药物危险度评估策略及展望

药物危险度评估是对人类暴露于药物后可能造成的身体不良反应的系统科学研究,包括药物危险鉴定、剂量-反应关系评定、药物暴露评估和药物危险度特征判定4个步骤,是一复杂又具有重要意义的挑战性工作。随着药物危险度评估中生物学机制模型的应用,生物标志物及其有效性评价工作的迅速开展,生物信息学、硅上毒理学、毒理组学等研究的广泛深入,使用动物模型替代人体进行危险度评估越来越成为可能。     

红细胞免疫功能检测的临床应用

<正> Siegel等在1981年首先提出了“红细胞免疫系统”的新概念,认为红细胞不仅具有运送、吸呼气体的功能,而且具有免疫功能。Fearon等报道循环血中红细胞C_3b受体数与白细胞受体数的比值为21:1,这表明血循环中95%以上的C_3b受体存在于红细胞表面。Medof等研究发现红细胞可结合82.8～84.8%的免疫复合物(IC),而中性粒细胞和单核细胞分     

老年急性肺动脉栓塞的护理

通过对9例老年肺动脉栓塞患者的观察与护理,总结出能使此病急、危、重症病死率降低、并发症减少的护理经验,即:立即做好抢救准备工作;配合医生做好各项辅助检查;严密观察胸痛、呼吸困难的情况;做好病人的心理护理、基础护理、出血的观察和护理;重视出院指导。     

端粒酶检测在实体瘤诊断中的应用

端粒酶是由RNA和蛋白质组成的核糖核蛋白复合体，其RNA含有端粒互补的模板区序列，能特异性识别端粒引物位点及复制端粒系列。正常人体细胞的端粒酶一般为阴性，端粒酶的激活与细胞的无限增殖密切相关，可能是体细胞向肿瘤转化的关键步骤。近年来国内外对端粒酶进行了广泛的研究，已成为肿瘤研究的热点。     

新型聚酮合酶基因簇的分离与部分鉴定

目的 从海洋沉积物中分离新型聚酮合酶(PKS)基因簇,并解析其基因结构,为研究PKS的组合生物合成提供新组件.方法 采集中国东海沉积物样本,并提取宏基因组DNA,以其为模板,通过简并PCR扩增新型PKS片段,用地高辛标记正确的扩增片段作为探针,然后从本研究中构建的海洋沉积物样本Fosmid宏基因组文库中筛选完整基因簇,测序、结构分析.结果 (1)所分离得到的海洋沉积物宏基因组DNA可直接作为PCR模板,简并PCR扩增得到26个新型KS编码片段,并成功提交GenBank;(2)所得DNA构建成滴度约5×108cfu/ml的Fosmid文库,插入片段平均长度约为40kb;(3)将其中的一个KS片段(GenBank登录号DQ942531)用地高辛标记并筛选部分文库,得到4个克隆,测序得到7981bp的序列(GenBank登录号EF568935),结构分析发现含典型的I型PKS组件,如酮缩酶(KS)、酰基转移酶(AT)、酰基载体蛋白(ACP)等.结论 简并引物扩增、宏基因组文库筛选、测序、结构分析,在本研究中被证明是有效的分离新PKS基因簇的途径;通过系统进化树分析得出26条新KS片段属于I型KS片断和杂合PKS/NRPS基因簇,主要来自放线菌门、δ变形菌门、蓝藻门和β变形菌门的微生物.     

龙血竭栓对兔直肠破损黏膜刺激性和对豚鼠皮肤致敏性实验

目的:观察龙血竭栓的刺激性与致敏性。方法:以龙血竭栓对新西兰兔直肠破损黏膜单次及多次给药,观察其对兔直肠破损黏膜的刺激性;采用Buehler法对豚鼠皮肤给药,观察龙血竭栓对其致敏性。结果:新西兰兔直肠破损黏膜单次和多次给药,各剂量组动物给药后未见疼痛症状,粪便未见明显异常,肛门区域和肛门括约肌局部组织未见充血、水肿等现象,直肠破损黏膜未发现药物相关的明显组织病理学改变。Buehler实验龙血竭栓组动物过敏反应发生率为0%,实验期间未见任何过敏性反应症状。结论:龙血竭栓对兔直肠破损黏膜无刺激性,对豚鼠无致敏作用。     

融合蛋白Kininogen D5_（60-148）-TRAIL_（114-281）的表达及其抑制血管新生和诱导细胞凋亡的作用

目的：采用原核表达系统表达人Kininogen D560148TRAIL114281融合蛋白,并对其生物学活性进行研究。方法：PCR技术扩增Kininogen D560148和TRAIL114281的编码序列,分别构建原核表达载体pMALKininogen D560148（pMALKD5）、pMALTRAIL114281（pMALTRAIL）和pMALKininogen D560148 TRAIL114281（pMALKT）,重组质粒分别转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达融合蛋白MBPKD5、MBPTRAIL和MBPKT,并经亲和层析纯化。MTT法检测细胞的增殖,管状形成实验检测内皮细胞血管形成,流式细胞仪和电镜检测细胞凋亡。结果：成功构建原核表达载体pMALKD5、pMALTRAIL和pMALKT,并获得纯化的融合蛋白MBPKD5、MBPTRAIL和MBPKT。融合蛋白MBPKT与MBPKD5、MBPTRAIL相比可显著抑制内皮细胞ECV304和胰腺癌细胞SW1990的增殖、明显抑制ECV304细胞体外管腔的形成,同时,MBPKT剂量依赖性地诱导SW1990细胞凋亡。结论：融合蛋白Kininogen D560148 TRAIL114281既能诱导肿瘤细胞凋亡又能抑制血管生成,为进一步开发靶向性抗肿瘤药物奠定了基础     

GLP实验室质量保证人员工作实践的体会与思考

GLP实验室的质量保证(QA)人员对非临床研究工作质量进行监督检查,确保GLP实验室的设施、仪器设备、人员、方法、操作、记录和对照品符合GLP要求,进而起到提高质量、确保安全和讲究效率的作用。文中总结归纳了我国GLP环境下QA人员该如何认清形势,转变观念,明确职责,提升自我,严格检查,保证质量,坚持原则,灵活把握,开展对专题研究和整体设施的核查,保证药物安全性评价的质量,以共同提高QA的核查水平,确保人民用药安全。     

尿微量白蛋白半定量金免疫层析试条的研制和临床评价

目的 建立一种半定量检测人尿液中的微量白蛋白（mAlb）的金免疫层析方法。方法 应用一株抗人白蛋白单克隆抗体与胶体金结合,组成胶体金结合物试剂;白蛋白包被在硝酸纤维素膜上,而制成竞争法的试剂条,同时用一定浓度的羊抗鼠IgG抗体作为参比线。结果 该法经人白蛋白标准液测定,结果判定可分为〈20、20-50、50-200和〉200mg／L4个半定量区段;137例经散射免疫浊度法定量测定白蛋白浓度的临床尿标本用于该法的对比测定,结果符合性良好。结论 该法具有半定量的特点,结果可靠,适用于糖尿病、高血压等并发肾病的早期诊断。方法简便、快速,特别适合中、小医院和门诊部使用。