端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸对甲状腺癌细胞增殖的影响

目的研究甲状腺癌(TC)细胞中端粒酶逆转录酶(TERT)表达及其反义寡核苷酸(antisense oligo-nuc leotides,ASODN)对其表达和细胞增生的抑制作用,为甲状腺癌治疗探索基因治疗新途径。方法体外培养TC细胞,不同浓度的TERT ASODN和正义寡核苷酸(SODN)分别作用于体外培养的TC细胞,采用RT-PCR方法检测TERT mRNA的表达,四唑盐比色法(MTT)检测在不同浓度的TERT ASODN和SODN作用下TC细胞生长活性及其生长抑制率。结果体外培养TC细胞可表达TERT mRNA,在5、10μmol/L ASODN作用下,TERT mRNA的表达明显受抑制;TERT ASODN能明显抑制TC细胞增生活性,并呈剂量依赖性。结论TC细胞可表达TERT mRNA,一定浓度TERT ASODN能序列特异性地抑制TC细胞TERT mRNA表达和增生活性,有望进一步用于TC的治疗实验研究。     

荷VX2移植性乳腺癌兔区域淋巴组织靶向化疗的实验研究

目的:研究对荷VX2乳腺癌兔实施区域淋巴组织靶向化疗后的局部淋巴结药物浓度及治疗效果。方法:40只雌性新西兰兔随机分为A、B、C、D4组,每组10只,VX2肿瘤组织块悬液注射法建立乳腺癌模型,腋淋巴结最大径达到5mm时开始治疗。A、B组分别给予肿瘤周围皮下注射卡铂活性碳混悬液(carboplatinactivatedcarbonsuspension,CPCH)或卡铂水溶液(carboplatinsolution,CPSol);C、D组分别经耳缘静脉注射CPSol或生理盐水。A、B、C组每次治疗药物剂量5mg/kg,每48h重复给药1次,治疗3次,48h后切除肿瘤、腋窝淋巴结及所有发现的远处转移灶,测量治疗前后肿瘤及淋巴结体积变化,原子吸收光谱法(atomicabsorptionspectrometry,AAS)测定卡铂浓度,常规病理切片观察肿瘤及转移灶坏死情况,RTPCR检测肿瘤组织增殖细胞核抗原(PCNA)。结果:与静脉或局部注射CPSol相比,局部注射CPCH可明显增加淋巴结内的药物浓度,并对淋巴结癌转移灶表现出更为显著的疗效,淋巴结增长减缓,淋巴结转移癌细胞大量死亡,PCNA表达降低。静脉注射CPSol可有效抑制乳腺或远处转移灶内的癌细胞增殖,而局部注射CPSol或CPCH无此效果。结论:区域淋巴组织靶向化疗对乳腺癌淋巴途径转移是一种有效的治疗手段,可辅助用于全身治疗。     

血清CA19-9高于200U/mL325例临床评价

糖类抗原CA19-9(Carbohydrate antigen19-9)＞37 U/mL是诊断癌的临界值.我们对血清CA19-9升高＞200 U/mL的临床资料进行回归性分析,发现CA19-9对胰腺癌诊断的特异性随着数值的升高而增大,且＞1 000 U/mL.时,往往胰腺癌已进入晚期,无法根治性切除,总结报道如下.     

乳腺癌局部注射卡铂-活性碳后的淋巴趋向性研究

目的:研究乳腺癌原发灶周围皮下注射卡铂-活性碳混悬液(CP-CH)后是否提高腋窝淋巴结中的药物浓度。方法:32例乳腺癌患者随机分为两组,每组16例。在乳腺癌原发灶周围皮下,一组患者注射CP-CH,另一组患者注射卡铂水溶液(CP-Sol)作为对照。给药后1、12、24、72小时分别行乳腺癌改良根治术(每组4例),术中常规行腋窝淋巴结清扫,原子吸收光谱法测定淋巴结内卡铂浓度。结果:CP-CH组给药后1、12、24、72小时淋巴结中卡铂浓度分别为11.23±5.66μg/g、26.40±11.18μg/g、18.72±7.14μg/g、15.44±6.92μg/g,CP-Sol组在相应各时间点则分别为0.24±0.06μg/g、0.13±0.08μg/g、0.12±0.04μg/g,第72小时淋巴结内未检测出卡铂。两组间有统计学显著差异(P<0.01)。结论:乳腺癌局部注射CP-CH后有良好的淋巴趋向性,可显著提高腋窝淋巴结中的药物浓度。     

Excel残数法计算房室模型PK参数

目的:Excel残数法计算不同房室模型、不同给药途径的药物动力学(Pharmacokinetics, PK)参数,并与Phoenix WinNonlin、GastroPlus、PK solver统计软件的计算结果进行对比。方法:采用Excel残数法计算一房室静脉注射、血管外给药和二房室静脉注射、血管外给药药物的PK参数,并与Phoenix WinNonlin、PK solver和GastroPlus统计软件计算所得结果进行比较,评估各软件计算PK参数的一致性及准确性。结果:计算一房室静脉注射给药、血管外给药和二房室静脉注射给药、血管外给药的药代动力学参数,Excel残数法与其他3个统计软件计算结果无显著差异,4种评价方法准确性及一致性均较高。结论:残数法可准确计算房室模型药物的PK参数,且与Phoenix WinNonlin、PK solver、GastroPlus统计软件计算结果一致。     

Excel计算特殊制剂的群体生物等效性

目的:根据美国FDA颁布的布地奈德混悬液相关指导原则,利用Excel软件计算特殊制剂的体外群体生物等效性。方法:根据美国FDA中布地奈德混悬液群体生物等效性评价指导原则,以指导原则中布地奈德粒径数据为基础,使用Excel软件中函数公式计算其群体生物等效性结果,并与指导原则中结果进行比较。结果:Excel软件计算布地奈德混悬液的群体生物等效性结果与指导原则中结果完全一致,以参比制剂确定检测参数的群体生物等效性,H_ηR<0,受试制剂与参比制剂满足生物等效,二者疗效与安全性一致。结论:特殊制剂的体外群体生物等效性评价至关重要,在无其他专业软件情况下,Excel软件可实现快速、准确地计算特殊制剂的体外群体生物等效性。     

血管纠集征的CT研究

目的:评价血管纠集征在常规横断位及三维重建中的出现率,探讨其对良、恶性肺结节的诊断价值。方法:回顾性分析病理和临床证实的良、恶性肺结节47例,分别统计血管纠集征在横断面及三维重建图像上的出现率,并判断结节处血管有无增粗。结果:(1)在横断面及三维重建中,恶性肺结节血管纠集征的出现率均分别高于良性结节,但两者之间无明显统计学差异(P>0.05)。(2)恶性肺结节三维重建后血管纠集征的出现明显高于横断面,两者之间有明显的统计学差异(P<0.01)。(3)恶性肺结节三维重建后血管增粗数明显高于横断面,两者之间有明显的统计学差异(P<0.01)。(4)恶性肺结节三维重建后血管增粗数明显高于良性结节,两者之间有明显的统计学差异(P<0.01)。结论:(1)血管纠集征不是恶性肺结节的特异性征象,但在恶性肺结节中出现率略高。(2)结节处血管增粗高度提示为恶性结节。     

全数字化乳腺摄影显示钙化的分析

目的 探讨全数字化乳腺摄影（FFDM）对钙化的显示率及钙化在良、恶性疾病中的诊断价值。方法 收集2003年12月-2004年10月门诊及体检2000例编号连续患者,并对其中经手术病理证实的乳腺钙化47例,恶性23例,良性24例,就钙化的密集度、形态特征进行分析。结果 2000例连续病例中,乳腺钙化的显示率52．4%（1048／2000）。钙化分布：双乳324例（30．9％）、单乳724例（69．1％）。其中,圆圈状、斑片状、轨道型钙化200例（19．1％）;圆圈状伴点状钙化158例（15．1％）;点状钙化657例（62．7%）;长杆状（长径比短径≥3）、短杆状（长径比短径〈3）和（或）叉状钙化及点状钙化并存14例（1．3%）;长杆状及点状钙化并存4例（0．4%）;短杆状和（或）叉状及点状钙化并存15例（1．4%）。47例具有钙化征象并经手术病理证实的病例,钙化密集度、有无长杆状及有无短杆状和（或）叉状钙化有显著统计学意义P〈0．05。结论 全数字化乳腺摄影钙化显示率高,钙化密集度及形态特征对乳腺良恶性病变鉴别诊断有重要价值。     

MUC1基因疫苗和GM-CSF对小鼠的细胞免疫和体液免疫应答

目的:观察MUC1基因疫苗和GM-CSF共免疫对小鼠特异性细胞免疫和抗体水平的影响.方法:采用股四头肌肌肉注射,将构建的MUC1基因疫苗pcDNA3.1-MUC1免疫雌性Balb/c小鼠,每3 wk 1次,共3次.MUC1基因加GM-CSF组于每次基因免疫后1,3,5 d,皮下注射GM-CSF 100 μL.最后1次基因免疫后第3周接种表达MUC1的EMT6小鼠乳腺癌细胞.2 wk后观察、记录肿瘤的生长情况.流式细胞仪检测外周血CD4 和CD8 淋巴细胞亚群的百分比和比值.ELISA方法检测小鼠血清MUC1特异性抗体的水平.4 h 51Cr释放法检测小鼠脾特异性CTL的杀伤活性.结果:淋巴细胞亚群:与pcDNA3.1对照组相比,MUC1基因疫苗预防组的CD8 T淋巴细胞升高,差异有统计学意义(P《0.01),CD4 T淋巴细胞升高,差别无统计学意义;加GM-CSF佐剂预防组与单独MUC1疫苗预防组相比,CD4 T淋巴细胞升高,差异有统计学意义(P《0.01),CD8 T淋巴细胞升高差别无统计学意义.小鼠血清MUC1抗体水平:与对照组相比,MUC1基因疫苗预防组抗体水平升高,差异有统计学意义(P《0.05);加佐剂组与预防组相比,抗体水平升高但差别无统计学意义.在不同效靶比时, MUC1基因疫苗加GM-CSF组与单独MUC1基因免疫组相比较,特异性CTL对EMT6靶细胞的杀伤率差异显著(P《0.05).结论:MUC1基因疫苗可诱导小鼠产生特异性CD8 T淋巴细胞及体液免疫应答, GM-CSF对小鼠CD4 T淋巴细胞具有一定的调节作用.     

HCN4基因修饰大鼠MSCs体外诱导获得的心脏起搏样细胞动作电位检测

目的 探讨超极化激活及环化核苷酸调控的阳离子通道亚型4(hyperpolarization-activated cyclic nucleotidegated cation channel 4,HCN4)基因修饰大鼠MSCs体外诱导分化的心脏起搏样细胞的动作电位特性.方法 以HCN4基因修饰大鼠MSCs体外诱导获得的具有自发搏动的心脏起搏样细胞为实验组,同期培养的原代乳鼠窦房结细胞为对照组,采用全细胞膜片钳技术对两组细胞的动作电位进行检测.结果 心脏起搏样细胞及原代培养乳鼠窦房结细胞均可记录到具有舒张期自动去极化的动作电位,心脏起搏样细胞的动作电位特性与原代培养的乳鼠窦房结细胞相比,其静息电位、动作电位幅度及动作电位周期均无显著性差异(P＞0.05),但阈电位较原代培养的乳窦鼠房结细胞显著降低(P＜0.01).结论 从电生理角度证实,心脏起搏样细胞的特性与原代培养的乳鼠窦房结细胞相似.