UPLC-UV-MS法应用于胃肠安丸中11个活性成分的定性与定量分析

目的:建立超高效液相色谱-紫外-串联质谱法应用于胃肠安丸中11个活性成分(川芎嗪、阿魏酸、柚皮苷、橙皮苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、和厚朴酚、厚朴酚、大黄酚、大黄素甲醚)的定性、定量分析方法。方法:采用ACQUITY UPLCBEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0～7.5 min,90%A→25%A),流速0.3 mL.min-1,DAD波长切换检测模式[0～1.92 min,320 nm(川芎嗪、阿魏酸);1.93～3.00 min,283 nm(柚皮苷、橙皮苷);3.01～5.50 min,254 nm(芦荟大黄素、大黄酸);5.51～6.26 min,294 nm(大黄素、和厚朴酚);6.27～7.50 min,254 nm(厚朴酚、大黄酚、大黄素甲醚)],柱温40℃,进样量2μL;Waters Quattro Premier XE质谱仪,正/负离子检测模式。结果:各成分在7.5 min内分离良好,通过与对照品的保留时间(tR)和质谱信息的对比,确定了胃肠安丸中的11个活性成分;它们在相应的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均>0.9977;加样回收率(n=5)为96.6%～107.2%,RSD均小于3.0%。批内精密度RSD均小于1.0%,批间精密度RSD均小于3.5%。结论:本方法简便、快速、准确,精密度高,重复性好,适用于胃肠安丸中多种活性成分的快速定性、定量分析。     

基于p-Akt/p-GSK3β/GSK3β通路灵芝多糖对糖尿病大鼠心肌重构及保护作用研究

目的 探讨灵芝多糖（GLP）通过磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶（p-Akt）/磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK3β)/糖原合成酶激酶-3β(GSK3β)通路对糖尿病大鼠心肌重构的影响。方法 于2020年12月至2021年12月，将90只SPF级雄性SD大鼠，按照随机数字表法分为对照组、模型组、GLP低、中、高剂量组，各18只。模型组和GLP各剂量组采用高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素（STZ）溶液（30 mg/kg）诱导糖尿病大鼠模型，各组取建模成功的15只大鼠用于实验。GLP低、中、高剂量组均按照10 mL/kg体质量，灌胃浓度25、50、100 mg/kg GLP生理盐水溶液，对照组和模型组给予等体积生理盐水，每天1次，连续4周。比较各组大鼠血糖、体质量、左心室指数、心肌纤维化水平、心肌细胞凋亡水平、心肌组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平以及p-Akt、丝氨酸/苏氨酸激酶（Akt）、p-GSK3β、GSK3β蛋白表达水平差异。结果 与对照组的血糖（4.45±0.38）mmol/L、左心室指数2...     

ssrA标签及其变体在细菌蛋白质降解中的研究与应用进展

在原核生物的基因表达过程中，核裂解或转录错误等事件的存在往往使转录所得mRNA截短，即3′端缺少终止密码子。因此以截短型mRNA为模板的翻译过程会使核糖体停滞于3′端，这种mRNA缺少3′终止密码子导致核糖体停滞的突变被称为No-Go突变。为使核糖体循环顺利进行，兼具tRNA和mRNA功能的tmRNA将被募集发生在停滞的3′端，为停滞的新生多肽C端加载被称为ssrA标签的短肽标记并以自带的终止密码子终止肽链合成，释放核糖体。ssrA标签作为Degron(降解决定子)会引导多肽降解，以确保维持细胞的蛋白稳定与合成能力。由于ssrA标签具有靶向蛋白降解的能力，因此该标签在生物工程领域得到了广泛的开发和应用。文章总结了ssrA标签的种类，介导蛋白降解的机制和突变体，展望了ssrA标签在生物工程中的应用前景，以期为进一步开发靶向蛋白降解系统提供参考。