遵义地区汉族HLA-A、B等位基因多态性的研究

目的从基因水平调查遵义地区汉族人群HLA-A、B等位基因频率，并了解其多态性分布状况。方法应用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）方法对遵义汉族200名健康个体进行等位基因分型。结果遵义地区汉族HLA-A、B等位基因频率分布，在低分辨水平，共检出12个A＊基因，25个B＊基因，与我国北方、南方汉族比较，更接近南方汉族人群。南方汉族中分布频率极低的B＊07，在遵义汉族分布频率较高（GF值为2．0％）。结论遵义汉族人群HLA-A、B基因具有较为丰富的多态性，其分布符合南方汉族的特点，又具有高频B＊07地区性遗传特征。     

贵州省流行性出血热灭活疫苗远期流行病学效果研究

目的观察流行性出血热灭活疫苗远期流行病学效果。方法采用间接免疫荧光法检测流行性出血热（EHF）特异性IgG抗体。结果初次免疫、加强免疫和强化免疫反应率分别为0．04％、0．09％、3．42％；荧光抗体阳性率为40．54％、75．00％、85．23％。初次免疫和加强免疫后1年保护率为83．11％、95．10％，近9年免疫人群年均保护率达77．84％，强化免疫后血清抗体几何平均滴度由40．29上升至71．13。结论该疫苗安全性较好，具有良好的远期流行病学效果；疫苗接种人群应适时强化免疫。     

不同培养基上空肠弯曲菌生长特性及外膜蛋白表达差异的初步研究

目的 探讨不同培养基对空肠弯曲菌(CJ)的生物学特性和外膜蛋白表达的影响.方法 采用改良布氏、改良布氏血、改良卵黄等3种培养基培养CJ,48 h后进行菌落观察、菌体观察、动力学试验、生物化学检验、间接荧光检测等初步确定生物学特性,比较3种培养基上CJ生长特性的差别.采用0.2 mol/L、pH 2.2甘氨酸-HCl缓冲液抽提CJ外膜蛋白,SDS-PAGE电泳后,灰度扫描观察比较不同培养基上CJ的28 000～31000外膜蛋白表达差异.结果 改良卵黄培养基上CJ的生长特性典型,并且其菌体形态较另外两种培养基粗壮,繁殖速度更为快速,改良卵黄培养基来源的CJ的28000～31 000外膜蛋白的表达较改良布氏血培养基丰富.结论 改良卵黄培养基培养CJ是一种生长特性典型、28000-31000外膜蛋白表达丰富的培养基,该培养基的选择和使用将为该类蛋白的CJ亚单位疫苗大规模制备、CJ的流行病学检验、食品安全卫生检验检疫奠定重要基础.

Abstract：

Objective To evaluate the biological characteristics of Campylobacter Jejuni (CJ) cultured on different culture media and their expression abundance of outer membrane proteins (OMPs). Methods CJ was cultured on the improved Bull's medium yolk agar, improved Bull's blood agar or improved Bull's agar for 48 h. The biological characteristics of the bacteria, including the colony feature, morphology, motility, biochemistry, and results of indirect fluorescence test were observed and compared. OMP of the cultured CJ was extracted using 0.2 mol/L and glycine-hydrochloride buffered solution (pH 2.2) and identified by SDS-PAGE to compare the expression abundance of the OMPs with molecular weight of 28-31 kD. Results CJ exhibited typical biological characteristics with larger cell body and more rapid growth on improved Bull's medium yolk agar than those on improved Bull's blood agar and improved Bull's agar. The bacteria grown on improved Bull's medium yolk agar showed also greater expression abundance of the OMPs with molecule mass between 28 kD and 31 kD. Conclusion Improved Bull's medium yolk agar allows rapid growth of CJ with typical biological characteristics and enhanced expression of the OMPs with molecular weight of 28 -31 kD, and can be widely used in CJ subunit vaccine development, CJ epidemiological survey, CJ food safety examination, and CJ quarantine.     

重组人白细胞介素-24及其联合顺铂对卵巢癌细胞体外生长的影响

目的探讨重组人白细胞介素24(rhIL-24)对SKOV3卵巢癌细胞株、卵巢癌顺铂(DDP)耐药SKOV3/DDP细胞株的抑制效应,并观察rhIL-24对卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞凋亡和细胞周期的影响。方法用rhIL-24、DDP及rhIL-24联合DDP作用于SKOV3、SKOV3/DDP细胞,以CCK-8法检测细胞增殖、用流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化。结果 rhIL-24对体外培养的卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞的生长有明显抑制作用,rhIL-24联合DDP对SKOV3/DDP细胞株抑制率为30.7%,与单用DDP组抑制率6.5%相比有显著性差异,流式细胞仪检测rhIL-24、DDP和rhIL-24联合DDP各组凋亡率分别为14.95%、12.99%和16.32%,与阴性对照组凋亡率1.32%比较具有显著性差异;细胞周期检测中,SKOV3细胞周期变化显示rhIL-24组G2、S期增多,联合用药组出现S期增多;SKOV3/DDP细胞中,rhIL-24组处理出现G2期增多,联合用药组出现G1期增多。结论 rhIL-24对卵巢癌细胞DDP敏感和耐药株都具有抑制作用,联合用药可增强DDP的效应;rhIL-24对卵巢癌细胞的抑制作用通过诱导细胞凋亡实现,rhIL-24处理细胞后周期变化出现G2期阻滞,联合用药组出现G1期阻滞。     

启发式、研讨式、参与式相结合的教学法在研究生免疫学教学中的实践

介绍启发式、研讨式、参与式相结合的教学法,鼓励研究生在学习过程中积极参与教学过程,发挥其在教学中的主动性,加强教师与学生之间以及学生与学生之间的交流和反馈,使研究生在教学中能深刻地领会和掌握所学的免疫学知识,实现教与学的紧密结合。     

重组人IL-31蛋白纯化方法的比较研究

目的 比较两种方法纯化rhIL-31的效果.方法 将含pET32a/rhIL-31的重组菌E.coil.BL21(DE3)经IPTG诱导表达,通过超声波破碎,包涵体的提取溶解,分别经G75凝胶层析和镍琼脂糖凝胶FF层析进行蛋白纯化,通过SDS-PAGE对纯化结果进行比较分析.结果 镍琼脂糖凝胶FF层析法的杂蛋白去除率高于凝胶层析法,所得蛋白纯度略高.结论 比较重组人IL-31蛋白的纯化效果,镍琼脂糖凝胶FF层析的效果比G75凝胶层析的效果好.     

重组人IL-10对皮肤移植家兔血清中IL-17家族水平的影响

目的检测皮肤移植家兔注射重组人IL-10(rhIL-10)后血清IL-17家族水平的变化,探讨IL-17家族在rhIL-10抗免疫排斥机制中的作用。方法皮肤移植家兔分6组,分别为rhIL-10低剂量组、rhIL-10高剂量组、环孢菌素A(CsA)低剂量组、CsA高剂量组、rhIL-10+CsA低剂量联合组及生理盐水组。于皮肤移植术前1 d开始用药,每只家兔连续10 d肌肉注射。各组分别于皮肤移植术前1 d、术后1、4、7、14、21、28 d取血,分离血清,以ELISA法检测血清中IL-17家族细胞因子水平。结果术后IL-17A～F水平较术前明显升高,在术后14 d达到峰值,然后逐渐降低。rhIL-10能抑制IL-17A、IL-27、IL-17F的分泌及促进IL-25的分泌,抑制强度与使用剂量成正相关。结论 IL-17家族细胞因子大量分泌,可能介导移植后的炎症反应,促进炎性因子分泌从而参与移植排斥反应。     

采用荧光定量PCR溶解曲线法监测人TCR alpha链CDR3谱系漂移技术的初步探讨

目的:初步探讨荧光定量PCR溶解曲线分析技术监测人外周血T细胞TCR alpha链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生).方法:提取4例正常人、2例淋巴瘤型白血病患者PBMC中的总RNA,逆转录成cDNA,以32个人TCR alpha 链胚系可变区基因家族 (TRAV)设计上游引物,共同的TCR alpha 胚系链恒定区基因家族(TRAC)设计下游引物,荧光定量PCR(FQ-PCR)扩增32个TRAV基因各家族CDR3谱系,溶解曲线法分析各家族CDR3谱系的单/寡/多克隆增生.结果:正常人外周血T细胞TCR alpha链32个家族CDR3表达频率不一致,各家族PCR产物的溶解曲线谱型图(melting curve spectratyping)呈现熔点不同的CDR3多态性,为多克隆增生的高斯分布,2例淋巴瘤型白血病患者外周血T细胞TCR alpha链32个家族CDR3表达频率不一致,部分家族呈缺失状态,患者各家族PCR产物的溶解曲线谱型图上,多数家族为多克隆增生的高斯分布,但每个患者均出现数量不等的单克隆和寡克隆增生家族.结论:荧光定量PCR溶解曲线分析TCR alpha链CDR3谱系漂移技术方法稳定简便,能较好地监测正常人和临床样本外周血T细胞TCR alpha链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生).     

直肠癌患者血清中IL-2和SIL-2R表达的研究

目的对直肠癌患者血清中白细胞介素-2（IL－2）和可溶性白细胞介素-2受体（SIL－2R）进行检测。方法对IL－2和SIL－2R的检测均采用ELISA双抗夹心法。结果直肠癌患者手术前和手术后10~20d血清中IL－2含量明显低于正常对照组，而SIL－2R含量则显著高于正常对照组。其手术前与术后10－20d血清中IL－2和SIL-2R表达相比较经统计学处理无明显差异。结论本研究提示，直肠癌患者采用IL－2等细胞因子进行辅助治疗，既可增强抗肿瘤免疫效应，又有利于患者的康复。