脐血CD34+细胞体外扩增和分化调节的研究

目的探讨脐血体外扩增的最佳造血生长因子组合及时间.方法脐血CD34+细胞培养于含不同造血生长因子组合的无血清培养液.对其有核细胞数(NC)、表面抗原以及集落形成能力进行监测.结果同对照组相比,扩增组的NC和CD34+细胞均有不同程度的扩增,扩增高峰分别为第10d和第6d;其中含SCF、IL-3、IL-6、TPO、Flt3-L、G-CSF及Epo的E组扩增的细胞数最多.第6d,CD34+细胞、NC及CFC总数分别扩增了9.90、101.80和31.18倍,第10d分别累积扩增了3.56、357.42和73.11倍.而D组(含SCF、IL-3、IL-6、TPO及Flt3-L)扩增的细胞中CD34+及CD34+CD38-含量最高.提示E组细胞分化较D组明显.结论体外扩增可望解决单份脐血造血干/祖细胞数量不足的问题,但扩增中应注意其过度分化,扩增时间以6～10d为宜.     

三氧化二砷对K562细胞细胞周期的影响及其机制的研究

最近，有关三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）有效治疗急性早幼粒细胞白血病，且无严重毒副作用及骨髓抑制的报道［１，２］，再度引起人们对Ａｓ２Ｏ３治疗白血病甚至其他恶性肿瘤的浓厚兴趣。为阐明Ａｓ２Ｏ３治疗慢性髓细胞白血病的机制，并为其临床应用提供理论依据，我们以Ｋ...     

逆转录酶／聚合酶链反应检测早幼粒细胞白血病PML－RARα融合基因对预后和微量残留白血病细胞检测的意义

应用逆转录酶／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）技术检测９７例中国人急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ），其中包括３５例初发期患者，４４例缓解期患者，以及１８例进行动态观察的患者，发现二种ＰＭＬ－ＲＡＲα融合ｍＲＮＡ异构体（Ｌ型或Ｓ型）存在于５２例初发期ＡＰＬ中，其早期死亡率和复发率Ｓ型高于Ｌ型，两者预后差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０２５）。６２例缓解期患者中有１１例ＰＣＲ阳性，其中５例于检测后１～６个月内复发，６例经强化治疗后仍处缓解期，其中１例化疗２疗程后ＰＣＲ转阴，提示ＲＴ／ＰＣＲ确实为检测微量残留白血病细胞的一项极灵敏方法，可作为预报ＡＰＬ复发的一项指标。     

维甲酸调变早幼粒白血病细胞株NB4中G-CSF及其受体表达

目的进一步研究G-CSF在维甲酸致高白细胞症中的作用.方法用RT-PCR、Northemblotting方法检测NB4细胞经全反式维甲酸(ATRA)作用后G-CSF mRNA表达的变化,同时用ELISA方法检测细胞培养上清液中G-CSF蛋白水平的变化;采用流式细胞技术检测NB4细胞经ATRA作用后G-CSF受体蛋白表达的变化.结果ATRA可从基因水平上调NB4细胞中G-CSF表达,并可增加NB4细胞表面G-CSF受体的表达,G-CSF受体表达增加出现的时间虽然稍晚于G-CSF表达增加出现的时间,但仍然在较早期阶段,此时,细胞形态学和NBT实验均证实NB4细胞处于部分分化阶段.结论在ATRA治疗APL过程中,G-CSF及其受体表达增加可能协同参与了高白细胞症的发生.     

As2O3对K562细胞BCR/ABL蛋白酪氨酸磷酸化的影响

目的　进一步阐明Ａｓ２Ｏ３ 诱导Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长的可能机制,为Ａｓ２Ｏ３ 在临床上的应用提供理论依据。方法　采用免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、生物化学及免疫荧光等方法研究了Ａｓ２Ｏ３对ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化及其所介导的信号途径和某些凋亡相关蛋白表达的影响。结果　１μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 使细胞内多种蛋白酪氨酸磷酸化减少,而且ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白自身酪氨酸磷酸化亦减少,但０ ．１ μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸化的影响不明显;Ａｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸酶（ＰＴＰ） 活性未见明显影响;Ａｓ２Ｏ３ 下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达,但对ＳＴＡＴ１ 和ＳＴＡＴ２ 蛋白的表达以及ＳＴＡＴ１ 蛋白酪氨酸磷酸化无影响;Ａｓ２Ｏ３ 亦不影响凋亡相关蛋白Ｂｃｌ２、ＢｃｌｘＬ／Ｓ、Ｂａｘ、ＩＣＨ１Ｌ、ｐ５３、ＰＡＲＰ的表达,Ａｓ２Ｏ３ 亦使Ｋ５６２ 细胞的ＰＭＬ蛋白降解。结论　Ａｓ２Ｏ３ 可能通过减少细胞内某些蛋白,尤其是ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化和（ 或）下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达而干扰ＢＣＲ／ＡＢＬ致癌信号的传导,引起Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长。     

纯红细胞再生障碍性贫血免疫抑制机制的研究

纯红细胞再生障碍性贫血免疫抑制机制的研究孙关林陈惠仁李晶邬维礼钱六妹史冬梅吴裕忻王振义尽管纯红细胞再生障碍性贫血（ＰＲＣＡ）病因众多，且有的尚不明确，然而近年研究认为，其发病机制主要与机体免疫功能紊乱有关。我们应用体外造血祖细胞培养方法，结合临床治疗...     

癌肿（白血病与肝癌）诱导分化疗法研究进展

“八五”期间，我们对癌肿诱导分化剂的开发，全反式维甲酸临床治疗（急性早幼粒细胞白血病和肝癌），诱导分化治疗作用机制作了研究。一、寻找新的分化诱导剂筛选出一批新的有效的分化诱导剂。其中新型推甲类7个、天然产物3个、源哈类1个，其中部分新型维申类化合物已申请了国内和日本、欧美等国的专利。在新的癌分化诱导剂的药理（细胞与分子水平）学研究中发现在细胞被诱导分化时，PKC呈浓度时间依赖性增高，细胞膜PKC及蛋白磷酸化水平升高。细胞分化启动受c－myc、c－fos、N-ras、p53等癌基因的调控。FCM检查发现分化诱导剂主要将细…     

白细胞介素1的造血刺激作用

白细胞介素1(IL-1)是一种具有多种功能的细胞因子.除了参与免疫调节、炎症反应外,IL-1还参与了机体的造血调控作用.本文拟就IL-1刺激正常造血干细胞和各系祖细胞作用研究进展作一综述.     

CSFs与肿瘤

集落刺激因子(CSFs)除对正常造血细胞和白血病细胞有作用外,与白血病和非造血系肿瘤细胞增殖分化亦存在密切关系。瘤细胞表面CSFs 受体分布和数量具有异质性,并成为CSFs 对细胞作用不同的基础。基因水平的研究初步揭示了CSFs 功能基础及机理。     

维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病患者血清G－CSF水平的变化与意义

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）法检测了３５例急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）患者治疗前血清粒系集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）水平，其中２５例作全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）治疗后的动态观察。结果表明ＡＰＬ患者治疗前血清Ｇ－ＣＳＦ检出率为１１．４３％（４／３５），１８例正常人对照均未能检出Ｇ－ＣＳＦ。２５例ＡＰＬ患者ＡＴＲＡ治疗后第６天血清Ｇ－ＣＳＦ检出率即明显升高，直至１２天（Ｐ＜０．０５），１５天后逐渐下降。外周血ＷＢＣ出现高峰时血清Ｇ－ＣＳＦ的检出率高达８３．３３％（１５／１８）。Ｓｐｅａｒｍａｎ等级相关分析血清Ｇ－ＣＳＦ水平与外周血ＷＢＣ、早幼粒或中幼以后粒系细胞绝对数呈相关性（Ｐ均＜０．０５）。并初步分析了血清Ｇ－ＣＳＦ变化的意义。