牛膝多糖诱导单核细胞HLA-DRαmRNA表达的实验研究

目的：研究单核细胞的分离培养并检测牛膝多糖(ABPS)诱导单核细胞HLA-DRαmRNA的表达变化。方法：采集健康成人的血液,肝素抗凝,用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,用贴壁法分离单核细胞．接种细胞到24孔板,同一时间不同ABPS浓度或同一浓度ABPS不同时间37℃、5％CO2培养．RTPCR检测HLA-DRαmRNA表达水平并且进行PCR产物验证。结果：(1)鉴定单核细胞：在PBMC中,流式细胞术检测到CDl4阳性细胞占12.0％,黏附得到的单核细胞中,流式细胞术检测到CD14阳性细胞占83.1％．(2)同一时间不同浓度ABPS上调HLA-DRαmRNA表达。(3)不同时间同一浓度ABPS上调HLA-DRαmRNA表达。(4)引物序列和产物序列分别进行BLAS7表明PCR产物为NM_019111。结论：在体外,ABPS上调单核细胞HLA-DRαmRNA,有显着的剂量和时间效应关系．提示ABPS能激活单核细胞并有增强免疫功能。     

下肢慢性静脉功能不全伴脂质硬皮症的手术治疗

目的：探讨手术治疗下肢慢性静脉功能不全（chronic venous insufficiency,CVI）伴脂质硬皮症（lipodermatosclerosis,LDS）的疗效。方法：对36例CVI伴LDS患者行大、小隐静脉高位结扎术联合点式浅静脉分段抽剥术和交通静脉结扎术。采用临床严重程度评分（venous clinical severity score,VCSS）、生活质量量表（chronic venous insufficiency questionnaire,CIVIQ）对其进行术前评估和术后随访,并测量LDS皮下硬结厚度。采用配对t检验比较患者手术前后VCSS、CIVIQ评分和LDS皮下硬结厚度。结果：36例患者均得到随访,随访率100%;随访期为6~12个月,平均8.2个月。36例患者术后CEAP分级均明显改善;VCSS评分均值术前为8.14分,术后为0.56分,手术前后差异有统计学意义（P〈0.01）;CIVIQ评分均值术前为84.0分,术后为98.2分,手术前后差异有统计学意义（P〈0.01）;LDS皮下硬结厚度均值术前为1.27 cm,术后为0.03 cm,手术前后差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：采用大、小隐静脉高位结扎术联合点式浅静脉分段抽剥术和交通静脉结扎术治疗CVI伴LDS的患者,可明显改善LDS,促进溃疡愈合,提高患者的生活质量。     

循环肿瘤细胞的富集与检测研究进展

肿瘤的复发和转移是导致死亡的主要原因。循环肿瘤细胞(CTCs)与肿瘤的转移密切相关。 CTCs因其表面分子的多样性可为临床诊断、预后和个性化治疗提供丰富的信息。CTCs富集方法极 为重要,其表面分子的检测以及临床应用都受到富集方法的制约。目前,CTCs富集检测方法日新月 异,本文针对CTCs富集检测方法作一综述。     

DNA病毒介导肿瘤发生的表观遗传机制

许多病毒感染可导致肿瘤发生,这些病毒虽隶属于不同种属,但其进化出的分子干扰机制却有共通之处,即靶向调控与细胞生长和增殖相关的关键蛋白。病毒和宿主之间的相互作用也发生于表观遗传水平。本文对DNA病毒导致癌症发生的表观遗传机制进行综述。     

不同模式血液净化技术治疗肝功能衰竭的疗效观察

目的 探讨不同模式血液净化技术对肝功能衰竭患者疗效的评价.方法 选取华中科技大学同济医学院附属同济医院接受血液净化治疗的肝功能衰竭患者,包括血浆置换(plas-ma exchange,PE)、PE+胆红素吸附及PE+双重血浆分子吸附(double plasma molecular adsorp-tion system,...     

酶循环法检测及其进展

1961年Lowry OH等应用两种工具酶建立循环酶测定方法。即6-磷酸葡萄糖脱氢酶、谷氨酸脱氢酶的催化特性及酶偶联反应的原理，使反应体系中NADP^ ←→NADPH循环变化，对循环中生成大量的6-磷酸葡萄糖酸，用指示酶6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶催化，检测终产物NADPH，从而提高检出能力。ChiMMY等改进Lowry OH酶循环法，即酶双循环法。其操作方法包括待测样品酶循环、工具酶灭活、加入指示酶双循环及对终产物检测。本文对酶循环动力学研究、临床生化检验及环境监测中的应用作一介绍。     

硅纳米线生物传感器在疾病诊断中的应用

<正>临床检验诊断学的发展日新月异,新技术、新方法不断出现,极大提升了实验室的检验能力,也为临床诊断提供越来越重要的帮助。在低浓度生物分子检测方面,现有检测方法以标记式检测技术为主,如酶联免疫吸附法、荧光免疫分析法、放射免疫检测法和化学发光免疫分析法等,它们通过标记于抗原或抗体上的酶、荧光素、同位素或化学发光剂产生的信号来指示检测分子的含量,具有灵敏度高,特异性好的优势,但也存在一些不足之处:(1)标记过程繁琐、耗时,标记技术会造成检测时     

酶双循环法测定一氧化氮合酶活性实验条件探讨

目的运用W ang法与酶双循环法联合测定血清中一氧化氮合酶(NOS)活性。方法先改良W ang法测定NOS活性的实验条件,再探讨W ang法与酶双循环法偶联的实验条件,比较酶双循环前后检测物性质。结果总NOS(tNOS)测定试剂由20 mmol/L L-精氨酸、25μmol/L还原型辅酶Ⅱ(NADPH H )、50.0μmol/LCaC l2、45.0μmol/L二硫苏糖醇(DTT)、36.0μmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)、1.8μmol/L苯甲磺酰氯(PMSF)、80μmol/L尼克酰胺、1μg/m l钙调蛋白(CalM)和10μg/m l蛋白酶抑制剂Antipain组成。以上试剂添加诱导性NOS(iNOS)抑制剂NW-硝基-D-精氨酸用于测定结构型NOS(cNOS)。对NOS生成的氧化型辅酶Ⅱ(NADP )采用酶双循环产物6-磷酸葡萄糖酸(6PG)脱氢生成的大量NADPH H ,其放大倍数约为70~80倍。结论酶双循环法提高了测定NOS的灵敏度。     

1,5-脱水葡萄糖醇的测定与应用

1 ,5 脱水葡萄糖醇 (1,5 ａｎｈｙｄｒｏｇｌｕｃｉｔｏｌ,1,5 ＡＧ) ,又叫 2 脱氧葡萄糖 ,1,5 脱水山梨醇。 1975年Ｓｅｒｖｏ〔1〕在脑脊液及血清中观察 1,5 ＡＧ与糖尿病之间具有相关性。 1994年Ｆｕｋｕｍｕｒａ等〔2〕介绍全酶法测定体液中 1,5 ＡＧ含量。本研究探讨在临床常规中开展全酶法的实验条件 ,观察糖尿病患者和糖尿病动物模型血清中 1,5 ＡＧ与葡萄糖水平变化之间的相关性。一、材料和方法1.材料 :葡萄糖激酶 (ＧＫ) ,己糖激酶 (ＨＫ) ,丙酮酸激酶(ＰＫ) ,维生素Ｃ氧化酶 ,磷酸烯醇式丙酮酸 (ＰＥＰ) ,1,5 ＡＧ均购…     

雷米普利治疗高血压病效果观察

2003年2月～2004年6月,我们采用雷米普利(Ram)治疗轻、中度高血压病患者50例,效果较好。现报告如下。临床资料:本文98例患者均符合WHO制定的高血压病诊断标准。年龄36～72岁。收缩压21.3～29.3kPa和(或)舒张压12.7～14.0kPa,病程(8.6±2.3)年。随机分为治疗组50例和对照组48例,两组临床资料具有可比性。方法:所有患者先服安慰剂2周,治疗前停用各种对血压有影响的药物3日,检查记录血压、眼底、心电图、胸片及血尿常规、肝肾功能、血糖、血脂检测,并做彩色多普勒超声心动图检查。治疗组口服Ram2.5mg/d,2周后血压下降达有效水平则以原剂量维…