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目的:构建HSV1 型胸苷激酶基因部分缺失的重组质粒并进行序列测定。方法:以p UC18/ TK 重组质粒DNA 为模板,用PCR 方法扩增TK5′端503bp 基因片段,并将扩增的片段克隆入载体p UC18 中(p UC18/TK1) ;用Pst I 和Hind Ⅲ双酶切pUC18/ TK, 获得TK3′端383bp 片段, 将此酶切片段克隆入pUC18/ TK1 中, 并进行测序。结果: 构建成重组质粒pUC18/ TK- 。经酶切鉴定获得1 条约900 bp 的基因片段; 序列测定证实, HSV117syn + TK 基因缺失了第493 ~744 位251 对碱基。结论:成功地构建了部分缺失的HSV1/TK- 基因重组质粒,为研制其突变株奠定了基础。 相似文献
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单纯疱疹病毒(HSV)分为两型,HSV-1和HSV-2,可引起龈口炎 口唇疱疹 皮肤疱疹 疱疹性角膜炎 生殖器疱疹 疱疹性脑炎 宫颈炎等,并认为与宫颈癌的发生有关。近年来,在性传播性疾病(STD) 妇幼保健和优生优育方面,HSV的危害愈来愈受到高度重视,为了更有效控制HSV感染的流行,本文建立了一种可快速 特异检测HSV抗原的双McAb-ELISA夹心法。 相似文献
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用单纯疱疹病毒单克隆抗体(HSV-McAb)ELISA法检测了62例病毒性脑炎患儿脑脊液中HSV特异性抗原(HSV-Ag),20例其他脑神经系统疾患者。32例脑炎患儿同时取脑脊液和血清作HSV-IgG抗体水平测定比较。病毒性脑炎患儿的HSV-Ag阳性检出率为20.6%,与血清/脑脊液的HSV-IgG测定比较,灵敏性84.6%,特异性94.7%。用ELISA法检测脑脊液中HSV-Ag是一种简便、快速、灵敏、特异的方法,对疱疹性脑炎具有早期诊断价值。 相似文献
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用同胞选择和ELisa分析鉴定了原来产生IgM的少数杂交瘤亚克隆,这些杂交瘤亚克隆已转换产生各种IgG亚类。此技术可鉴定10~6或更低的转换频率。多数转换细胞的免疫球蛋白产量高于亲代细胞系,另外还鉴定出了从产生IgG一种亚类到另一种亚类的第二代次转换。 相似文献
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地高辛具有很低的治疗比率。因此既要达到有效浓度又要预防中毒,就必须监测血清地高辛水平。多数免疫分析法系用抗地高辛的多克隆抗体,这些抗体常与地高辛相关药物或其代谢产物呈明显交叉反应。作者制备了抗地高辛的小鼠单克隆抗体且将其用于检测血清地离的的竞争性酶免疫测定法中。测定方法如下:在有血清样本,地高辛标准品或地高辛竞争剂辛 相似文献
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单纯疱疹病毒分子疫苗的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
单纯疱疹病毒(HSV)疫苗的研究已经深人到分子水平,HSV 的亚单位疫苗,基因工程疫苗、合成肽疫苗和抗独特型疫苗的研究进展迅速。本文概述这些分子疫苗研制的有关原理及已报道的一些进展,并对配合这些疫苗使用的免疫佐剂作了探讨。 相似文献
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目的:评价间接免疫荧光试验(IFA)在生殖器疱疹(GH)诊断中的应用价值。方法:采用以单纯疱疹病毒(HSV)型共同性单克隆抗体为夹心的IFA法,检测了120例临床诊断为GH患者皮疹中的HSV,并与病毒培养法进行比较。结果:IFA检测HSV的总阳性率为85.8%,高于病毒培养法的阳性率(70.8%,χ2=12.04,P<0.01)。两种方法检测GH水疱内的HSV阳性率分别为93.3%和90.0%,无明显差异(χ2=1.96,P>0.05);而检测糜烂和结痂性皮疹内的HSV时,IFA的阳性率分别为92.6%和69.4%,均分别高于病毒培养法(75.9%,χ2=5.82,P<0.05;47.2%,χ2=14.17,P<0.01)。结论:IFA法具有简单、快速、敏感性高的优点,适于检测GH患者皮疹内HSV,有临床实用价值。 相似文献
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直接分型检测单纯疱疹病毒PCR方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
作依据单纯疱疹病毒(HSV)DNA聚合酶基因的核苷酸序列,设计三个引物,一个上游HSV-1/HSV-2型共同性引物,一个下游HSV-1型特异性引物和一个下游HSV-2型特异性引物,建立分型检测PCR的方法,HSV-1的扩增产物是477bpHSV-2扩增产物为399bp,扩增产物的克隆及序列分析表明,该方法特异,用此方法对BALB/c幼鼠中枢神经系统HSV感染的脑标本进行了检测,进一步证实直接分型 相似文献