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101.
102.
背景:兔B型滑膜细胞在转化生长因子的作用下,具有向软骨细胞分化的潜力,形成的细胞在体外可保持软骨细胞的表型,但转染后的细胞能否与支架材料一起形成软骨组织尚没有深入的研究.目的:以脂质体法转染兔B型滑膜细胞,将转染后细胞复合Pluronic-F127在裸鼠体内构建组织工程软骨,观察转染后细胞体内向软骨组织方向分化的可行性.设计、时间及地点:细胞学试验,随机分组动物实验,于2007-04/2008-05在中山大学附属第二医院医学研究中心完成.材料:3月龄健康新西兰大白兔,雌雄不限,4周龄体质量为20 g左右的BALB/c裸鼠共12只,雌雄不限.方法:取新西兰大白兔膝关节腔内面的滑膜组织,以酶消化法进行分离培养、纯化、传代,以脂质体法进行转染,以G418筛选阳克隆,同时检测转化生长因子β1、Ⅱ型胶原的表达;4℃将Pluronic-F127溶解,配成质量分数为30%液体,然后与转染后稳定表达的细胞进行混合,同时取软骨细胞混合Pluronic-F127、空载体转染细胞混合Pluronic-F127作为对照组,各组细胞浓度均为5×1010L-1的复合物,迅速以0.2mL注射器行裸鼠背部皮下注射,分别在术后4,6,8周处死实验裸鼠,取出裸鼠背部组织进行观察.主要观察指标:细胞生长曲线、转染后细胞表型变化观察、裸鼠皮下组织块组织学观察.结果:生长曲线显示B型滑膜细胞在脂质体法转染后生长活性降低,至转染后6,7d,细胞基本恢复正常的增殖能力,转染后第4天,滑膜细胞转化生长因子β1表达阳性,转染后第7天,滑膜细胞胞浆内抗Ⅱ型胶原染色为阳性,PluronicF-127与B型滑膜细胞混合后在裸鼠皮下4周形成不成熟的软骨样组织,8周形成成熟的软骨样组织,抗Ⅱ型胶原染色为阳性.结论:转染转化生长因子β1基因的B型滑膜细胞在体外可以表达软骨细胞的表型,形成软骨样细胞,而在裸鼠体内复合Pluronic F-127可保持软骨细胞表型,形成软骨样组织. 相似文献
103.
104.
目的 研究生长抑制因子5(ING5)基因对人乳腺癌细胞Bcap-37增殖、凋亡、迁移和细胞周期的影响.方法 稳定转染pEGFP-N1-ING5真核表达载体和pEGFP-N1空载体至Bcap-37细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR方法筛选ING5高表达细胞株.将Bcap-37-ING5细胞作为实验组,Bcap-37-GFP细胞为空载体组,Bcap-37为空白对照组.采用MTT法检测ING5对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况;细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移情况.结果 稳定转染后获得稳定表达GFP标记的ING5蛋白的Bcap-37细胞株.ING5过表达可以抑制乳腺癌Bcap-37细胞增殖并导致G2期阻滞,诱导细胞凋亡,抑制细胞迁移(P<0.05).结论 ING5过表达可逆转乳腺癌Bcap-37细胞的恶性表型,可作为乳腺癌预后判断和基因治疗的分子靶标. 相似文献
105.
目的探讨全膝关节置换术后应用局部间断冰敷治疗的临床效果。方法选取2012年11月至2016年11月行全膝关节置换术的患者51例(51膝),其中,术后应用局部间断冰敷治疗(冰敷组)29例,常规治疗(常规组)22例。观察并比较两组患者术后第1、2、3天的膝关节术前术后髌骨中点周径差、视觉模拟疼痛评分(VAS)及总引流量。结果术后第2、3天冰敷组膝关节术前术后髌骨中点周径差明显小于常规组(P<0.05),术后第1、2、3天冰敷组VAS明显低于常规组(P<0.05),术后冰敷组总引流量明显少于常规组(P<0.05)。结论全膝关节置换术后应用局部间断冰敷治疗可明显促进患肢局部消肿,缓解术区疼痛,减少术后出血。 相似文献
106.
目的 研发一种基于膝关节协会评分(knee society score, KSS)的远程自助-互助式功能评估系统,并验证其对膝关节置换(total knee arthroplasty,TKA)术后患者的有效性。 方法 选取 10 名接受 TKA 手术患者,利用功能评估系统记录其术前以及术后当天(0 d)、4 d 和 30 d 的功能情况。 系统自动计算患者的数据,包括 KSS 得分、屈曲总范围、屈曲挛缩、伸直迟滞、膝关节对线、疼痛和膝关节稳定性。 结果 比较医生凭借经验进行人工 KSS 评分结果与系统评估的 KSS 评分结果发现,二者评分差异无统计学意义,存在一致性。 结论 远程自助-互助式功能评估系统所采集的 KSS 分数与临床医生测评结果一致,该系统为 TKA 术后患者居家评估和远程术后康复指导提供了一种可靠、便捷的方法。 相似文献
107.
目的 探讨手法松解联合关节腔注射对前交叉韧带(ACL)重建术后关节僵硬患者关节功能的影响。方法 回顾分析我院ACL重建术后关节僵硬性手法松解患者59例,根据是否行关节腔注射分成观察组和对照组,其中对照组27例,观察组32例。对照组患者行手法松解,观察组患者先行关节腔内注射,再行手法松解。记录两组患者治疗前和治疗后2周、4周、8周主动关节活动度(ROM)、活动时疼痛视觉模拟评分(VAS)、Lysholm膝关节评分和国际膝关节文献委员会(IKDC)膝关节评分,同时记录治疗时患者疼痛VAS评分。结果 观察组患者治疗后2周、4周和8周ROM、Lysholm评分和IKDC评分均显著高于对照组患者(P<0.05)。观察组患者治疗时、治疗后2 w、4 w和8 w患膝疼痛VAS评分均显著低于对照组患者(P<0.05)。结论 手法松解联合关节腔注射可减轻ACL重建术后关节僵硬患者疼痛,增加膝关节活动度,改善膝关节功能。 相似文献
108.
目的对原料乳中三聚氰胺检测的液质确证方法与快速筛选方法进行比对验证。方法 SNAP双流向酶联免疫法快速检测还原乳中的三聚氰胺。结果其最低检出限达到0.10 mg/kg,还原乳中三聚氰胺浓度与SNAP读数仪读数呈显著正相关(r2=0.986)。同时通过对原料乳中β-内酰胺酶加标试样的比对快速筛选方法与微生物法(杯碟法)完全相符,且二者最低检出限均可达到0.000 25 IU/mL。结论双流向酶联免疫法可以用于原料乳中非法添加的三聚氰胺和β-内酰胺酶的快速筛选,其检测速度和灵敏度均能满足奶户、奶站、乳品厂和部分实验室的快速筛选检测,但是其使用目前还仅限于原料乳或原料乳粉。 相似文献
109.
目的 探讨带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的重组腺病毒载体介导的凋亡素(VP3)基因对人胃癌细胞的致凋亡作用.方法 在HEK293细胞中包装Ad-EGFP-VP3和Ad-EGFP两种腺病毒,大量扩增,并测定两种腺病毒滴度.以MOI=20感染人胃癌细胞,12,24,48 h后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;用Hoechst33258试剂盒染色,观察凋亡形态学改变.24 h后用RT-PCR检测VP3基因的表达.6,12,24,48,72 h后用FCM检测胃癌细胞的凋亡率.结果 Ad-EGFP-VP3滴度为2.4×108 pfu/ml,Ad-EGFP滴度为2.1×108pfu/ml.Hoechst33528染色显示Ad-EGFP-VP3感染的胃癌细胞出现凋亡形态学改变.RT-PCR检测仅有Ad-EGFP-VP3感染的胃癌细胞表达VP3基因的mRNA.FCM检测Ad-EGFP-VP3感染人胃癌细胞12 h后凋亡率达51.7%.结论带有EGFP标记的重组腺病毒载体介导VP3基因导入胃癌细胞后,能有效诱导胃癌细胞凋亡. 相似文献
110.
目的:研究TMEM119 在正常及乳腺良恶性肿瘤组织中的表达差异,探讨其在乳腺上皮肿瘤鉴别诊断及恶性肿瘤中的临床及预后价值。方法:利用cBioPortal下载TCGA乳腺癌基因表达谱资料及临床相关资料。免疫组化分析 TMEM119在肿瘤组织及正常组织中的表达差异;进一步探讨TMEM119 的表达差异与乳腺癌患者临床病理特征的相关性及其对预后的影响。结果:乳腺癌组织中的TMEM119表达明显高于配对的正常组织及良性肿瘤(P<0.01),TMEM119 表达与肿瘤组织的淋巴结转移、远处转移、病理分期及预后相关(P<0.05)。结论:TMEM119可为良恶性肿瘤鉴别诊断、预测乳腺癌转移及判断预后的有效分子标记物,是影响患者预后的不良因素之一。 相似文献