人脐血基质细胞分离培养的实验研究

目的：探讨人脐血CD34^ 细胞群中分离培养造血基质细胞的可行性。方法：分离人脐血CD34^ 细胞，采用Dexter法培养，对贴壁细胞进行观察和鉴定。结果：Dexter培养9～14d(平均11．2d)开始形成基质细胞集落，15～22d(平均19．6d)集落数量最多，培养28d贴壁细胞铺满培养皿底。细胞类型以成纤维样细胞、巨噬样细胞、“小圆”类细胞为主；细胞化学染色：非特异性酯酶染色(NSE)、糖原染色(PAS)：100％阳性，过氧化物酶染色(POX)：阴性，碱性磷酸酶(ALP)：28％阳性；免疫组化染色：CD106：阳性96％，CD29：93％阳性，CD44：98％阳性，CD45：阴性，CD50：62％阳性，纤维粘连蛋白(Fn)：92％阳性，层粘连蛋白(Lm)：74％阳性，胶原Ⅳ：83％阳性。结论：人脐血中存在造血基质细胞的前体细胞。     

抑制SDF-1活性对人急性髓性白血病HL-60细胞系增殖的影响

本研究通过观察抑制SDF-1活性对HL-60细胞增殖活性的影响，探讨趋化因子SDF-1在维持HL-60细胞生存能力中的作用。培养骨髓基质细胞，并与HL-60细胞共培养，采用SDF-1受体CXCR4单克隆抗体阻断SDF-1生物活性后，用MTT法检测HL-60细胞活力、用流式细胞术观察HL-60细胞增殖周期变化、检测细胞膜表面CXCR4表达，同时检测CXCR4单克隆抗体应用前后HL-60细胞内钙离子浓度变化。结果显示，抗CXCR4单克隆抗体可下调HL-60细胞膜表面CXCR4的表达，同时处于G0／G1期的细胞增多，处于S期的细胞减少，而白血病细胞存活率下调，细胞内钙离子浓度降低。结论：抑制SDF-1活性可在一定程度上抑制白血病细胞的增殖。     

系统性红斑狼疮相关性再障1例

系统性红斑狼疮(SLE)是一种可累及全身各器官系统的自身免疫性疾病，血液系统同样可以受累及。而引起再生障碍性贫血(再障)则非常罕见，临床称之为SLE相关性再障(SLE Assoiated Aplastic Anemia，SLEAAA)。到目前为止，国内仅有相关个案报道，我科近日收治1例SLE相关性再障，现报告如下。     

输血不良反应（续）

输血不良反应（续）廖清奎，孔佩艳华西医大附一院（接上期Ｐ．６２）疟疾于输血后１～６０天发病，Ａ型受血者发病较多（９５．６％），供血员献血后发病者占８６％。三、溶血反应输血常有临床无症状的轻度溶血。严重的急性溶血反应常固误输ＡＢＯ血型不合的血所致，Ｒｈ...     

异基因造血干细胞移植后并发严重移植物抗宿主病1例

患者,男,35岁,2007年1月诊断慢性粒细胞白血病（CML）-慢性期,3月查bcr／abl融合基因阳性率为12．1％,6月行同胞间HLA全相合异基因外周血造血干细胞移植（allo—PBSCT）术。移植后40d复查bcr／abl融合基因阳性率0．02％;移植后90d复查bcr／abl融合基因阳性率0．57％;血常规正常,骨髓细胞学检查提示增生性骨髓像,粒系各阶段比例正常。逐渐停用环孢素。停药20d出现背部、双侧大腿皮肤丘疹伴瘙痒;口腔干燥,颊黏膜粗糙,进食辛辣食物时口腔黏膜疼痛。移植后120d出现咳嗽、咯少量白色泡沫痰。     

促血小板生成素基因转染小鼠骨髓基质细胞体外表达的实验研究

目的探讨促血小板生成素(thrombopoietin,TPO)基因修饰的小鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)体外表达TPO的变化特点。方法以脂质体介导法将TPO cDNA真核表达质粒转染BMSCs,RT-PCR方法检测TPO mRNA的表达,免疫组化法及Western blot测定TPO蛋白的表达。结果转染TPO基因的BMSCs其TPO mRNA及TPO蛋白表达量明显高于空载体组(P<0.01)及未转染组(P<0.01)。结论阳离子脂质体能有效介导TPO cDNA真核表达质粒转染BMSCs,且转染后BMSCs中TPO mRNA及TPO蛋白的表达显著上调。     

流式细胞术在首诊非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的作用

目的 探讨流式细胞术(FCM)在诊断非霍奇金淋巴瘤(NHL)骨髓浸润中的价值.方法 采用骨髓涂片和切片联合FCM检测NHL骨髓侵犯.骨髓涂片经瑞氏-吉姆萨液染色,分类计数瘤细胞.骨髓切片采用塑料包埋法制作组织切片,常规苏木精-姬姆萨-酸性品红(HGF)染色.流式细胞仪每份标本分析10 000个细胞.检测方案采用CD45/侧向散射角(SSC)设门,重点分析幼稚细胞群及成熟淋巴细胞群,经前向散射角(FSC)、SSC、异硫氰酸荧光素(FITC)标记的单克隆抗体(McAb1-FITC)、藻红蛋白(PE)标记的单克隆抗体(McAb2-PE)、CD45-Percp五参数分析确定免疫表型.结果 17例骨髓首诊病例中,骨髓穿刺(BMA)确诊12例(70.6%),骨髓活检(BMB)确诊15例(88.2%),FCM确诊17例(100%),FCM确诊率最高,较BMA差异有统计学意义(P<0.05),较BMB差异无统计学意义(P>0.05).BMB检查发现NHL骨髓浸润方式间质型、结节型和弥漫型均易见,分别占23.5%,23.5%和52.9%.FCM检测结果为B细胞淋巴瘤13例(76.5%)、T细胞淋巴瘤和NK/T细胞淋巴瘤4例(23.5%).结论 骨髓涂片和骨髓切片检查是诊断NHL-BMI的基本方法,可以做出定性诊断.FCM可进一步做出明确的病理诊断.对于骨髓检查首诊NHL-BMI的病例,3种技术的联合应用可以提高NHL-BMI的诊断正确性和阳性率.     

DC-CIK细胞输注治疗急性髓细胞白血病50例分析

目的观察自体外周血移植联合自身白血病细胞冻融抗原负载的树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)细胞输注治疗急性髓细胞白血病的安全性和临床疗效。方法 50例初发急性髓细胞白血病患者抽取未缓解的骨髓细胞制备自身白血病细胞冻融抗原,在自体外周血干细胞采集时留取部分单个核细胞培养DC-CIK细胞,利用制备好的白血病冻融抗原共培养激活扩增DC-CIK细胞。待患者自体外周血造血干细胞移植后30～60d输注自身白血病细胞冻融抗原负载的DC-CIK细胞,每例每疗程回输细胞总数大于7×109,同时给予白细胞介素-2(IL-2)200万单位皮下注射,每天1次,连续10d皮下注射。观察患者接受细胞输注治疗的安全性及临床疗效,并与既往接受自体外周血移植但未输注DC-CIK细胞治疗的52例急性髓细胞白血病患者在临床疗效方面进行比较分析。结果接受自身白血病细胞冻融抗原负载的DC-CIK细胞输注治疗的50例患者中,4例在DC-CIK细胞输注过程中出现一过性畏寒发热反应,但最高体温均低于39℃(37.8～38.5℃),经物理降温后恢复正常。其他患者均未出现异常不适反应。患者接受DC-CIK治疗结束后随访6～24个月,总体生存率(OS)、无病生存率(DFS)均高于同期未输注DC-CIK细胞治疗的对照组患者,其中随访24个月时OS、DFS均显著高于未输注DC-CIK细胞治疗的对照组患者(P<0.05)。结论对急性髓细胞白血病患者采用自体外周血移植联合自身白血病细胞冻融抗原负载的DC-CIK细胞输注治疗不良反应小,有助于清除移植后微小残留病和提高患者生存率,提示该治疗方法对急性髓细胞白血病具有良好的治疗应用前景。     

阶段性训练加强医学生沟通能力培养的探析

结合目前医学生沟通能力培养存在的问题,探讨加强医学生沟通能力培养的对策,提出阶段性训练提高医学生沟通能力的方法。