一种新型的具有免疫调节和介导DNA基因治疗的蛋白质载体的研制

目的:研制一种具有调节宿主免疫系统,同时又能包装核酸进入肿瘤细胞的新型蛋白质载体。方法:利用基因工程技术,将人乙肝病毒核心抗原(HBcAg)的-COOH端和靶向肿瘤的整和素配体RGD肽与谷胱甘肽还原酶(GST)在大肠埃希菌中融合表达,经分子筛和GST亲和纯化后,获得DNA包装蛋白GST-RGD-ΔHBcAg。此包装蛋白用FITC标记后与前列腺癌PC-3细胞孵育,观察进入细胞情况;并用此包装蛋白包装含绿色荧光蛋白GFP基因的DNA载体pEGFP-N1,转染PC-3细胞,观察绿色荧光蛋白表达。此外,用包装蛋白GST-RGD-ΔHBcAg免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,检测血清IgG1和IgG2a抗体水平。结果:本研究应用原核表达系统成功地表达并纯化出DNA包装蛋白GST-RGD-ΔHBcAg;荧光显微镜下观察到包装蛋白GST-RGD-ΔHBcAg能进入到PC-3细胞,并能携带绿色荧光蛋白基因进入PC-3细胞并表达;该包装蛋白免疫BALB/c小鼠后,小鼠血清IgG1和IgG2a抗体水平同时升高。结论:本研究研制的DNA包装蛋白GST-RGD-ΔHBcAg可作为基因治疗载体,并能对宿主的免疫系统起调节作用,为肿瘤的免疫——基因治疗载体提供一个新的选择。     

临床输血质量管理体系的建立

为确保血液和血液成分的安全和合理使用,必须加强临床输血的质量管理。根据ISO9001:2000标准,文中建立了有效的临床输血质量管理体系,其关键控制点涵盖了人员、设备、试剂、环境、血液储存、运输与发放、输血不良反应和计算机管理系统等。编写的质量管理体系文件包括质量手册、程序文件、标准操作规程和质量记录,所有有效文件必须经授权和受控。     

O型悬浮红细胞ABO抗体效价研究

目的:测定O型悬浮红细胞ABO抗体效价,探讨未交叉配合O型悬浮红细胞紧急输注的安全性和可行性. 方法:采集100份O型全血,分离制备成悬浮红细胞和血浆制品,测定全血、悬浮红细胞储存第1、7、14 d时的IgM、IgG抗A、抗B抗体效价,并进行比较. 结果:全血IgM抗体效价主要分布于4～128,IgG抗体效价主要分布于16～256;悬浮红细胞IgM抗体效价主要分布于4～32,IgG抗体效价主要分布于8～128,与全血相比均明显下降(P<0.01).悬浮红细胞储存第1、7、14 d间抗体效价虽有所下降,但差异无显著性意义(P＞0.05). 结论:O型悬浮红细胞的ABO抗体效价较低,推断其未经交叉配合的紧急输注也是安全的.     

循环内皮细胞在狼疮性肾炎血管病变诊断中的应用

目的：检测狼疮性肾炎（LN）患者循环血内皮细胞（CECs），探讨其在肾脏血管病变的诊断和判断病情中的作用。方法：60例经肾活检诊断为LN患者，其中30例伴血管病变患者，30例不伴血管病变患者。正常对照为30名健康志愿者。抽取外周血，采用免疫磁珠分离方法计数CECs的数量，同时进行血清肌酐、尿蛋白和尿红细胞等临床项目检查。结果：不伴血管病变组LN患者CECs数目与正常对照组相比差异无统计学意义，伴血管病变组患者CECs数目显著高于不伴血管病变组和正常对照组（P〈0．01）。伴血管病变组患者CECs与血清肌酐水平呈正相关（r=0．513，P〈0．01）。在伴血管病变LN患者中，合并血栓性微血管病变（TMA）患者CECs数量明显高于不伴有TMA患者（P〈0．01）。结论：CECs检测不仅能反映LN患者血管病变的存在，而且还能作为判断血管病变严重程度的指标。     

相变保温材料在血液长途运输中的应用

目的探讨以相变保温材料作为悬浮红细胞长途运输保温材料的可行性。方法在分别装有悬浮红细胞54U的简易运血箱和本院研发的运血箱中,各放置自行研制的相变保温材料12袋,于运输途中火车停站时观察运血箱中温度。结果在近72h的运输过程中,悬浮红细胞的温度始终维持在1—7℃,达到运输红细胞的温度要求。结论利用该相变保温材料可有效保障72h以内血液运输的温控要求。     

内皮祖细胞生物学特性及其临床应用研究进展

内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）是血管内皮细胞的前体细胞，即能分化为成熟血管内皮细胞的祖细胞。随着对EPC功能和影响其分化、生存、归巢和组织分布因素的了解，EPC作为临床诊断、预后判断和治疗方法将有广阔的前景。本综述总结了近年来内皮祖细胞生物学特性及临床应用方面研究进展，内容包括内皮祖细胞的表型和功能特征，内皮祖细胞的动员、释放和分化，内皮祖细胞的数目和募集及内皮祖细胞的临床应用。     

脐带造血干细胞和巨核细胞microRNA表达谱的差异

目的探讨定向诱导造血干细胞分化为巨核细胞和血小板的分子机制。方法将脐带造血干细胞培养后,分离巨核细胞,分别提取造血干细胞和巨核细胞总RNA,进行microRNA芯片分析。结果与造血干细胞相比,巨核细胞中表达上调超过2倍的microRNA有183个,下调超过2倍的microRNA有139个。结论造血干细胞和巨核细胞microRNA表达谱存在差异,尤其是多个microRNA与定向分化巨核细胞相关。     

多次机采血小板对献血员血常规的影响

目的：监测机采血小板献血者的血常规,评估多次机采血小板对献血者健康状况的影响。方法：分别检测献血者献血前和献血后1个月和6个月血常规,并进行对比分析。结果：白细胞计数、淋巴细胞比率、单核细胞比率、中性粒细胞比率、淋巴细胞计数、单核细胞计数和血小板计数等血液常规项目在机采血小板前后没有明显改变。结论：体检合格的血小板献血者,定期单采血小板对献血员的血常规和健康状况没有明显影响。     

持续质量改进程序减少输血前标本差错的应用研究

目的探讨持续质量改进程序(continuous quality improvement,CQI)对减少输血前标本差错的效果。方法统计2007年7月~2011年3月我科收到的输血前血液标本169599份,其中2007年7月~2009年6月79115份(实施CQI前),2009年7月~2011年3月90484份(实施CQI后)。对所有标本实施两次ABO血型验证。自2009年7月起,针对错误标识和错误采集的标本采取CQI过程,比较实施CQI前后的错误标识标本和校正的错误采集标本比例。结果实施CQI后,错误标识标本比例从1/290增加到1/207,但随着时间进展而逐渐下降;校正的错误采集标本比例从1/1485降至1/4133,并维持在较低水平。结论实施CQI有助于改进标本采集过程,减少标本采集错误。     

干燥综合征小鼠中MDSCs数量及功能变化

目的通过检测干燥综合征(Sj?gren’s syndrome, SS)模型小鼠中髓系来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)数量及功能变化,旨在揭示干燥综合征发病机制,并为其临床治疗提供新依据。方法本研究选取公认的非肥胖性糖尿病(non-obese diabetic,NOD)小鼠作为干燥综合征模型,分别检测4、8、10和12周龄NOD小鼠唾液流量变化;HE染色观察NOD小鼠颌下腺淋巴细胞浸润情况;并采用流式细胞术检测不同周龄NOD小鼠MDSCs数量及功能变化。结果随着NOD小鼠干燥综合征病情的发展,其唾液流量逐渐减少,颌下腺淋巴细胞浸润灶的数量及浸润面积明显增加;外周血中MDSCs比例显著升高;与对照组小鼠相比具有SS样症状的NOD小鼠MDSCs表面的未成熟标志物表达量明显降低。结论 MDSCs数量和功能伴随SS的发展而改变。靶向MDSCs可能成为干燥综合征患者治疗的新靶点。