小鼠2细胞期胚胎移植方法的探讨

目的以近交系C57BL/6J小鼠作为供体胚小鼠，封闭群ICR小鼠及昆明鼠作为假孕体，对2细胞期的胚胎移植方法和假孕鼠品系进行对比探讨。方法经超数排卵的C57BL/6J雌鼠于正常雄鼠交配，取受精卵，培养到2细胞期，进行输卵管伞移植和输卵管壁移植，妊娠产仔。结果从KM为假孕鼠，对2细胞期胚胎进行的输卵管壁移植的妊娠数量最多18只，90%的妊娠率，产仔数最多188只，产仔率达34.8%。结论输卵管壁移植的技术简单易行具有较高的妊娠率及产仔率。     

IRM-2近交系小鼠的血液学及血清生物化学研究

目的测定正常成年近交系小鼠IRM-2的一些血液学和血清生物化学参数.方法用自动光电血球计数仪测定分析了IRM-2小鼠的血细胞成分及相关参数;用半自动生化分析仪测定了血清常用的13项生化指标;并进行了常规法骨髓细胞的分类.结果雌、雄小鼠各10只,平均生化指标及活度分别为:ALT:39.1 U/L 和44.1 U/L, AST:128.2 U/L 和113.0 U/L, ALP:117.7 U/L 和76.5 U/L,GLU:4.2 mmol/L和4.7 mmol/L,TG:0.79 mmol/L和 0.73 mmol/L,CHO:2.9 mmol/L和 3.5 mmol/L, TP: 29.4 g/L 和 28.1 g/L, ALB:21.2 g/L 和18.9 g/L,BUN:5.29 mmol/L和 5.0 mmol/L,CRE:52.1 μmol/L 和 51.0 μmol/l, Ca:6.8 mg/dl和 7.0 mg/dl,P:7.4 mg/dl和7.7 mg/dl, TBIL:38 μmol/L和 38 μmol/L.外周血检测为RBC:9.5×1012/L和9.1×1012/L, WBC:10.3×109/L和 9.5×109/L,PLT:485(109/L 和604×109/L,粒细胞(包括杆状核和分叶核)分别占21.2%和 31.7%,白细胞中的淋巴细胞分别占78.7% 和68.2%.骨髓象中粒系统占45%,红系统占22%.结论从这些结果可以看出,IRM-2近交系小鼠的血液生理、血液生化指标较稳定,个体差异较小,适合用作辐射损伤动物模型和肿瘤放射治疗动物模型及其他研究.     

两个封闭群NIH小鼠群体的遗传监测结果的比较分析

目的 对近3年北京地区的两个NIH封闭群小鼠群体的遗传质量进行监测分析。方法 利用生化标记基因检测法, 2011年测定A、B两单位NIH小鼠在碱性磷酸酶-1等14个遗传生化标记位点上的多态性。2014年利用相同方法原则对B单位的NIH小鼠群体进行抽样检测, 比较了该小鼠群体3年来的遗传构成变化。结果 2011年, A、B两单位NIH小鼠群体均呈多态性的生化标记位点有6个(Ce2、Car2、Gpi1、Es10、Gpd1、Pgm1), 且B单位在Es3位点也呈多态性;两群NIH小鼠在Car2位点有差异(P < 0.05),在Es3、Gpd1、Pgm1三个位点有显著差异(P < 0.01);两群体的群间分化系数为0.0406, 遗传一致性指数为0.9619, 遗传距离为0.0388。与2011年相比, B单位封闭群NIH小鼠在2014年出现了2个纯合位点(Ce2和Gpd1), 同时Es10和Gpd1两位点差异极显著(P < 0.01),Pgm1位点差异显著(P < 0.05);不同代次NIH小鼠群间分化系数为0.1103, 遗传一致性指数为0.8847, 遗传距离为0.1266。结论 群体隔离、选种育种、种群数量和繁育代次等对NIH小鼠遗传构成差异影响显著。留种和繁育生产时应加强封闭群NIH小鼠的遗传监测, 为其遗传质量的稳定性提供保障。     

生物制品常用实验动物质量控制

本文对《中国药典》2020年版三部通则3601进行解读,主要对该通则的主要特点、内容以及质量控制指标等进行阐述,为通则的实施提供参考。     

牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立及应用

目的建立用于牛源样本中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)双重RT-PCR检测方法。方法选择已发表的BVDV 1型和BVDV 2型包含5’UTR区高保守区域基因作为靶基因,分别设计合成引物,建立双重BVDV RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行方法学评价。同时用建立的RT-PCR方法检测了小牛血清、小牛血清去蛋白提取液、脾多肽注射液等41批次牛源性样本和64份牛血浆样本。牛源样本和64份牛临床样本。结果建立的BVDV RT-PCR检测方法与牛副流感病毒III型(BPIV3)、猪瘟病毒(CSFV)、乙型脑炎病毒(JEV)均无交叉反应;检测BVDV 1型和BVDV 2型DNA模板最低浓度分别为每微升8.87×10~2拷贝和6.31×10~2拷贝,BVDV 1型和2型c DNA在-30℃冰箱放置12个月仍可检测出目的条带。应用建立的BVDV RT-PCR方法检测41批次牛源样本和64份牛血浆样本,核酸阳性率分别为14.6%和29.7%。结论建立的BVDV RT-PCR检测方法具有快速、特异、敏感及稳定的特点,可用于牛源样本携带BVDV核酸的检测。     

树鼩腺病毒（TAV）PCR方法的建立及初步应用

目的建立树鼩腺病毒(TAV)PCR检测方法,并进行初步应用。方法根据NCBI公布的TAV基因组序列,选择19418-19917区域人工合成一段DNA序列并转入质粒中,作为阳性标准质粒。设计1对特异性引物建立TAV PCR检测方法,考察其特异性和灵敏度。应用该PCR方法对60份树鼩血DNA及56份树鼩粪便DNA进行检测。结果所建立的PCR检测方法经特异性和灵敏度测定,最低可检测13.5 x10-7μg/m L,与其他腺病毒无交叉,特异性好,灵敏度较高。60份树鼩血DNA检测均为阴性,56份树鼩粪便DNA检测有24份阳性,通过测序证实树鼩粪便中TAV感染率为42.9%,与扩增结果一致。结论建立的树鼩腺病毒PCR检测方法特异性强,灵敏度高,可用于树鼩腺病毒的常规检测中。