RhoA短发夹状双链RNA对肝癌细胞HepG2生物学行为的调控研究

[目的]探讨肝癌细胞HepG2中RhoA的表达水平,以及载体表达的短发夹状双链RNA(shRNA)特异性抑制RhoA在HepG2中的表达后,对肝癌细胞侵袭迁移和增殖能力的影响。[方法]RT-PCR和Western-blot方法检测RhoA在HepG2及L02中的表达;构建RhoA shRNA真核表达载体;脂质体法转染至高表达RhoA的HepG2细胞中;筛选得到稳定低表达RhoA的HepG2细胞株,用侵袭小室法(transwell)检测该细胞株侵袭和迁移能力的改变;并用染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记该细胞株,流式细胞仪检测细胞增殖能力的变化。[结果]HepG2中RhoA mRNA和蛋白的表达水平均显著高于正常人肝胚胎细胞系L02(两者均P0.05)。转染pshRNARhoA真核载体特异性抑制RhoA的表达后,HepG2细胞分别在侵袭实验和迁移实验中穿过微孔膜的细胞个数均远少于对照组细胞(两者均P0.05),增殖能力也明显减弱(P0.05)。[结论]抑制肝癌细胞HepG2中RhoA基因的表达能降低细胞的侵袭迁移和增殖能力,部分逆转肝癌细胞的恶性表型,为进一步研究肝癌侵袭转移和增殖机制提供了实验基础。     

临沂市伤寒副伤寒流行特征及防治对策

目的探讨临沂市伤寒、副伤寒流行特征，制定有效的控制措施。方法收集该市1956-2005年伤寒疫情报告及流行病学调查资料，进行汇总分析。结果1956-2005年，临沂市共发生伤寒病人11674例，死亡70例，年平均发病率为2．47／10万，病死率0．60％；发病具有明显的周期性和季节性；年龄主要集中在15~40岁年龄段，占67．06％；农民和中、小学生是主要的发病人群，占75．81％；平原伤寒、副伤寒发病率高于山区；临床特征由典型转为不典型；近3年我市以甲型副伤寒发病为主。结论应采取以切断经水传播、免疫接种和敏感药物治疗为主的综合性防治措施，以控制临沂市的伤寒、副伤寒疫情。     

ICP-MS法测定复方龙血竭胶囊中5种有害元素的残留量

目的:建立复方龙血竭胶囊中铅、镉、砷、汞、铜5种重金属及有害元素含量的测定方法。方法:采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS),样品经微波消解后测定,在线引入内标以校正基体效应。结果:各元素在一定浓度范围内线性关系良好(r≥0.9990);检测限为0.389 ng·g-1~3.548ng·g-1;加样回收率为87.5%~109.4%,RSD(n=9)均小于9.1%。结论:该方法较简便、快速、准确,可用于复方龙血竭胶囊中有害元素的测定。     

戊型肝炎病毒开放读码框3蛋白抑制肿瘤坏死因子-α介导肝细胞p65的核转移

目的:研究Ⅰ型和Ⅳ型戊型肝炎病毒(HEV)开放读码框3蛋白(ORF3)对肝细胞系L02核因子-kappa B(Nuclear Factor kappa B,NF-KB)通路的影响.方法:分别用未转染质粒、转染Ⅰ型和Ⅳ型ORF3真核表达质粒及空载质粒的L02细胞,48小时后加入TNF(肿瘤坏死因子)-α刺激,采用免疫荧光观察细胞内p65的核转运,并用western blot检测p65蛋白的表达.结果:未转染质粒的L02细胞加入TNF-α刺激后,p65由胞浆转入胞核;转染空载的L02细胞加入TNF-α刺激后,与未转染的L02相似,p65由胞浆转入胞核;表达Ⅰ型和Ⅳ型ORF3蛋白的细胞,加入TNF-α刺激后,p65未见明显核转移.结论:Ⅰ型和Ⅳ型ORF3蛋白可抑制TNF-α介导的p65核转移.     

临沂市中小学生重组酵母乙型肝炎疫苗接种效果

目的评价重组酵母乙型肝炎疫苗（以下称乙肝疫苗）在临沂市中小学生中大规模接种后的效果。方法采用随机整群抽样法，选择兰山区中小学各1所。小学1—6年级和中学初一到高三的6—18岁1829名学生，接种重组酵母乙肝疫苗。1年后，采用ELISA检测血清中HBsAg、抗-HBc、抗-HBs。结果乙肝疫苗接种前后乙肝病毒标志物（HBVM）阳性率差异有统计学意义（x^2=236．66，P〈0．01）；HBVM中，接种后抗-HBs阳性率显著高于接种前（x^2=205．42，P〈0．01）；接种前后HBsAg总感染率、抗-HBc总感染率差异无统计学意义。结论中小学生大规模接种的效果较好，低年龄组人群应为乙肝疫苗大规模接种的优选对象。     

杏仁腈在常用溶剂中的稳定性考察及其在健儿清解液中的含量测定

目的 采用HPLC考察杏仁腈在常用溶剂中的稳定性并测定健儿清解液中杏仁腈的含量。方法 采用Agilent TC-C₁₈(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(23∶77)为流动相,流速为1.0 mL·min^–1,柱温为30℃,检测波长为207 nm。以峰面积的下降率为指标,考察以甲醇、95%乙醇、乙腈、水、pH值2.0～6.0的磷酸溶液及1.0%冰醋酸乙腈为溶剂制备的杏仁腈溶液的稳定性。结果 杏仁腈在甲醇、95%乙醇及水中不稳定,而在乙腈中相对稳定;使用pH值为2.0～3.5的磷酸溶液及1.0%冰醋酸乙腈溶液配制的杏仁腈对照品溶液,可在12 h内保持稳定。杏仁腈质量浓度在1.033～294.987μg·mL^–1内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为97.4%,RSD为0.6%(n=9)。5家企业生产的16批次样品中杏仁腈的含量为3.854～154.578μg·mL^–1。结论 所建立的方法简单、准确,可以用于健儿清解液的质量控制;同时应关注溶剂对...     

橙皮苷对果糖饮食诱导的非酒精性脂肪肝小鼠的作用研究

目的:研究橙皮苷对高果糖加高脂饲料饮食诱导的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)和固醇调节元件结合蛋白1 c(SREBP-1 c)表达的影响.方法:昆明小鼠60只,雄性,随机分为正常组、模型组、阳性药物多烯磷脂酰胆碱组,以及橙皮苷低、中和高剂量组,每组10只,除正常组给予普通饲料...     

甲型副伤寒杆菌培养分离及血清学实验影响因素探讨

对81例甲型副伤寒杆菌培养分离并进行血清学实验影响因素分析,认为采血时间、采血量和抗生素对菌株分离有较大影响;试剂对肥达氏反应有影响,采双份血作肥达氏实验是必要的.     

麻风的防治与经费筹措

对山东济宁市6个县的麻风防治经费进行了一次调查。该市在60年代初曾有病人1361名,以后逐渐减少,到1995年只剩31名;患病率由0.743‰降到0.0073‰。在80年代以前所有经费均由政府拨给,到1995年则有13.23%由防治机构自筹。在60年代时,每年为每个病人开支的钱为136.9元,以后逐年增加,到1995年每年平均为17941.7元;以防治人员计,每年每人所摊的经费,在60年代为8101元,1995年为12,934.7元。防治人员中专门从事麻风的,在70年代中期以前为100%,到1995年只占39%,但人头费的开支却占了开支总数的大部分。作者指出,近年政府拨款虽有大幅度增加,而且病人减少,但因物价上涨,特别是人员增多,工资上调,能实际用于防治的钱是大大减少了。这对防治工作产生了不利影响;为了能在我国彻底消灭麻风,建议领导机关制定相应的政策,以改变这种局面。     

宾馆客房装修后室内空气中甲醛污染调查

目的 调查装修后客房空气中甲醛的污染现状并探讨其影响因素。方法 选择3家宾馆100间装修时间1-6个月的客房为研究对象，选择50间装修时间3a以上的客房为对照，利用化学分光光度法检测室内甲醛的浓度。结果 装修后相同时间内，高温期的甲醛浓度和低温期的甲醛浓度差异存在显著性（P〈0．05），复杂装修带来甲醛污染较简单装修污染严重。结论 装修后室内空气中的甲醛污染相当严重。影响室内甲醛含量的因素主要是装修材料的质量、用量、装修时间和室内温度，保持良好的通风有利于甲醛的释放，可有效地减轻甲醛的污染程度。