抗凋亡基因bcl-2转染哺乳动物细胞的研究

目的：构建抗凋亡基因bcl-2的哺乳动物细胞表达型质粒并转染哺乳动物细胞293T细胞。方法：利用基因重组技术，将bcl-2全编码cDNA序列，导人pCMV-Tag1表达型质粒；应用磷酸钙共沉淀技术，将其转染293T细胞：并利用免疫沉淀和Westernblotting技术检测Bcl-2融合蛋白的表达。结果：bcl-2全编码cDNA序列成功导人pCMV-Tag1表达型质粒；在转染后的293T细胞成功地检测出bcl-2融合蛋白的表达。融合蛋白大小与预期完全一致。结论：该表达型质粒可以成功转染哺乳动物细胞，为对胰岛细胞的转染奠定了基础。     

血清骨钙素放射免疫分析的临床初步应用

用放射免疫分析方法对304例正常成人及内分泌疾病和代谢性骨病患者的血清BGP进行了观察。结果表明,未经治疗的甲亢、原发性甲旁亢、骨软化症、肢端肥大症患者血清BGP显著高于正常对照组。甲减、特发性甲旁减、Sheehan综合征、肾上腺皮质功能亢进症患者血清BGP降低。部分代谢性骨病患者治疗后,血清BGP有不同程度的恢复。这些结果表明,血清BGP测定可以作为这些内分泌疾病及代谢性骨病的诊断、疗效观察的指标之一。     

糖尿病胃瘫的治疗进展

糖尿病胃瘫(diabetic gastroparsis DGP)又称糖尿病胃麻痹症(gastroparesis diabeticorum)是糖尿病常见并发症之一,其发病主要表现为胃排空延缓而导致的饱胀、厌食、恶心、呕吐等。近年随着对糖尿病及其并发症基础研究的进展,不仅对DGP发病机制加深了认识,也为针对DGP的药物治疗提供了理论基础。     

假性甲状旁腺功能低下—激素不应症的一种类型

近年来实验室技术的开展,加深了对甲状旁腺激素(PTH)与骨、肾及体内钙磷代谢关系的认识。目前可根据发病机制及其相对应的临床表现,分析甲状旁腺功能低下(甲旁低)的病例,得出较确切的病因诊断和治疗措施。特别是假性甲旁低(PsHP)它不缺乏活性PTH,而是靶组织器官对PTH抵抗,它代表一组疾病,即机体具有正常的多肽     

他巴唑和甲状腺素对Graves'病患者sIL-2R的影响

研究他巴唑和甲状腺素对Ｇｒａｖｅｓ’病患者ｓＩＬ－２Ｒ的影响。方法将２５例Ｇｒａｖｅｓ’病患者外周血单个细胞在不同浓度的他巴唑和甲状腺素条件下进行体外增减同时检测培养上清液及血浆ｓＩＬ－２Ｒ水平并与血浆游离Ｔ３（ＦＴ３）和游离Ｔ４（ＦＴ４）作相关分析。结果ＧＤ患者血浆ｓＩＬ－２Ｒ较正常对照明显升高,并与血浆ＦＴ３和ＦＴ４成正相关（分别为（Ｐ〈０．０５和Ｐ〈０．０１）;ＧＤ患者ＰＢＭＣ培养上清ＳＩＬ     

34例天津市正常人血浆游离氨基酸谱

许多疾病可以引起体内蛋白质代谢紊乱,导致血浆游离氨基酸(简称血浆氨基酸)的改变。了解我国膳食条件下正常人血浆氨基酸谱,对探讨某些代谢疾病的发生和发展,指导临床营养治疗具有一定价值。本文扼要的介绍34例天津市正常人15种血浆氨基酸谱的组成和含量,供医学科研和临床检验     

非胰岛素依赖型糖尿病人胰岛β细胞功能与胰岛细胞抗体反应的关系

本文比较了5例胰岛细胞抗体阳性(ICA_s~+)和5例配对的胰岛细胞抗体阴性(ICA_s~-)的非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)患者以及7例正常对照的口服葡萄糖耐量实验(OGTT)结果。NIDDM 组血糖显著高于正常对照组,胰岛素/血糖则低于对照组。ICA_s~+组的胰岛素、胰岛素/血糖显著低于 ICA_s~-组。经果提示:ICA_s~+的 NIDDM 患者的胰岛β细胞功能低于配对的ICA_s~-者。     

高浓度游离脂肪酸对胰岛细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的：观察高浓度游离脂肪酸体外对胰岛细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响。方法：应用TUNEL法检测高浓度游离脂肪酸培养后大鼠胰岛细胞和小鼠βTc3细胞凋亡百分率，应用定量RT～PCR(QRT—PCR)检测培养后bc1-2、bax、c—myc、p53和fas mRNA的表达。结果：高浓度游离脂肪酸使原代培养的大鼠胰岛细胞和βTc3的凋亡细胞比例明显增加。胰岛细胞凋亡过程中，诱导凋亡基因bax、c—myc、fas的tuRNA表达水平明显升高，抵抗凋亡基因bcl-2mRNA表达水平明显下降，p53 mRNA表达水平无明显改变。结论：游离脂肪酸可能通过诱导胰岛细胞凋亡导致或加重糖尿病，其中bc1-2／bax mRNA表达比率变化可能起重要作用。     

TGF-β1和ECM与糖尿病肾病关系的实验研究

目的 观察高糖条件下大鼠肾小球系膜细胞（ＧＭＣ）分泌细胞外基质（ＥＣＭ）成分中纤粘连蛋白（ＦＮ）、层粘连蛋白（ＬＡＭ）、Ⅱ及Ⅳ型胶原和转化生长因子β（ＴＧＦ－β１）的变化,探讨细胞因子和细胞外基质在糖尿病肾病发病中的作用。方法 采用体外大鼠肾小球系膜细胞培养,用ＥＬＩＳＡ方法测定培养上清液中的ＥＣＭ和ＴＧＦ－β１。结果（１）高糖条件下,ＧＭＣ合成和分泌ＴＧＦ－β１增加。（２）高糖对体外培养的系膜细     

长期高浓度葡萄糖对胰岛细胞凋亡和功能相关基因表达的影响

目的　探明长期高浓度葡萄糖对体外胰岛细胞功能和凋亡相关基因表达的影响。方法应用放免法检测不同浓度葡萄糖培养后大鼠胰岛细胞和小鼠 βTc3细胞在葡萄糖刺激时培育上清液和细胞内的胰岛素水平 ;应用半定量多重RT PCR和Northern印迹法检测培养后IDX 1(Isletduodenalhomeobox 1) ,葡萄糖激酶 (GK ) ,葡萄糖转运子 2 (GLUT2 ) ,C/EBPβ和Bcl xmRNA的表达情况 ;应用TUNEL法检测培养后的细胞凋亡百分率。结果　 ( 1)长期高浓度葡萄糖培养导致大鼠胰岛细胞和小鼠βTc3细胞对葡萄糖刺激的胰岛素分泌反应降低和细胞内胰岛素含量的减少 ;( 2 )高糖培养 14天可以使大鼠胰岛细胞IDX 1和GLUT2mRNA表达明显减少 (P <0 .0 5 ) ,C/EBPβmRNA表达明显增加 ,GKmRNA表达无明显变化 ;( 3 )高糖培养可以明显增加大鼠胰岛细胞和小鼠 βTc3细胞凋亡百分率 ;( 4 )大鼠胰岛细胞高糖培养 14天后Bcl xSmRNA水平明显增加 ,Bcl xLmRNA水平无明显变化 ,Bcl xL/Bcl xSmRNA比率明显减少 (P <0 .0 5 )。结论　 ( 1)长期高糖培养可以诱导大鼠胰岛细胞和小鼠 βTc3细胞凋亡和功能缺陷 ;( 2 )IDX 1表达的变化在大鼠胰岛细胞功能缺陷中起重要作用 ;( 3 )大鼠胰岛细胞的Bcl xL/Bcl xS比率变化在高糖所致的胰岛细胞凋亡中起重要作用。