miRNA沉默缺氧诱导因子1α基因对HepG2细胞增殖的抑制作用

目的 探讨以miRNA沉默缺氧诱导因子1 α(HIF-1 α)基因,观察其对肝癌细胞株(HepG2细胞)增殖的抑制作用.方法 构建靶向HIF-1 α基因miRNA干扰载体,转染HepG2细胞,以定量PCR和Western blot分析靶基因和蛋白的表达;构建含缺氧反应元件双荧光素酶报告基因检测转染后相对光单位值;酶联免疫吸附法定量检测血管内皮生长因子和血管生成素2的表达;细胞凋亡及增殖周期以流式细胞仪和膜联蛋白/碘化丙啶(V-FITC/PI)双重染色法分析.采用t检验和两因素方差分析及q或q'检验分析计量资料.结果 HepG2细胞在转染HIF-1 αmiRNA后72 h,HIF-1 α在转录和翻译水平上分别下降87%和56%双荧光素酶报告基因减少46%,血管内皮生长因子和血管生成素2分别减少54%和36%;癌细胞凋亡率为22.46%±0.61%(P＜0.01),G1和S期比例分别为61.49%±1.12%和22.40%±0.58%;联合阿霉素处理后,凋亡率增至36.99%±0.88%,G1、S期比例分别为65.68%±0.91%和19.47%±1.34%.结论 HIF-1 α miRNA可抑制HIF-1 α基因表达,联合阿霉素有效调控肝癌细胞周期,促进凋亡、抑制增殖.

Abstract：

Objective To investigate the effect of miRNA silencing HIF-1 α gene on the proliferation of HepG2 cells. Methods The eukaryotic expression plasmids of HIF- 1α miRNA and report gene containing hypoxia-reponse element were constructed and trasnfected into HepG2 cells. The expressions of HIF-1 α gene and protein were determined by real time-PCR and Western blotting. The expressions of HIF1 α, vascular endothelial growth factor (VEGF) and angiopoietin-2 (Ang-2) were quantitatively detected by ELISA. The alterations of cell cycles and apoptosis rate were quantitatively measured by flow cytometry and Annexin V-FITC/PI double dyeing assay. Results 72 h after transfection the downregulations of HIF-1 α mRNA and protein were 87% and 56% respectively, and the decrease of target gene was 46% in the report gene, 54% in VEGF and 36% in Ang-2, respectively. The apoptotic ratio of HepG2 cells was 22.46 ± 0.61%(P ＜ 0.01). The cell cycle changed greatly at the ratio of G1 (61.49 ± 1.12%) and S (22.40 ± 0.58%, P ＜0.01). After being combined with doxorubicin, the apoptotic ratio increased to 36.99 ± 0.88% and the ratios of G1 and S phases were upregulated to 65.68 ± 0.91% and 19.47 ± 1.34% respectively. Conclusion HIF-1α miRNA or / and doxorubicin can regulate the growth cycles of HepG2 cells, promote the cell apoptotosis and inhibit the cell proliferation.     

膜联蛋白A2过表达在肝细胞癌发生发展中的作用

膜联蛋白A2与S100A10组装成异四聚体转位细胞膜从而激活相关信号通路或者Ser^25磷酸化以后进入细胞核参与DNA合成和细胞增殖,可调节血管形成、与肝细胞癌（HCC）形成与预后相关。本文综述了膜联蛋白A2的分子构成、功能及对HCC诊断和预后价值的研究进展。     

肝病患者外周血血管生成素-2定量检测的临床价值分析

目的 观察肝病患者外周血中血管生成素-2(Ang-2)的表达水平,探讨与肝癌(HCC)发展关系及临床价值.方法 收集不同肝病患者外周血标本,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测Ang-2浓度,并分析与血管内皮生长因子(VEGF)相互关系.结果 肝病患者血Ang-2水平,正常对照组为(17.4±2.6)ng/ml、急性肝炎组为(23.5±6.5)ng/ml、慢性肝炎组为(20.9±7.1)ng/ml,肝硬化组为(25.5±5.8)ng/ml和肝癌组为(40.8±3.5)ng/ml;Ang-2水平随肝病进展呈进行性增加,肝癌组明显高于对照组和良性肝病组(P<0.001),且Ang-2与VEGF改变呈显著正相关(r=0.769,P=0.026);如以血Ang-2>35ng/ml为界,肝癌组95%异常,肝硬化组1例异常(2.9%),其他组未见异常,与AFP联检对肝癌具有互补诊断价值.结论 Ang-2过表达与肝癌发展密切相关,且有助于肝癌的诊断与鉴别.     

GPC-3和HIF-1α异常表达对肝癌诊断与预后的临床价值

目的 分析肝癌组织缺氧诱导因子(HIF)-1α和磷脂酰肌醇蛋白多糖(GPC)-3表达及其临床意义.方法 以自身配对法分别收集经手术切除的36份肝癌及癌周组织,以免疫组织化学法分析肝癌及癌周组织HIF-1α和GPC-3的表达及分布,探讨其临床意义.结果 肝癌及癌周组织HIF-1α和GPC-3表达呈棕黄色,颗粒状.前者主要定位于胞浆中,中央静脉周围明显;后者定位于胞浆和细胞膜.癌组织HIF-1α表达阳性率为80.6%,明显低于癌旁的100.0%(P<0.01),与肿瘤大小相关,其强度与分化程度负相关,与HBV感染、肿瘤数目及AFP浓度均无关;癌组织GPC-3阳性率为80.6%,明显高于癌旁的41.7%(P<0.01),与分化程度、肿瘤数目、AFP和HBsAg阳性与否之间未见明显相关.结论 肝癌组织HIF-1α和GPC-3的异常表达反映肝癌的生物学行为,可作为诊断肝癌和浸润转移的有用指标.     

不同地区慢性肝病患者HCV感染株间的比较评价

目的：旨在对肝癌发地区与低发地区慢性肝病患者中ＨＣＶ感染特征进行比较分析，方法：分析南通过地区慢性肝炎和肝癌患者中ＨＣＶ和ＨＢＶ感染状态，ＨＣＶ核心基因的变异，并与台湾及北京地区的文献资料进行结果：南通地区肝病患者中，ＨＣＶ抗体的阳性率为６．３％，低于北京（２０．７％）和台湾地区（１７．２％）乙肝与丙肝的双重感染率为３．９％，其值与台湾地区（５．７％）相近，但明显低于北京（１５．０％）地区；在ＨＢ     

重视分子标志物对肝癌早期诊断和转移与复发监测的价值

基因组学和蛋白组学技术已用于肝癌(HCC)的早期发现和术后复发与转移监测,分子病理学证实,≤3cm的小肝癌存在更多的早期生物学和病理学的特征,而＞3 cm肝癌已具有较多的侵袭性生长、扩散的恶性生物学特性,HCC转移、术后复发是制约治愈率的重要因素.     

大型综合性医院现代过程中图书馆的建设与作用

互联网络日益普及,电子出版物及电子图书馆迅速发展和数字图书馆的出现,给医院图书馆的发展带来了新的机遇。目前图书馆的藏书趋向智能化、集团化、社会化,服务向自动化多元化方向发展。医院图书馆在教学医院的医疗、科研、教学中处特殊地位,因为它是医院的文献信息中心,是医护人员及医学生(尤其博后、博士、硕士)汲取医学信息、知识更新、继续再教育及从事医学研究必不可少的重要场所,在医院的“科技兴院”中起重要作用,与医院的发展和现代化建设密切相关。医院图书馆现行的传统模式、运行机制、管理体制、收藏结构、服务手段远远不能适应…     

银杏石榴煎治疗银屑病疗效观察及患者血清中肿瘤坏死因子-α、白介素-6及白介素-8表达水平的变化

目的采用中药银杏石榴煎治疗进行期寻常性银屑病，观察该煎剂对银屑病疗效并检测治疗前后患者血清中肿瘤坏死因子（TNF）-α、白介素（IL）-6及IL-8表达水平变化。方法银杏石榴煎治疗前后对银屑病患者皮损进行PASI评分，采用ELISA法检测银屑病患者治疗前后和正常对照者血清中TNF—α、IL-6及IL-8的表达水平变化。结果①银杏石榴煎可显著改善银屑病患者临床症状，治疗前后PASI评分明显下降（P〈0．01）。②患者血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平明显高于正常对照（P〈0．01），治疗后其表达水平较治疗前明显下降（P〈0．05）。③患者体内TNF-α及IL-8表达水平与PASI积分呈正相关（P〈0．05）。结论银杏石榴煎为治疗银屑病的有效药物；患者血清TNF—α、IL-6、IL-8表达水平与银屑病患者的病情变化密切相关。     

丙型肝炎病毒核心蛋白基因表达及其核苷酸序列分析

以基因扩增及重组ＤＮＡ技术，从长江下游南通地区急性丙肝和慢性丙肝患者血清中成功地克隆了丙肝病毒核心蛋白基因（ＨＣＶ－Ｙ１和ＨＣＶ－Ｙ２）。该段基因在大肠杆菌内已得到高效表达，它们的序列分析发现核苷酸组成的同源性为９３．２％，与已报告的ＨＣＶ株比较属于ＨＣＶ－Ⅱ型。这对于我国ＨＣＶ的基因分型以及开发丙肝核心蛋白抗体检测，早期诊断丙肝感染都具有良好的应用前景。     

肝病患者丙型肝炎病毒感染及C基因分型

以第２代抗体法分析急、慢性肝病患者中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染，并对ＨＣＶ阳性者以型别特异的逆录聚合酶链反应进行Ｃ基因分型。在６４４例肝病患者中，第２代抗体阳性率为肝癌７．３％，急性肝炎３．４％，慢性肝炎６．６％，肝硬化６．６％；非肝病患者１０６例中，阳性率为３．８％。慢性肝炎ＨＢＶ感染达８９．５％。４１例ＨＣＶ阳性者的Ｃ基因分显示：Ⅱ型占８５．４％、Ⅲ型７．３％、Ⅱ／Ⅲ混合型７．３％，未见其他型