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31.
32.
晚期糖基化终末产物受体真核表达载体的构建与表达 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 构建带HA标签的晚期糖基化终末产物受体真核细胞表达载体.方法 采用PCR方法从人cDNA文库中扩增RAGE基因编码区,使用常规酶切、连接方法将其重组至pcDNA3真核表达载体中,对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定.以RAGE/pcDNA3重组质粒为模板,运用突变方法在RAGE氨基末端信号肽后插入HA序列.利用Western blotting在HEK 293细胞中对经过测序鉴定的HA-RAGE\pcDNA3重组质粒的表达进行了检测.结果 RAGE/pcDNA3重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,HA-RAGE\pcDNA3重组质粒可在HEK 293细胞中表达.结论 成功构建了带HA标签的RAGE真核细胞表达载体,该载体能在真核细胞中表达,为进一步研究RAGE在细胞信号转导途径中的作用提供了一个重要的工具. 相似文献
33.
目的:为了研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导肺癌细胞凋亡的分子机制,寻找肺癌基因治疗的新方法。方法:建立TNF-α诱导LA795肺腺癌细胞凋亡的细胞模型;使用人胚肾293包装细胞制备丝裂原活化蛋白激酶激酶6(mitogen-activated protein kinase kinase 6,MKK6)及其结构活性和无活性突变体的重组腺病毒;使用激酶活性测定法检测细胞内MKK6的激酶活性。结果:TNF-α刺激可明显诱导LA795肺腺癌细胞MKK6激活;用TNF-α刺激肺腺癌细胞可明显诱导细胞凋亡;MKK6结构活性突变体也可明显诱导LA795细胞凋亡;而MKK6无活性突变体可明显抑制TNF-α诱导的LA795细胞凋亡。结论:TNF-α诱导LA795肺腺癌细胞凋亡是通过MKK6发挥作用的,MKK6的重组腺病毒有希望用于肺癌的基因治疗。 相似文献
34.
目的 探讨儿童外伤性青光眼的致病原因及防治措施.方法 对74例(74)眼儿童外伤性青光眼致病原因、治疗情况及预后进行回顾性分析.结果 74例(74眼)中,眼球挫伤64例占86.48%,眼球穿通伤10例占13.51%.伤后就诊时间为12 h至1个月,平均32.86 h,经治疗后(药物、手术)视力提高49例占66.21%,不变23例占31.08%,下降2例占2.7%;眼压控制正常65例占87.83%,眼压在25~30 mmHg间波动9例占12.16%.结论 儿童外伤性青光眼经及时、有效的治疗,可取得较好的疗效. 相似文献
35.
显微手术切除幕上胶质瘤120例 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨显微手术切除幕上胶质瘤的疗效。方法回顾性分析120例经显微手术切除的幕上胶质瘤病例。结果全切95例,占79.2%,大部分切除25例,占20.8%,出院时恢复良好103例,好转17例.偏瘫12例,无死亡病例。结论显微手术可以提高胶质瘤的全切率,对任何胶质瘤患者都应争取显微镜下手术切除,在保留功能的基础上最大程度的切除肿瘤,以获得最佳的预后,减少复发和死亡。 相似文献
36.
目的 对人类基因组工作草图公布以来卒中遗传学、基因组学领域已发表的论文进行文献计量学研究,分析该领域的研究现状、热点及发展趋势。方法 以一代测序(2000—2007年)、全基因组分型芯片(2008—2015年)和二代测序(2016年至今)为代表性技术,将2000年至今划分为3个阶段。在WebofScience核心合集检索脑血管病领域发表的遗传学、基因组学方面的英文文献,对文献的发表时间、地区、研究机构等信息进行汇总,使用VOSviewer 1.6.18进行统计分析并对结果进行可视化。使用H指数评估论文产出数量与论文水平。结果 共纳入8833篇英文文献。美国是卒中遗传学、基因组学领域文献的最主要贡献者,发文量高达3291篇,H指数为182,发文量和H指数在所有国家/地区中均居首位。中国发文1765篇,H指数为66,分别排名第2位和第10位。国际卒中遗传学联盟是该研究领域的重要参与者,联盟和主要负责人的发文量居所有作者的前20名。卒中遗传学、基因组学的研究热点从早期的关联分析和荟萃分析,逐步过渡到近几年兴起的孟德尔随机化研究。结论 在卒中遗传学、基因组学领域,我国虽然起步较晚,但在发文总量... 相似文献
38.
目的: 观察过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,Prdx4)蛋白表达的改变对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法: 采用脂质体瞬时转染法将表达质粒pcDNA3.0-HA-Prdx4转染HeLa细胞;LV-Prdx4 RNAi重组病毒感染HeLa细胞,构建Prdx4 shRNA HeLa细胞系沉默Prdx4的表达;用蛋白质印迹法证实Prdx4蛋白表达水平的变化;应用划痕愈合实验和Transwell迁移及侵袭实验分别检测细胞迁移及侵袭能力的变化。结果: pcDNA3.0-HA-Prdx4质粒转染组HeLa细胞的Prdx4蛋白表达水平明显上调(P<0.05),而Prdx4 shRNA HeLa稳定干扰细胞系Prdx4表达水平明显下调(P<0.05)。Prdx4过表达组HeLa细胞的迁移和侵袭能力明显增强,与空白对照组及空载体转染组比较,差异显著(P<0.01)。Prdx4表达干扰组HeLa细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制,与空白对照组及阴性对照组比较,差异显著(P<0.01)。结论: 上调Prdx4蛋白表达水平可促进HeLa细胞的迁移和侵袭,在宫颈癌的发生和发展过程中可能起重要作用;下调Prdx4蛋白表达水平可以明显抑制HeLa细胞的迁移和侵袭能力,Prdx4有可能成为临床治疗宫颈癌的一个潜在靶点。 相似文献
39.
目的:观察核不均一核糖核蛋白(hnRNP)K的表达与定位以及亚砷酸钠(NaAsO2)刺激NIH3T3细胞的反应情况及氧化应激变化,探讨JNK信号通路在hnRNP K蛋白聚集体形成中的作用。方法:构建重组载体pcDNA3-hnRNP K-HA,转染NIH3T3细胞,荧光显微镜观察内源性hnRNP K在细胞中的表达与定位,以及在NaAsO2不同刺激时间该蛋白聚集体的形成情况,并利用活性氧(ROS)检测试剂盒测定胞内ROS水平;给予JNK、MEK、PI3K/Akt、NF-κB和核转运等5种信号通路的抑制剂预处理后,观察聚集体的变化情况。结果:重组质粒构建正确,荧光显微镜观察显示hnRNP K主要定位于胞核中,而重组质粒转染NIH3T3细胞后,可见胞内有蛋白聚集体形成并随NaAsO2刺激时间的延长而递增,且过表达hnRNP K可抑制NaAsO2刺激细胞生成ROS;JNK信号通路抑制剂SP600125明显抑制聚集体的形成。结论:hnRNP K主要定位在NIH3T3细胞的胞核中,胞浆少量分布;NaAsO2可诱导NIH3T3细胞形成hnRNP K蛋白聚集体,此聚集体可抑制胞内ROS生成,且该聚集体的形成有赖于JNK介导的信号通路。 相似文献
40.
抗感染免疫是由天然(先天)免疫(innate immunity)和获得性(adapted immunity)免疫(适应性)共同介导的。病原微生物侵入机体后,天然免疫系统作为宿主的第一道防御线,对微生物进行识别和清除。天然免疫模式从低等生物到人类都非常保守,主要通过模式识别受体(PRR)对病原微生物表面保守、共有的基团,即病原体相关分子模式(PAMPs)进行天然识别。 相似文献