经点突变的花生主要过敏原Ara h2低致敏原的制备与鉴定

目的构建经点突变的Ara h 2表达载体,表达并纯化该蛋白,鉴定其过敏原性。方法将Ara h 2基因进行点突变,并将其序列进行合成,再将合成后的基因连入原核表达载体pET-32a(+)上,然后转入BL21(DE3)宿主表达菌中;IPTG诱导表达;通过Ni2+亲和层析(FPLC)纯化目的蛋白;Western-blotting和ELISA检测该重组蛋白的过敏原性。结果测序结果表明合成后的序列成功转入原核表达载体pET-32a(+)上。重组蛋白纯化后经SDS-PAGE鉴定,目的蛋白大小与理论值相符。Western-blotting和ELISA结果均表明经点突变的Ara h 2蛋白(M-Ara h 2)与重组的Ara h 2(R-Ara h 2)蛋白相比,结合花生过敏病人混合血清中IgE显著降低。结论成功构建了经点突变的Ara h 2表达载体,初步的体外实验表明该基因表达的重组蛋白具有低致敏原的潜能。     

甘草甜素对接触性皮炎小鼠表皮内结合珠蛋白的影响

目的探讨甘草甜素对接触性皮炎小鼠表皮内结合珠蛋白的影响。方法 126只接触性皮炎小鼠分别给予生理盐水、不同剂量的甘草甜素及地塞米松。采用RT-PCR和原位杂交的方法检测接触性皮炎小鼠表皮内结合珠蛋白的表达。结果甘草甜素5 mg/kg和10 mg/kg组,激发后24和48 h表皮内结合珠蛋白表达增强,甘草甜素80 mg/kg组和地塞米松1 mg/kg组,激发后24和48 h表皮内结合珠蛋白表达减弱或消失。结论低剂量甘草甜素能增强接触性皮炎小鼠表皮内结合珠蛋白的表达,而高剂量甘草甜素则减弱结合珠蛋白的表达。     

护理知识门户构建研究

目的 为了实现护理领域知识管理,促进护理管理信息化,提高护理工作的效率.方法 利用现代化信息技术及网络知识服务方法,设计和实现护理知识门户的系统架构.结果 整合护理信息门户、护理信息系统,同时构建个性化知识推荐和护理知识网络服务技术模块,从而构建了护理知识门户.结论 护理知识门户能够有效提高护理人员信息获取能力和知识学习能力,并促进护理隐性知识向护理显性知识的转变.     

结合珠蛋白在银屑病皮损及皮损周边外观正常皮肤中的表达

目的 从mRNA及蛋白质水平研究结合珠蛋白在银屑病皮损及皮损周边外观正常皮肤中的表达,探讨其与朗格汉斯细胞的关系及在银屑病发病中的作用.方法采用免疫组化、免疫荧光双标记和原位杂交技术检测银屑病皮损及皮损周边外观正常皮肤中结合珠蛋白的表达.结果与正常人皮肤相比,银屑病皮损处角质形成细胞中结合珠蛋白mRNA的表达均明显增强(P＜0.001);皮损周边外观正常皮肤中的表达与正常人皮肤差异无显著性(P＞0.05).免疫组化显示:皮损处部分角质形成细胞胞浆中有结合珠蛋白表达;皮损及皮损周边外观正常皮肤中均可见结合珠蛋白在部分朗格汉斯细胞中呈阳性表达,且两者中结合珠蛋白阳性朗格汉斯细胞与朗格汉斯细胞总计数的比值较正常皮肤显著增高(P＜0.001).结论银屑病皮损处角质形成细胞中结合珠蛋白mRNA的表达增强,并能合成结合珠蛋白.合成结合珠蛋白的角质形成细胞可能在银屑病发病机理中起负反馈调节作用。     

驻湘武警部队30岁以上干部健康体检结果分析

为了解武警部队干部的健康状况,掌握疾病发生动态,为制定疾病预防控制策略提供科学依据,我们严格落实干部体检制度,并建立健康体检档案,现将2002年356名干部体检结果进行初步分析。     

花生过敏原Ara h 8的克隆表达、纯化及免疫学鉴定

目的:克隆花生主要过敏原Ara h 8基因,表达并纯化该蛋白,检测其免疫活性。方法:提取花生总RNA,设计特异性引物,RT-PCR克隆花生Ara h 8基因;将反转录的基因连入pMD19-T Simple Vector,提质粒酶切鉴定并测序。将测序正确的片段连入原核表达载体pET-32a(+)上,并转入BL21(DE3)宿主表达菌中;IPTG诱导表达;通过Ni2+亲和层析(FPLC)纯化目的蛋白Ara h 8;Western blot检测该重组蛋白的免疫原性。结果:测序结果表明克隆的花生Ara h 8基因片段全长为474 bp,编码157个氨基酸,与GenBank中蛋白序列100%相同。重组蛋白纯化后经SDS-PAGE鉴定,目的蛋白大小与理论值相符。Western blot结果表明该蛋白与花生过敏病人混合血清中IgE结合,具有免疫原性。结论:成功克隆并表达纯化了花生过敏原Ara h 8,该基因表达的重组蛋白具有良好的免疫原性。     

Ara h2三聚体重组蛋白的制备及其低致敏原性鉴定

目的制备花生主要过敏原Ara h 2三聚体重组蛋白并检测其过敏原性。方法利用分子生物学的方法将3分子的Ara h 2依次串联起来,并将其整合到原核表达载体pET-32a(+),再转化到感受态Origami中;然后利用IPTG诱导其表达;通过Ni2+亲和层析纯化三聚体重组蛋白;Western-blotting和ELISA检测目的蛋白的过敏原性。结果测序结果表明Trimer成功整合到pET-32a(+)上。三聚体重组蛋白纯化后经SDS-PAGE鉴定,蛋白大小与理论值相符。Western-blotting和ELISA结果表明Trimer与重组的Ara h 2(r-Ara h 2)蛋白相比,结合花生过敏病人混合血清中IgE的能力有所降低。结论成功制备花生主要过敏原Ara h 2三聚体重组蛋白,初步的体外实验表明该重组蛋白具有低致敏原的潜能。     

356名武警干部血尿酸的调查分析

痛风是机体内嘌呤代谢紊乱引起的疾病，严重影响人们的身体健康。高尿酸血症(High Uric Acid，HUA)是痛风指标及前期表现。由于我国人民生活水平的普遍提高，饮食结构发生改变，富含嘌呤及核蛋白食物摄取量明显增多，HUA发病率呈上升趋势^[1]，已成为现代文明社会的常见病、多发病。笔者结合我总队武警干部年度体检，对30岁以上干部SUA进行了调查及初步分析。     

经尿道电解治疗前列腺增生症的探讨(附35例报告)

前列腺增生症(BPH)初期尚能排尿,尽管不畅,尿流细,尿次多,常认为是无关紧要的正常现象.不少患者直至尿流点滴失禁、尿潴留方来就诊.往往已合并较严重的内科疾病,而不能耐受开放手术、经尿道电切(TURP)或电汽化术(TUVP).一般只能给予反复留置尿管或膀胱造瘘维持生存,实为痛苦.近几年,我们探索经尿道电解治疗的高龄高危的PBH患者,获得了较满意的效果.