反义寡核苷酸防治移植物动脉硬化的作用

目的　探讨防治移植物动脉硬化的途径。方法　通过大鼠胸腹主动脉移植简化模型 ,用各种增殖细胞核抗原 (PCNA)寡核苷酸在脂质体介导下转染大鼠胸主动脉后 ,移植到大鼠腹主动脉 ,于术后 15、3 0和 60d取移植动脉作病理学检查及PCNA逆转录PCR检测。结果　病理学结果示 ,在 3个时相点 ,反义寡核苷酸组移植动脉再狭窄率 (8.3 %、12 .4%、19.5 % )均显著低于对照组 (P <0 .0 5 )。逆转录PCR结果显示 ,在 3个时相点 ,反义寡核苷酸组PCNAmRNA的表达(5 9.2 4、80 .16、18.5 8)均明显低于对照组 (P >0 .0 5 )。结论　PCNA反义寡核苷酸可明显抑制移植动脉PCNA蛋白的表达 ,抑制动脉内膜增生 ,防治移植物动脉硬化。     

bcl-xl基因过表达在脑梗死中的保护作用及细胞色素C与caspase-3的表达研究

目的 观察大脑中动脉栓塞模型转基因小鼠中bcl—xl的过表达对脑缺血后再灌流的保护作用及其机制。方法 建立bcl—xl过表达转基因小鼠模型,将该模型小鼠与同种系野生型小鼠同时行线栓永久性阻塞大脑中动脉,在缺血24h时测其神经功能评分,观察转基因小鼠与野生型小鼠的差别。在缺血后不同时间点分别检测两种小鼠梗死体积及其动态变化、脑组织中bcl—xl的表达量的差异、再灌流时凋亡细胞的数量和分布情况以及脑中细胞色素C及caspase．3的表达量及分布情况。结果 转基因小鼠的神经功能评分低于野生型小鼠。在缺血后不同时间点,转基因小鼠的梗死体积小于并且皮质缺血区内的凋亡细胞数明显少于野生型小鼠,且保护作用发生时间早,持续时间较长。梗死前后转基因小鼠的皮质细胞bcl—xl的表达量均明显高于野生型小鼠,且梗死后两种小鼠体内的bcl-xl的表达量均有所增加,但两者之间差异无统计学意义（P〉0．05）。缺血后再灌流后不同时间点,转基因小鼠缺血局部细胞色素C的表达及caspase-3的活化明显低于野生型小鼠。结论 在规范化的标准条件下,转基因小鼠中bcl—xl基因的过表达能够降低脑梗死的体积并改善小鼠的神经功能。过表达bcl—xl基因的这种效应可能是通过抑制细胞凋亡而实现的,其机制可能是bcl—xl基因的过表达抑制了细胞色素C的释放及caspase-3的活化。     

串联质谱分析在遗传代谢病高危儿童中的意义

目的研究末梢血串联质谱分析对于遗传代谢病高危儿童的诊断价值。方法本研究自2010年1月-2013年12月收集临床疑似遗传代谢病的病例617例,对末梢血进行氨基酸、酰基肉碱串联-质谱筛查,对筛查阳性的病例进行了尿代谢筛查或基因检测,得到了确诊。并总结分析了相关临床数据。结果 617例病例共诊断出遗传代谢病10种,共24例,总阳性率3.9%,其中氨基酸代谢病4例(16.7%),以瓜氨酸血症多见(3例,12.5%),有机酸代谢病14例(58.3%),以甲基丙二酸血症多见(8例,33.3%);脂肪酸氧化障碍6例(25%),以中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、线粒体脑肌病多见(各2例,8.3%)。结论儿科医生应重视对遗传代谢病高危儿童进行末梢血氨基酸、酰基肉碱串联质谱分析以达到早诊断,早干预的目的。     

谷氨酸干预体外大鼠星形胶质细胞MRP1表达

目的在体外无神经元作用下,观察谷氨酸对星形胶质细胞表达多药耐药相关蛋白1（MRP1）的影响,探讨谷氨酸与多药耐药现象的关系。方法取新生SD大鼠脑,分离纯化星形胶质细胞,适当传代后加用含谷氨酸500μmol/L、1000μmol/L的培养基干预3天、7天、10天,通过免疫细胞化学检测细胞MRP1的表达。结果与对照组比较,谷氨酸干预后MRP1表达水平升高,3天表达水平稍升高,7天表达水平升高明显并可持续至10天余,低浓度组与高浓度组作用无明显差异。结论 MRP1在星形胶质细胞中仅少量表达;谷氨酸环境培养可促进体外大鼠星形胶质细胞MRP1的表达。     

SD大鼠脑皮层星形胶质细胞的原代培养及纯化方法改良

目的:探讨大鼠大脑皮层星形胶质细胞的培养方法,以获得纯度高的细胞进一步对其进行体外实验研究。方法:在Mc-Carthy方法基础上改用出生后1d的SD大鼠的大脑皮层,结合机械分离和胰酶消化后制备单细胞悬液接种,差速贴壁1h,培养14d以后上摇床以去除混杂细胞,细胞融合后传代,每次传代前都经历胰酶冲洗和差速贴壁,传3代后利用GFAP-FITC免疫荧光法对所获细胞进行鉴定。结果:经过原代传代及纯化,大脑皮层星形胶质细胞体外培养成功,并有较高的纯度。GFAP-FITC免疫荧光染色阳性。结论:经过合理取材、改良纯化方法后,可以更为简便得到纯度很高的星形胶质细胞。     

先天性高胰岛素血症误诊为癫痫的临床分析

目的 分析以惊厥发作为主要临床表现的先天性高胰岛素血症(CHI)患儿的临床特征、基因检测结果及误诊原因.方法 分析2017—2020年就诊的8例被误诊为癫痫的CHI患儿临床资料.结果 8例均因惊厥发作按癫痫收治入院,其中有5例新生儿期出现惊厥发作,其余3例婴幼儿期出现惊厥发作.平均误诊时间3个月,全部患儿经血糖及血胰岛...     

反义技术与移植物动脉硬化

近年来 ,随着组织配型、器官保存、外科手术及临床与实验诊断技术不断提高 ,尤其是环孢素Ａ(ＣｓＡ)、ＦＫ50 6等新型强效免疫抑制剂的不断问世与合理应用 ,急性排斥的发生已能良好控制 ,移植物的 1年存活率有了较大提高 ,但是远期疗效仍不理想。随着术后长期存活者的大量涌现 ,慢性排斥 (ＣＲ)已成为阻碍移植物长期存活的重要原因。移植物的慢性损害过程是所有实体器官移植的特征之一 ,寻找更加良好和特异的方法防止或阻断这一过程的发生与发展 ,是器官移植领域面临的重要课题。一、反义技术简介反义技术是近年来发展起来的一项新兴技术 ,…     

人工法分离血小板及冻存前后LDH比活性检测

我国绝大部分使用的血小板是机采血小板，但是随着无偿献血者所献全血的增多，其中的血小板成份又没有分离保存下来，使得大量的血小板资源被浪费。为进一步对全血内血小板进行有效分离保存，从根本上解决临床输注血小板供不应求的难题。本文对全血中血小板采集、离心、分离、添加二甲基亚砜(DMSO)、冻存、复温等条件进行了质量控制，检测了冻存前后不同时期乳酸脱氢酶(LDH)比活性，并与机采血小板中LDH比活性相比较。现报道如下。     

重组人促红细胞生成素在肿瘤相关性贫血中的应用

贫血是肿瘤患者的常见合并症, 既往治疗肿瘤相关性贫血多用输血,存在诸多缺点及风险.近年来重组人促红细胞生成素在肿瘤相关性贫血中的应用日益受到重视.现简述重组人促红细胞生成素的药物类别、适应证、用法用量、临床应用、缺点、不良反应、使用现状及应用限制等.     

人bcl-xL基因在转基因小鼠中的整合和表达

目的研究人bcl—xL基因在显微注射所产生的子代小鼠中的整合、转录和表达情况。方法采用PCR和Southern blot方法检测人bcl—xL基因在小鼠体内的整合；RT—PCR方法检测它们的bcl—xL mRNA水平；用Western blot及免疫组化法检测目的蛋白的表达情况。结果在显微注射所产生的转基因小鼠中，有4只为Southern blot检测阳性，并且在这4只小鼠及其子代中均检测到人bcl—xL的mRNA和过表达的目的蛋白。结论由于在这些小鼠中既有外源基因的整合，又有其mRNA和蛋白质的表达，所以，它们是真正的转基因动物。