组织因子途经抑制物2基因在胰腺癌中的表达及对胰腺癌患者预后的影响

目的 研究组织因子途径抑制物2(TFPI-2)基因在胰腺癌中的表达,探讨其对胰腺癌患者预后的影响.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot技术,检测41例胰腺癌组织中TFPI-2 mRNA和蛋白的表达,分析其与胰腺癌临床病理特征的关系及对胰腺癌患者预后的影响.结果 TFPI-2 mRNA和蛋白在中低分化、有神经侵犯、有淋巴转移、有血管浸润、分期晚的胰腺癌组织中的表达水平均明显低于高分化、无神经侵犯、无淋巴转移、无血管浸润、分期早的胰腺癌组织(均P＜0.05).TFPI-2高表达组患者的术后中位生存期(12.0个月)明显长于TFPI-2低表达组(5.1个月,P＜0.05).Cox模型分析显示,TFPI-2的表达水平可作为影响胰腺癌患者预后的独立因素.结论 TFPl-2在胰腺癌中的表达与其临床分期及分化程度有关,可作为判断胰腺癌患者预后的因素.     

TFPI-2基因克隆及其在胰腺癌细胞中的表达

目的克隆人TFPI-2基因全长cDNA,构建其真核表达载体,并将其转染到人胰腺癌细胞Panc-1中,检测其表达。方法用RT-PCR法从人胎盘组织中扩增人TFPI-2基因,并将其与真核表达载体pEGFP-C1连接,构建真核表达载体pEGFP-C1-TFPI-2。将构建的重组载体转染到人胰腺癌细胞系Panc-1细胞,Westernblot检测TFPI-2在Pane-1细胞中的表达。结果RT-PCR成功的扩增出一条约708bp的片断,扩增片断与载体连接后,经限制性内切酶酶切电泳分析和DNA序列测定证实该基因已经成功构建到载体上,转染Panc-1细胞后,荧光显微镜观察到稳定转染细胞发出较强绿色荧光,Westernblot技术证明TFPI-2基因能在Panc-1细胞中稳定表达。结论成功构建了人TFPI-2基因的真核表达载体pEGFP-C1-TFPI-2,获得了稳定表达TFPI-2的Panc-1细胞,证实TFPI-2基因能够在人胰腺癌细胞系Panc-1中高效、稳定的表达,为进一步研究其胰腺癌迁移、浸润及转移中的作用打下基础。     

组织因子途径抑制物-2对胰腺癌细胞增殖的影响

目的：检测人胰腺癌组织中组织因子途径抑制物-2（TFPI-2）基因的表达,探讨其对胰腺癌细胞增殖的影响.方法：采用免疫组织化学方法检测43例胰腺癌及9例正常胰腺组织中TFPI-2及Ki-67蛋白的表达.结果：胰腺癌中TFPI-2的表达低于正常胰腺组织,其表达水平与胰腺癌临床分期及转移有关, 于Ⅰ、Ⅱ期及无转移的胰腺癌组织中的表达高于Ⅲ、Ⅳ期及有转移的胰腺癌组织（P＜0.05）.其表达水平与胰腺癌细胞增殖活性呈负相关（rs=- 0.339,P＜0.05）.结论：TFPI-2基因在胰腺癌中呈低表达,能抑制肿瘤细胞的增殖,可能参与了胰腺癌细胞周期的调控.     

TFPI-2基因在调控胰腺癌细胞凋亡中的作用

背景与目的：组织因子途径抑制物2（tissue factor pathway inhibitor 2,TFPI-2）是新近发现的一种丝氨酸蛋白酶抑制物,与多种肿瘤发生发展有关。本实验研究将外源性TFPI-2基因转入对胰腺癌细胞株Panc-1观察TFPI-2对该细胞细胞增殖及凋亡的影响。方法：TFPI-2基因真核表达载体、空载体分别转染Panc-1细胞,并命名为Panc-1-TFPI-2,Panc-1-V细胞与未转染的对照细胞Panc-1分别测定细胞生长曲线,DNA片段化实验检测细胞凋亡,并用流式细胞仪分析3组细胞的细胞增殖、细胞周期情况。结果：Panc-1-TFPI-2细胞同Panc-1-V和Panc-1细胞相比,细胞生长缓慢,细胞生长受到抑制,被阻滞于G0-G1期;DNA片段化实验显示Panc-1-TFPI-2细胞呈现凋亡细胞特有的“梯状”条带,而Panc-1-V和Panc-1细胞无明显“梯状”条带;流式细胞仪分析显示早期Panc-1-TFPI-2细胞凋亡率（6.9±0.5）%较Panc-1-V和Panc-1细胞凋亡率[（3.0±0.4）%,（3.5±0.4）%]增加（P〈0.05）,统计学差异有显著性。结论：外源性TFPI-2基因能够抑制胰腺癌细胞生长、诱导胰腺癌细胞凋亡,可能具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。     

组织因子途径抑制物2基因真核表达载体的构建及鉴定

目的:构建人组织因子途径抑制物2(tissuefactorpathwayinhibitor2,TFPI-2)基因的真核表达载体pEGFP-C1-TFPI-2,并对其进行酶切鉴定。方法:实验于2006-09/12在安徽省立医院中心实验室完成。实验方法:①从人胎盘组织中提取总RNA,反转录合成cDNA,以特异性引物扩增TFPI-2基因全长mRNA。②扩增产物回收纯化后用限制性内切酶酶切,与经同样处理的载体pEGFP-C1进行连接反应,连接产物转化感受态大肠杆菌DH5α。③碱变性法提取质粒进行限制性内切酶酶切分析,并进行DNA序列测定。结果:①成功克隆了708bp的TFPI-2基因片段。②构建了人TFPI-2基因的真核表达载体pEGFP-C1-TFPI-2,经限制性内切酶酶切,电泳分析后得到了大小分别为708bp的目的基因片段和4.6kb的载体片段,测序结果与TFPI-2mRNA的cDNA序列吻合。结论:通过基因重组技术,构建了稳定表达TFPI-2的人TFPI-2的真核表达载体pEGFP-C1-TFPI-2。     

新型冠状病毒肺炎并发急性阑尾炎一例的手术治疗与围手术期管理

目的探讨新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)合并急性阑尾炎围手术期医护人员安全防护及患者的安全管理。方法对2020-02该院收治的1例COVID-19合并急性阑尾炎患者救治过程中的手术方案,术中及术后的医护人员防护及患者管理进行总结。结果患者接受开放性阑尾切除手术治疗,术后恢复良好。所有医护人员均无发生COVID-19。结论在做好防护的前提下,对COVID-19合并急性阑尾炎患者可实行开放性手术治疗,这对医务人员和患者都是安全的。     

胫前静脉入路导管接触性溶栓治疗急性下肢深静脉血栓形成的临床疗效观察

［摘要］　目的　观察胫前静脉入路导管接触性溶栓（CDT）治疗急性下肢深静脉血栓形成（DVT）的临床疗效。方法　选择阜阳市第二人民医院2019年1月至2020年3月拟行胫前静脉入路CDT治疗急性下肢DVT患者43例（发病在1周以内）。比较患者治疗前后健患侧下肢周径差。观察患者治疗后并发症发生情况及临床疗效。结果　经胫前静脉入路置管成功39例（90.70%）。患者术后穿刺部位无出血并发症发生，轻度疼痛5例，麻木不适3例。32例术后随访时间3～12个月，随访期间症状消失，无血栓复发及肺栓塞发生。治疗后，患者健患侧下肢周径差显著减小（P<0.05）；静脉通畅评分为(3.29±0.91)分，较治疗前的(8.47±1.09)分下降，差异有统计学意义（t=19.475，P=0.000）；平均静脉通畅率为（57.24±11.57）%；瓣膜保存率达84.38%（27/32）。结论　胫前静脉入路CDT治疗急性下肢DVT临床疗效好，手术并发症少，值得临床推广应用。     

TFPI-2基因与消化道肿瘤关系的研究进展

组织因子途径抑制物2（tissue factor pathway inhibitor2，TFPI-2）是一种广谱的丝氨酸蛋白酶抑制物，可抑制包括纤溶酶、胰蛋白酶、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）在内的多种蛋白酶，而MMPs参与了细胞外基质的重塑，在肿瘤细胞的浸润和转移、伤口愈合、血管新生、纤维蛋白溶解及动脉粥样硬化等生理和病理过程中发挥重要作用。TFPI-2可通过维持细胞外基质的完整、调节肿瘤血管生成、调控肿瘤细胞细胞凋亡及血液凝固等机制调节胰腺癌、食管癌及胃癌等消化道肿瘤细胞的侵袭转移。越来越多的研究表明，TFPI-2能明显抑制肿瘤中MMPs的活性与功能等从而抑制肿瘤的侵袭与转移，并成为肿瘤基因治疗的新靶点。     

千金子制霜前后提取物对肠道酶影响

目的 :研究千金子生品和霜品对大鼠小肠黏膜中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)和乳糖酶3种消化酶作用的差异。方法 :将56只Wistar大鼠随机分成空白对照组、生品高剂量组(23.3529 g·kg~(-1))、生品中剂量组(11.6764 g·kg~(-1))、生品低剂量组(5.8382 g·kg~(-1))、霜品高剂量组(23.3529 g·kg~(-1))、霜品中剂量组(11.6764 g·kg~(-1))、霜品低剂量组(5.8382 g·kg~(-1)),每组8只。对照组给予生理盐水,其余6个给药组分别灌胃千金子制霜前后提取物高、中、低剂量的混悬液,每天给药1次,连续给药4 d,取材并处理后采用比色法检测大鼠小肠黏膜LDH、MDH和乳糖酶活性。结果 :千金子生品和霜品均会降低大鼠小肠黏膜LDH、MDH和乳糖酶的活性(P0.05),且酶的活性随着给药剂量的增大而减小,相同剂量下,千金子霜品实验组大鼠的3种肠道酶活性大于千金子生品实验组大鼠的3种肠道酶活性(P0.05)。结论 :千金子生品和霜品可以降低小肠3种消化酶的活性,且与给药剂量有一定的关系,同种剂量下,千金子制霜后对肠道酶活性的降低程度小于生品,表明制霜后毒性降低,从肠道酶的角度可以证明千金子制霜减毒的科学性。     

布加综合征合并下腔静脉血栓的综合治疗

布加综合征(Budd-Chiari Syndrome,BCS)合并下腔静脉(inferior vena cava,IVC)血栓为临床治疗难点,安徽省阜阳市第二医院自2003年6月至2012年6月共收治75例BCS合并IVC血栓患者,采用根治性手术、人工血管搭桥、溶栓、支架压栓等方法综合治疗,临床效果明显,现报道如下.