体。在研制预防霍乱和大肠杆菌腹泻的新型口服多价疫苗中，已经注意利用ＣＴ－Ｂ的Ｌ述特性。本研究通过ＰＣＲ技术定点突变，在ＣＴ－Ｂ基因３’端终止密码子处进行两个碱基的突变，消除了转译终止密码子并引入了限制性…     

保留乳头的乳腺癌根治术并胸小肌翻转带蒂前锯肌转移Ⅰ期乳房成型术

目的：建立一种手术方式，改善保留乳头的乳癌根治术后患侧乳腺的外观状况。方法：14例符合条件的乳腺癌患者在保留乳头的乳癌根治术后实行胸小肌翻转带蒂前锯肌转移，衬垫于乳头及乳晕下，重塑乳腺外形。结果：所有患者术后乳头乳晕由贴近胸壁变为凸起4-5CM，具备较好的乳腺外形。结论：本术式对保留乳头的乳癌根治术后乳头的三维偏移，将发挥重要的矫正作用。     

中国汉族人群遗传性聋基因座位STR位点的遗传多态性研究

目的 研究中国汉族人群10个遗传性聋基因座位的短串连重复序列(STR)的遗传多态性。方法 应用PCR方法对10个位点进行扩增，变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，记录基因型。采用PPAP软件计算正常人各STR位点等位片段频率、基因型频率、预期基因型频率、多态信息量(PIC)和Hardy-Weinberg平衡吻合性检验。结果 中国汉族人群D6S287、D8S1132、D13S1275、D15S130、D1S2726、D4S3038、D2S2380、D22S282、D14S1042、D7S529各位点分别检出10个、9个、8个、7个、7个、7个、6个、6个、6个及5个等位片段，多态性分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律。各位点PIC值分别为0．879、0．854、0．864、0．821、0．686、0．794、0．764、0．732、0．773、0．712；杂合度均高于0．7。结论 中国汉族人群10个位点STR均具有较高的杂合度和多态信息量，是较理想的遗传标记。