霍乱弧菌多重PCR检测方法的建立及优化

[目的]建立一种快速检测样品中霍乱弧菌的多重PCR方法,优化霍乱弧菌多重PCR的反应体系和循环参数.[方法]根据霍乱毒素ctxA、toxR、O139群特异性基因、O1群特异性基因序列,设计特异性引物,对引物浓度、PCR缓冲液的浓度、Mg2+浓度、退火温度及其延伸时闻等条件进行优化.[结果]4对引物在不同血清型霍乱弧菌DNA模板中能特异扩增出不同的条带.在同一反应体系中,较低的延伸温度可以提高霍乱弧菌多重PCR检测的灵敏度.[结论]通过对霍乱毒素多重PCR反应体系不同因素的优化,建立了稳定可靠的霍乱弧菌多重PCR检测平台.     

脂质体佐剂疫苗研究进展

脂质体作为蛋白质及多肽抗原的佐剂和载体已被广泛应用。通过综述脂质体在细菌、病毒、寄生虫和肿瘤疫苗中的研究应用 ,提示脂质体在疫苗的研制中具有广阔的应用前景     

抗空肠弯曲菌外膜蛋白PEB1多克隆抗体的制备与鉴定

目的 表达空肠弯曲菌外膜蛋白PEB1,并制备针对该蛋白的多克隆抗体.方法 诱导培养工程菌E coli BL21 (DE3)表达空肠弯曲菌PEB1重组蛋白.经镍-琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化,透析并定量后,常规免疫新西兰兔.收集血清,盐析法粗提IgG,应用间接ELISA法和双向琼脂扩散试验检测抗体效价,并通过Western blot和玻片凝集试验检测抗体的特异性.结果 得到高纯度的空肠弯曲菌PEB1重组蛋白.用该蛋白免疫新西兰兔后,获得抗PEB1多克隆抗体.间接ELISA法检测抗体效价为1:2×104,双向琼脂扩散试验检测抗体效价为1:8.结论 运用纯化的空肠弯曲菌PEB1重组蛋白免疫新西兰兔,获得高效价的多克隆抗体.     

心力衰竭患者血小板活化因子及其受体表达的变化

目的 :探讨心力衰竭患者血浆血小板活化因子 (PAF)、血小板活化因子乙酰水解酶 (PAF AH)活性的变化 ,以及外周血中单个核细胞 (PBMC)PAF受体 (PAF R)的表达。方法 :对 30例心力衰竭患者采用生物法检测血浆中PAF含量 ,酶水解底物显色法测定PAF AH活性 ,流式细胞仪检测PBMC上PAF R的表达。并与 30例健康体检者对照。结果 :心力衰竭患者血浆中PAF含量 (11.12± 1.80 ) μg L ,PAF AH活性 (2 4 .5 0± 7.86 ) μmol (min·L)、PBMC上PAF R的表达与健康体检者比较差异有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。结论 :PAF、PAF AH、PAF R三者在心力衰竭发生和发展中起重要作用     

肾综合征出血热与HLA-DR基因多态性的关联

目的　探讨人类主要组织相容性复合体 -DR(HLA DR)基因多态性与肾综合征出血热 (HFRS)之间的关联性。方法　采用聚合酶链反应 -序列特异性引物 (PCR SSP)DNA分型技术对遵义地区汉族 3 9例HFRS患者和2 8例健康对照进行HLA DR基因分型。结果　HLA DRB3 基因频率在HFRS患者组较正常对照组明显增高 (RR =5 .0 4,χ2 =9 988,P <0 0 1) ;HLA DRB1 0 90 12基因频率较正常对照组明显降低 (RR =0 2 4,χ2 =7 2 16,P <0 0 1) ;其它等位基因频率在患者组与对照组间无显著性差异。结论　在遵义地区汉族人群中 ,肾综合征出血热可能与HLA DRB3 基因呈正相关 ,与HLA DRB1 0 90 12基因呈负相关     

血小板活化因子的生理、病理作用及机制

血小板活化因子 (Platelet activatingfactor,PAF)是至今为止发现的一种最具强烈活性的脂类介质 ,参与了生殖、哮喘、过敏、炎症、凋亡、肿瘤、休克等多种生理及病理效应 ;PAF主要和细胞膜上的PAF 受体 (PAF Receptor,PAF R)结合 ,通过Ca2 ,IP3 和Zn2 ,NF κB ,TNF ,LFA 1,丝氨酸蛋白酶等参与介导生物学反应。     

流行性出血热患者血清sICAM-1水平及临床意义

肾综合征出血热是由汉坦病毒 (ＨＶ)引起的一种急性自然疫源性疾病 ,我国肾综合征出血热称为流行性出血热 (ＥＨＦ) ,遵义地区为该病高发区[1] 。可溶性细胞间粘附分子 1(ｓＩＣＡＭ 1)主要来源于内皮细胞和白细胞等 ,异常升高的ｓＩＣＡＭ 1是淋巴细胞活化的标志 ,也是免疫致     

羊抗人lgG抗体的IgG—SpA菌体免疫法

免疫学技术的飞跃发展,对第二抗体需要日趋增加,由于用常规法制备第二抗体操作复杂,本室等曾报道了免抗人、免抗小鼠IgG抗体制备的IgG—SpA菌体免疫法。本文报道用人血清致敏SpA菌体作为免疫原,免疫山羊制备抗人IgG抗体获得满意结果,现报道如下。材料一、菌株:含A蛋白葡萄球菌系本室自选的NO:1800株。二、人血清:健康人脐带血清由附属医     

流行性出血热的临床治疗研究

流行性出血热的临床治疗包括早期诊断,对症综合治疗,特异抗病毒治疗及护理。本研究表明,认真做好鉴别诊断,及早进行免疫学确诊,有利及时治疗。对EHF治疗,早期采用特异抗病毒治疗,针对各期病情变化积极采取综合对症治疗将有助于减轻症状,渡过危险期,减少加重率,提高治愈率。加强对病人精心护理能防止病情加重,有利于疾病的恢复。总之要做好“三早一就”和综合治疗。     

HLA-G、IL-10在卵巢癌中的表达及其相互关系的研究

目的 研究HLA-G、IL-10在卵巢癌中的表达,并探讨两者的关系及与卵巢癌的关系.方法 采用免疫组化技术检测30例不同临床分期的卵巢癌组织（其中Ⅰ～Ⅱ期15例,Ⅲ～Ⅳ期15例）和20例正常卵巢组织中HLA-G、IL-10的表达情况.结果 30例卵巢癌组织中检测到HLA-G抗原表达侣例（Ⅰ～Ⅱ期8例,表达强度评分集中于2～3分;Ⅲ～Ⅳ期10例,表达强度评分集中于3～5分）,检测到IL-10表达21例（Ⅰ～Ⅱ期8例,表达强度评分集中于2～3分;Ⅲ～Ⅳ期13例,表达强度评分集中于4～5分）.20例正常卵巢组织无一例表达HLA-G,4例表达IL-10、HLA-G、IL-10在卵巢癌组织中的表达显著高于正常卵巢组织（P〈0.01）,且与临床分期有关;HLA-G、IL-10在卵巢癌组织中的表达呈正相关.结论 HLA-G、IL-10可能共同参与了卵巢癌的发生、发展,对判断卵巢癌的临床分期有一定价值.