衔接蛋白p66Shc在高糖诱导的肾小管上皮细胞线粒体活性氧簇产生中的作用

目的：观察高糖环境下人近端肾小管上皮细胞HK-2中p66Shc的表达和磷酸化,以及p66Shc瞬时高表达对高糖诱导的HK-2线粒体活性氧簇产生的影响,为探讨糖尿病肾病线粒体ROS产生的机制提供新的思路。方法：常规培养正常人近端肾小管上皮细胞（HK-2）,将30mmol／LD-葡萄糖在不同时间点作用于体外培养的HK-2细胞,采用Real—time—PCR检测p66ShcmRNA的表达变化,Western blot检测p66Shc蛋白、磷酸化p66Shc—Ser36蛋白的表达;进一步将pcDNA3．1hisp66Shc质粒转染HK-2细胞,采用激光共聚焦显微镜观察p66Shc高表达对高糖诱导的线粒体活性氧簇产生的影响。结果：30mmol／LD-葡萄糖能呈时间依赖性上调p66ShcmRNA和蛋白表达水平,同时增强p66Shc第36位丝氨酸的磷酸化;在30mmol／LD-葡萄糖作用下,转染p66Shc的HK-2线粒体ROS水平明显高于未转染组及空载体转染组（P〈0．05）。结论：p66Shc参与了高糖诱导的线粒体活性氧簇的产生,可能在糖尿病肾病早期肾小管氧化损伤过程中发挥重要作用。     

Tet—onAdvanced调控Amelotin基因表达成釉细胞系的建立

目的应用Tet-OnAdvanced。基因表达系统构建由强力霉素（D0x）诱导Amelotin基因表达的成釉细胞系,为进一步研究Amelotin基因的生物学功能奠定基础。。方法通过fIT—PCT法从出生后7d的小鼠牙胚中克隆得到Amelotin的全长基因,测序正确后将其亚克隆入pTRE-Tight裁体中,利用Tet—onAdvanced基因表达系统先后将调控质粒pTet—OnAdvanced和反应质粒pTRE-Tight-Amelotin转入成釉细胞,分别用G418和潮霉素进行筛选．克隆扩增得到可诱导表达Amelotin基因的成釉细胞系j用RT-PCR法检测不同Dox浓度下转染成釉细胞中Amelotin基因的表达。结果连续两个回合的转染及筛选后获得了引入pTet-onAdvanced系统的细胞系,能够高诱导低背景表达Amelotin,在强力霉素诱导48h可从使Amelotin的表达显著增加,强力霉素在一定浓度范围内可以诱导Amelotin的表达呈剂量依赖性增加。结论成功构建了受强力霉素调控的双重稳定表达Amelotin．成釉细胞系,为进一步研究Amelotin与釉质矿化之间的关系奠定了基础。     

高压氧治疗椎动脉型颈椎病67例临床观察

“椎动脉型颈椎病”又称“眩晕型颈椎病”,是各类型颈椎病中治疗效果最不确切、最易复发的一种。我院通过高压氧配合颈椎手法治疗椎动脉型颈椎病,取得了显著效果,现报告如下。     

MicroRNA与癌症的研究进展

1993年,Lee等[1]首先在线虫(C.elegans)的胚胎发育期发现一种长度约为22个核糖核苷酸的小分子非编码RNA,能调节线虫细胞发育时序,将其命名为lin-4.随后几年,相关研究人员又在多种动植物中发现数百种类似表达形式的小RNA,推测其对发育和生理过程等可能具有调控作用,并将它们命名为microRNA[2],即miRNA.根据生物信息学方法预测,人类基因组中可能包含了200～255个miRNA基因,约为编码基因的1%[3].数据库中已有319个人类miRNA基因,其中234个已得到验证(http://micmma.sanger.ac.uk/).在哺乳动物中,miRNA可能参与调控20%～25%的基因表达[4].RNA干扰作为近年来的重大科学发现,如今对于这种起抑制蛋白合成作用小分子RNA的研究已成为分子生物学领域的热门.从研究利用RNA干扰技术来阻滞癌症等疾病开始,越来越多的线索表明miRNA与癌症之间存在着密切的关系,笔者就miRNA功能及其与癌症的关系和目前的研究进展作以下综述.     

强力霉素调控的真核表达体系ALC-pTet-on Advanced成釉细胞株的建立

目的:建立可受强力霉素调控的高表达外源基因的真核表达体系ALC-pTet-on Advanced细胞株,用于基因功能的研究。方法:将质粒pTet-on Advanced转染至成釉细胞系(ALC),用1 000μg/mL的G418筛选抗性克隆。用RT-PCR进行DNA的整合鉴定,并瞬时转染荧光素报告基因(pTRE-Tight-Luc)对pTet-on Advanced阳性克隆株的功能进行鉴定。结果:G418压力筛选后,获得了13个细胞克隆株,RT-PCR检测均表达反义四环素转录激活子(rtTA Advanced),PCR产物测序结果与pTet-on Advanced基因序列一致,表明pTet-on Advanced基因片段已整合进小鼠成釉细胞基因组DNA,荧光素报告基因功能鉴定获得l株诱导表达倍率为22.1的克隆株,且pTet-on Advanced基因阳性的成釉细胞株的形态和生长度与正常成釉细胞没有明显差异。结论:通过脂质体转染的方法成功地获得l株诱导表达倍率为22.1的高表达成釉细胞株,为进一步研究EMPs在成釉细胞中功能打下了基础。     

胰腺粘液性囊腺瘤3例并文献复习

胰腺粘液性囊性肿瘤属于罕见病例,约占胰腺外分泌肿瘤的2%～5%,根据上皮内肿瘤的分级,肿瘤分为腺瘤、交界性及非浸润性或浸润性癌。几乎无一例外的发生于女性,与胰腺的导管系统无交通。肿瘤囊壁由柱状产生粘液的上皮细胞构成并具有卵巢型间质。患者平均年龄49岁（20～82岁）。 我们在实际工作中遇到3例胰腺粘液性囊腺瘤,现结合文献情况详细阐述其形态、免疫组化及诊断、鉴别诊断等问题。     

奥美拉唑结合推拿治疗功能性消化不良的临床研究

目的评价奥美拉唑结合推拿治疗功能性消化不良（FD）的疗效。方法将2004～2009年门诊就诊患者120例,随机分成三组。观察组：口服奥美拉唑结合推拿治疗功能性消化不良40例;对照组Ⅰ：口服埃索美拉唑和多潘立酮联合用药治疗功能性消化不良40例;对照组Ⅱ：口服奥美拉唑治疗功能性消化不良40例。疗程均为2周。观察三组患者胃部烧灼感、餐后饱胀感、上腹痛及嗳气等症状改善程度。结果三组治疗前后患者胃部烧灼感、上腹痛症状评分下降差异均有统计学意义（P〈0．01）。嗳气等症状评分下降差异均有统计学意义（P〈0．05）。餐后饱胀症状评分对照组治疗前后差异有统计学意义（P〈0．05）。三组在性别、年龄、病程和病变程度上差异无统计学意义（P〉0．05）。结论奥美拉唑结合推拿治疗功能性消化不良效果优于埃索美拉唑和多潘立酮联合用药,也优于单纯应用奥美拉唑治疗,而且用药的不良反应少。     

总胆红素与老年高血压患者低密度脂蛋白及白蛋白关系的探讨

目的探讨血清总胆红素与老年高血压患者低密度脂蛋白、白蛋白的关系。方法243例老年人,单纯高血压组60例,高血压肥胖组62例,对照组121例。测定3组的血清总胆红素、白蛋白、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇,并对数据进行分析。结果老年男性总胆红素高于老年女性,总胆红素与老年男性白蛋白及老年女性低密度脂蛋白胆固醇正相关。单纯高血压组老年男女总胆红素低于对照组,男性单纯高血压组与对照组比较差异有显著性意义;女性则差异无显著性意义。单纯高血压组老年人低密度脂蛋白胆固醇低于、高血压肥胖组老年人高于对照组,但差异无显著性意义。老年男性高血压组总胆红素与低密度脂蛋白胆固醇不相关,老年女性单纯高血压组总胆红素与低密度脂蛋白胆固醇正相关,与白蛋白不相关。结论老年女性高血压患者总胆红素随低密度脂蛋白胆固醇水平的增高而增高,血清白蛋白与老年男性总胆红素有关联。性别及增龄对高血压患者总胆红素水平可能有一定影响。     

舌骨悬吊联合悬雍垂腭咽成型术治疗重症阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征

目的：探讨舌骨悬吊联合腭咽成型手术治疗重症睡眠呼吸暂停低通气综合征的手术方法和效果。方法：对22例符合重症阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征标准的患者进行了改良的舌骨悬吊联合腭咽成型手术，并对所有的患者进行了随访，对17例患者进行了手术前后的舌咽平面间隙的测量和睡眠呼吸监测。结果：随访结果显示，17例术后6、12个月两项睡眠监测指标均较术前有明显改变（P＜0.01），舌-咽距离由术前5.00～9.00?mm（平均为7.06?mm），增加到术后的9.00～13.00?mm（平均为11.00?mm）。打鼾症状明显减轻或消失，呼吸暂停次数明显减少，白天嗜睡消失或基本消失，精力充沛。根据杭州疗效评定标准，术后6个月及1年的有效率均为100%，但治愈率和显效率有所变化。结论：改良的舌骨悬吊联合腭咽成型手术简单，时间短，花费少，效果好，值得临床推广。     

支气管哮喘患者血清细胞因子与IgE和NO的相关性研究

细胞分子生物学的发展,使哮喘发病机理的研究进入分子水平.IgE是哮喘发病的中心环节,它的消长受多种细胞因子与介质的调控,故细胞因子在哮喘的发病中的作用日益受重视.本文对支气管哮喘患者血清中IgE、相关因子与NO水平进行检测,以求阐明其相互关联与在哮喘发病中的作用.现将其报告如下.