人甲状旁腺激素基因体外表达的研究

甲状旁腺激素 (ＰＴＨ)是保持体内血钙及磷酸盐自身稳定的主要调节因子[1,2 ] 。甲状旁腺疾病可导致ＰＴＨ分泌不足或生物活性的降低 ,造成低钙血症即甲状旁腺功能低下症(ＨＰＴ)。目前 ,国内外对ＨＰＴ的治疗效果不甚理想[1,2 ] 。近几年我们开展了人胚甲状旁腺细胞移植治疗ＨＰＴ ,取得了较好的效果[3 ] 。但因受供体细胞来源不足的限制 ,此法难以满足临床的需要。基因治疗方法的开展 ,将为ＨＰＴ开辟新的治疗途径。有文献报道 ,重组ＰＴＨ在大肠杆菌中可得到高效表达 ,而ＰＴＨ在体外真核细胞中的表达研究尚少见报道。作者采用自行构建的…     

人胚胰岛冷冻保存的实验研究

移植物来源紧张的问题长期以来困扰着胰岛细胞移植的发展 ,对胰岛细胞进行冷冻保存建立细胞库不但可以解决这一问题而且易于控制移植物的质和量 ,为临床移植提供充足的资源和选择性[1] 。本实验对传统冷冻方法[2 ] 进行改良 ,通过优化的六段降温程序冻存人胚胰岛细胞 ,开创性地将玻璃化超快速降温冷冻法应用于对人胚胰岛细胞的冻存。复温后的人胚胰岛在形态及分泌功能上与冷冻前无显著性差别 ,冷冻效果优良。1　材料与方法　　胎龄 18～ 2 8周之间的中期水囊引产死胎 ,胎儿死亡时间不超过 4ｈ ;胎儿无畸形及传染病 (由哈尔滨市各大医院妇产…     

芹菜籽油对大鼠体外血栓形成及血液黏度的影响

目的 观察芹菜籽油对大鼠体外血栓形成及血液黏度的影响.方法 采用Chandler法形成天鼠体外血栓,测量其长度、湿重、干重,并测定大鼠高切、中切、低切下全血黏度及血浆黏度.结果 与空白对照组比较,芹菜籽油高、中剂量组显著减少血栓长度、湿重、干重,芹菜籽油高剂量组显著降低全血黏度.结论 芹菜籽油具有抑制血栓形成、降低血液黏度的作用.     

表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术在大肠癌及其肝转移患者中肿瘤标记物应用研究

目的 进行大肠癌肝转移肿瘤标志物的早期检测,为大肠癌肝转移患者早期诊断提供依据.方法 应用飞行质谱技术检测53例大肠癌及27例大肠癌肝转移血清蛋白质谱,寻找差异蛋白.结果 大肠癌患者与肝转移患者检测到6个蛋白质M/Z峰值有统计学意义.获得分子量为5641.82 Da、8703.02 Da、6205.51 Da、3377.19 Da、5907.43 Da的5个峰在肝转移患者中表达均低表达,4353.81 Da在肝转移患者中高表达.联合6个M/Z峰区分大肠癌与肝转移的患者的准确率为88.75%(71/80);敏感度为85.19%(23/27);特异度为90.57%(48/53).结论 飞行质谱技术可用于大肠癌与大肠癌肝转移患者的早期预测.     

甲状旁腺细胞与睾丸Sertoli细胞共同移植产生免疫赦免的研究

目的　研究甲状旁腺细胞与睾丸细胞共同移植是否产生免疫赦免。方法　随机将SD大鼠分为以下四组 :1组为单纯甲状旁腺细胞移植组 ;2组为甲状旁腺细胞 1× 10 6个睾丸Sertoli细胞移植组 ;3组为甲状旁腺细胞 2× 10 6个睾丸Sertoli细胞移植组 ;4组为甲状旁腺细胞 4× 10 6个睾丸Sertoli细胞移植组。观察移植物的存活情况 ;体外检测移植物内细胞成分及淋巴细胞凋亡情况。结果　 1组平均存活期为 (17.2 2± 3.6 3)d ;2、3、4组存活时间延长 ,分别为 (19.4 4± 4 .6 4 )d、(32 .2 2± 6 .6 7)d和 (48.80± 3.33)d。 4组在 5 0d观察期内 ,多数鼠的血清钙及甲状旁腺激素 (PTH)值维持在正常范围内 (P <0 .0 1)。移植物内可见表达FasL的睾丸细胞、甲状旁腺细胞及凋亡的淋巴细胞。FasL的表达及凋亡指数随着移植的Sertoli细胞数增加而增加。结论　睾丸Sertoli细胞FasL的表达诱导了浸润的活化淋巴细胞凋亡 ,使共同移植的甲状旁腺细胞存活期延长。     

模拟微重力培养对大鼠胰岛形态及分泌功能的影响

应用电镜、吖啶橙 碘化丙啶双染色法及放免法对正常对照组、普通培养组和微重力培养组的大鼠胰岛细胞进行检测 ,结果提示微重力培养组的胰岛细胞结构更接近于新鲜胰岛 ,且分泌功能优于普通培养组。     

FOLFOX4新辅助化疗方案在老年局限性低位直肠癌中的应用

目的观察FOLFOX4新辅助化疗方案对老年局限性低位直肠癌患者的近、远期疗效及不良反应。方法选取2008年1月一2011年1月收治的老年局限性低位直肠癌患者68例作为研究对象,随机分为观察组与对照组,每组34例。观察组先采用FOLFOX4方案进行新辅助化疗后再行手术治疗,对照组直接进行手术治疗,记录患者化疗反应情况与化疗前后肿瘤进展,对比2组保肛率及术后近远期疗效。结果 规察组新辅助化疗总有效率为61.76%(21/34),化疗后肿瘤分期下降。观察组与对照组手术保肛率分别为93.55%、61.76%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组与对照组术后2年累积生存率(0.605±0.079 vs.0.412±0.084)差异有统计学意义(P<0.05)。观察组出现便秘、腹泻、恶心、呕吐、中性粒细胞减少等不良反应的发生率较高,其中3例(8.82%)不耐受而终止化疗。结论术前采用FOLFOX4方案进行新辅助化疗可以显著改善老年局限性直肠癌肿瘤分期,提高手术保肛率与术后近、远期疗效,值得在临床推广使用。     

提高冻存胚胎胰岛移植效果的实验研究

目的探讨三维组织细胞旋转培养系统(RCCS)对胚胎胰岛冻存复苏后质量的影响。方法将胚胎胰岛平均分为3组,实验组1、2为胚胎胰岛冻存前后分别用RCCS培养和普通培养,对照组新鲜胰岛经RCCS培养。切取胚胎胰腺,胶原酶V消化,纯化。然后进行标准冻存步骤,复苏后继续培养。并检测各组胰岛数量、活性、胰岛素刺激实验结果。结果纯化后收获胰岛最多每个胚胎5012.73IEQ,最少2432.68IEQ,平均(3548.07±273.46)IEQ。微重力培养组胰岛细胞存活率、胰岛素释放量、胰岛素刺激指数等均高于普通培养组。移植经过微重力培养的(2000±1)%IEQ新鲜胚胎胰岛或冻存胚胎胰岛在移植后1周内可达100%纠正糖尿病。结论微重力旋转培养有利于胰岛细胞的生长繁殖,使胰岛具有更好的胰岛素分泌能力,该方法同胰岛冻存相结合,可以进一步提高胰岛的冻存效果,为胰岛库的成功建立探索出一条新的途径。     

微重力培养提高冻存大鼠胰岛移植的效果

目的观察大鼠胰岛冻存后经三维微重力细胞旋转培养系统(RCCS)培养后移植给受者能否明显提高胰岛移植的效果。方法将分离纯化的大鼠胰岛分为3组。实验1组:即将胰岛在RCCS中培养3d后,悬浮于4℃低温保存液(HTS)中,放置30min,然后进行冻存步骤;冻存1个月后进行复苏,继续在RCCS中培养30d;实验2组:新鲜大鼠胰岛在RCCS中培养30d;对照组:大鼠胰岛在冻存前后均在普通培养基中培养,培养步骤和时间同实验1组。上述3组胰岛复苏后再按各组应用的培养体系培养7d,然后分别以2000IEQ冻存或新鲜胰岛移植入糖尿病大鼠体内,并观察10周。结果每个胰腺纯化后最多收获胰岛1058.47IEQ,最少411.88IEQ,平均(826.95±93.42)IEQ。实验1组、实验2组的胰岛收获率、细胞内胰岛素和DNA含量以及胰岛素刺激指数均高于对照组(P<0.05);实验2组和实验1组的2000IEQ新鲜胰岛或冻存胰岛在移植后1周内可100%纠正糖尿病。结论大鼠胰岛冻存前后经微重力培养后移植可以明显提高1型糖尿病大鼠的治疗效果。