人α1微球蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

目的构建人α1微球蛋白（α1-MG）基因的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达、纯化,为制备仅。一MG诊断试剂中原料抗体、标准品及质控品奠定基础。方法从人胚胎肝脏中提取总RNA,利用反转录聚合酶链反应技术扩增α1-MG基因。然后克隆至PQE30表达载体,转化大肠杆菌M15中进行表达,并经镍固定金属亲和层析进行纯化,蛋白质印迹进行免疫学鉴定。结果获得了与Genebank报道一致的仪。一MG基因片段,成功构建了成熟人α1-MG的原核表达载体PQE30-α1-MG,质粒转化大肠杆菌并经1mmol／L异丙基硫代半乳糖诱导5h后,可表达相对分子质量约25000的外源蛋白,表达的α1-MG大部分在包涵体中,并可经镍固定金属亲和层析纯化,纯化有效率95％以上,BCA法测定纯化的α1-MG蛋白含量为25mg／L。蛋白质印迹表明,该蛋白可与抗人仅．一MG天然抗体反应。结论通过基因工程方法可获得高效表达的重组α1-MG蛋白,该蛋白具备同天然仅。一MG相同的生物学特性,为下一步进行α1-MG相关研究及应用奠定基础。     

杏仁不同配伍条件下苦杏仁苷形态和定量分析

目的：配伍是中医用药的主要形式,其目的在于增效减毒。苦杏仁苷是中药杏仁的毒性（药效）成分且在煎剂中会发生差向异构。鉴于药物手性会产生不同的活性和毒性,该文针对杏仁类药对配伍对苦杏仁苷存在形态的影响进行了研究,以期揭示其配伍的科学内涵。方法：选取杏仁为主药,杏仁类药对为载体,采用HPLC-DAD法对水煎剂中L-苦杏仁苷、D-苦杏仁苷的含量变化及相对转化趋势进行定量分析。结果：配伍明显影响其有毒-有效成分苦杏仁苷的异构化进程;异构化（L-型/D-型）系数与配伍环境密切相关。结论：碱性是异构化的重要化学因素,符合相关化学反应原理,该研究为进一步揭示杏仁配伍的科学性提供了一个例证。     

李淑萍治疗卵巢储备功能下降的经验

李淑萍教授从中医角度出发,认为卵巢储备功能下降发病与脾胃密切相关,提出从"脾"论治的理论。她认为,月经生理紧系冲任,调于脾胃;月经失调病起脾胃,连及冲任;女性衰老始自阳明,发于心脾;治疗重护脾胃,顾养气血。     

类泛素蛋白FAT10在食管癌中的表达及生物学作用

目的:探讨类泛素蛋白FAT10的异常表达在食管癌（esophageal carcinoma,ECA）进展中的作用机制。方法:采用RT-PCR和Western blot法检测FAT10在30例ECA标本中的mRNA和蛋白表达水平。siRNA技术干扰食管癌细胞ECA-109中FAT10表达后,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测ECA-109细胞周期和细胞凋亡的变化,Western blot检测Akt/GSK3β信号通路的变化。结果:RT-PCR和Western blot结果显示,FAT10在食管癌组织中的表达水平较癌旁组织显著上调（P<0.05）。siRNA技术干扰ECA-109细胞中FAT10表达后,ECA-109细胞生长速度明显下降（P<0.05）。流式细胞术结果显示FAT10 siRNA干扰ECA-109细胞48h时,对细胞周期分布无明显影响（P>0.05）。但FAT10表达下调有促凋亡作用,与对照组相比,干扰组的细胞凋亡率显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）。Western blot检测到ECA-109细胞中Akt和GSK3β的磷酸化水平都明显下降。结论:FAT10基因在食管癌组织中表达上调,下调FAT10的表达能够抑制食管癌进展,机制可能是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现的。     

血府逐瘀汤化裁治疗玻璃体积血验案1则

玻璃体积血是眼科常见病、多发病,也是难治病之一,能引起视力下降甚至失明.本病主要因内眼血管性疾患和损伤引起,也可由玻璃体后脱离、视网膜裂孔以及全身性疾患引起[1].西医目前尚无特效治疗药物,主要以玻璃体切除手术治疗为主,但存在一定风险,且可能引起严重的并发症.中医学认为,玻璃体积血是血不循经,血溢络外,滞于神膏所致,离...     

针刺“痔点”、头顶部反应点配合隔药灸脐法治疗痔疮27例

痔疮是直肠下端的肛垫出现病理性肥大的表现,发病率较高,主要表现为肛周疼痛、坠胀、便血,甚则脱肛。笔者采用针刺“痔点”、头顶部反应点配合隔药灸脐法治疗痔疮27例,现报道如下.     

手术治疗内镜取石失败后食管结石病例报告及文献复习

目的探讨巨大食管结石的临床特点及治疗策略。方法回顾性分析首都医科大学附属北京友谊医院收治的1例内镜取石治疗失败后行开胸手术取石的食管结石患者的病例资料, 并结合相关文献资料进行分析总结。结果该患者吞咽困难症状明显, 严重营养不良, 需进一步医疗干预。CT检查发现, 食管下段巨大结石嵌顿, 胃镜检查可见结石阻塞管腔, 结石下方食管息肉及肌桥形成, 因结石巨大且坚硬, 多次内镜下取石失败, 后经由胸外科行开胸手术成功取出结石。患者术后恢复良好, 无吻合口漏及狭窄等并发症。结论食管结石形成后易引起食管梗阻, 严重者甚至导致穿孔, 因此临床上应积极处理。对于多次内镜取石失败的食管结石患者, 开胸手术取石可作为进一步的治疗方法之一。     

高效液相色谱法测定肾移植病人泼尼松龙、伏立康唑及其氮氧化物浓度

目的建立快速、灵敏的高效液相色谱法测定病人血浆泼尼松龙、伏立康唑及其代谢物伏立康唑氮氧化物的浓度。方法色谱柱为安捷伦 ZORBAX Eclipse XDB C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈∶水(27∶73～60∶40)梯度洗脱;流速为 1.0 mL/min;波长为 244 nm;柱温为 30 ℃。收集 2019年 9月至 2020年 3月在安徽医科大学第一附属医院接受伏立康唑治疗的肾移植病人 24例,检测 24例肾移植病人血药浓度,男 14例、女 10例。结果泼尼松龙、伏立康唑及其氮氧化物色谱峰分离良好。泼尼松龙在 3.13～100.00 μg/L范围内线性关系良好, r=0.993 1;伏立康唑在 0.16～20.00 mg/L范围内线性关系良好, r=0.999 8;伏立康唑氮氧化物在 0.16～10.00 mg/L范围内线性关系良好, r=0.997 3。三种化合物日内及日间 RSD在 1.93%～6.74%,绝对回收率在     

超高剂量率照射后水分子的辐射化学效应研究

目的 对比分析超高剂量率(FLASH)照射和常规剂量率照射后水分子电离的辐射化学效应。方法 以超纯水为研究对象,分别实施常规照射和FLASH照射,采用电子顺磁共振法检测均相阶段的羟基自由基生成量,荧光探针法分析扩散期过氧化氢(H₂O₂)产量。构建脂质体常规照射和FLASH照射模型,分析水分子辐射化学效应诱发脂质过氧化情况。结果 照射可诱导水分子电离发生化学反应。其中,均相阶段,FLASH照射产生羟基自由基的水平与常规照射无明显差异(P>0.05)。扩散期,FLASH照射产生H₂O₂的水平明显低于常规照射(t=0.49~12.81,P<0.05)。构建脂质体模型证实,常规照射通过水分子辐射化学效应诱导脂质氧化应激较FLASH照射显著(t=0.31~11.73,P<0.05)。结论 FLASH照射后水分子的辐射化学效应明显弱于常规照射,这可能是FLASH效应的机制之一。