比较70％乙醇与中性甲醛固定对肺癌组织DNA质量影响的实验研究

目的由于常规10％中性甲醛固定的组织DNA提取质量较低,易发生断裂或降解,不利于保存及长片段DNA扩增。本研究比较70％乙醇与中性甲醛固定法对DNA质量及后续PCR的影响。方法取70％乙醇固定的肺癌组织30例（其中10例固定7天以上）,10％中性甲醛固定的自身配对癌组织30份。采用试剂盒提取DNA,分析条带完整性和纯度,并用PCR扩增HBB（beta globin）及SERPINA9（antitrypsin）两基因的不同长度片段,用琼脂糖凝胶电泳分析扩增产物。结果70％乙醇固定组的基因组DNA经电泳条带整齐未见明显降解,而10％中性甲醛组DNA条带弥散,有可见降解。后续普通PCR扩增268bp、536bp的产物显示乙醇固定组产量明显高于10％中性甲醛固定组。实时荧光定量PCR也显示在扩增123bp、251bp、346bp三个不同长度片段时乙醇固定组产量均明显高于10％中性甲醛固定组（P〈0．01）。中性甲醛组DNA在扩增346bp长度片段时成功率下降至47％（14／30）。乙醇固定时间长短对DNA的antitrypsin模板质量无明显差异。结论70％乙醇固定法对肺癌组织DNA保存效果优于中性甲醛法,且更适合长片段DNA扩增。长时间乙醇同定法对DNA质量无明显影响,可适合于长途运输生物标本。     

非小细胞肺癌PTEN基因突变的临床特征

  目的  了解非小细胞肺癌中PTEN基因突变的分布状况及其临床特征。  方法  选取2003年9月至2009年12月间182例在广东省人民医院收治的非小细胞肺癌患者的手术或穿刺标本,抽提RNA后,逆转录成cDNA,再进行PCR扩增PTEN 1~9外显子及EGFR 18~21外显子,用直接测序法检测基因突变。  结果  182例标本中,PTEN基因的突变率为9.9%（18/182）,PTEN基因的突变率女性为6.5%,男性为11.0%（P=0.549）;吸烟者为13.0%,非吸烟者为6.7%（P=0.15）;腺癌为7.8%,鳞癌为9.9%（P=0.628）,差别均无统计学意义。常见的突变类型有点突变、插入突变及缺失突变,共11例,主要分布在第8外显子,也可见于第4、5、9外显子;其中10例为男性吸烟者,1例为男性非吸烟者;8例为鳞癌,1例腺癌,2例大细胞癌;此外,发现7例大片段缺失突变,缺失片段位于第1~7外显子,约250~539 bp碱基丢失,突变率为3.8%（7/182）,除了1例为大细胞癌外,其余6例均为腺癌;PTEN基因突变率与性别、吸烟状态分布无统计学相关性;其中4例大片段缺失伴随EGFR基因敏感突变。  结论  具有不同PTEN基因突变类型的NSCLC可能是两种不同的疾病类型,不同突变类型的PTEN基因在NSCLC中的作用机制不同。PTEN基因的大片段缺失可能是突变型EGFR对TKI原发耐药的原因之一      

吉非替尼治疗前后肺腺癌患者血清蛋白质谱的变化

背景与目的 表皮细胞生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)治疗晚期NSCLC患者最终都会出现耐药.本研究目的 是检测耐药前后血清蛋白质谱的变化,探索可能用于预测TKI治疗后出现耐药的血清预测因子.方法 收集9例晚期NSCLC患者接受吉非替尼(gefitinib)治疗前后自身配对的血清样本20份,即入组口服吉非替尼前及临床评价为疾病进展前两周所采集的外周血血清.所有的患者对吉非替尼的最佳总疗效评价为疾病稳定或部分缓解.所有样本用弱阳离子微珠进行预分离后.在Bruker AutoflTM基质辅助激光解析离子化-时间飞行质谱仪(MALDI-TOF-MS)上进行血清蛋白质谱检测.以ClinProTools(Version:2.1)软件进行数据采集分析.结果 自身配对分析发现有7个血清蛋白质表达水平在肺癌患者耐药前后的血清中有统计学差异.该7个血清蛋白质谱峰为3 242.09、8 690.36、2 952.64、3 224.04、1 450.51、1 887.8及3 935.73(m/z).有3个血清蛋白(3 242.09、2 952.64及3 224.04)在耐药血清中下调,其余4个血清蛋白(8 690.36、1450.51、1 887.8及3 935.73)则出现上调.结论 特定的血清差异蛋白可能与吉非替尼治疗有效患者在治疗过程中出现耐药相关.这些差异蛋白的特性及其与吉非替尼治疗耐药的分子机制有待进一步研究.     

经脐三通道单孔腹腔镜胆囊切除术的护理

目的 总结和探讨经脐三通道单孔腹腔镜胆囊切除术的护理方法.方法 使用常规腹腔镜器械对15例慢性胆囊炎合并胆囊结石患者进行经脐部人路三通道腹腔镜胆囊切除术术后护理方法及效果.结果 15例患者手术均获成功,无并发症发生,伤口愈合良好,除脐部外,腹壁无手术瘢痕.结论 经脐三通道腹腔镜胆囊切除术是新开展的微创手术,虽手术操作难度较普通腹腔镜胆囊切除术大,但具有无瘢痕、护理方法简单的优点临床应用良好.     

剖宫产预输注羟乙基淀粉130/0.4氯化钠效果评价

目的：探讨羟乙基淀粉130/0.4氯化钠注射液在剖宫产术中的临床应用价值。方法将2013年1月—2014年6月210例行择期剖宫产产妇随机分为观察组及对照组各105例,观察组输注羟乙基淀粉130/0.4氯化钠注射液500 mL,对照组输注乳酸钠林格液500 mL,然后实施腰-麻联合麻醉。结果2组产妇的均顺利完成手术,无呼吸抑制,脉搏血氧饱和度在98%~100%,术前平均动脉压、心率比较无显著性差异（P>0.05）;观察组术中平均动脉压高于对照组;心率、低血压发生率,麻黄碱总用量低于对照组（P<0.05）。结论腰-硬联合麻醉行剖宫产手术前输注羟乙基淀粉130/0.4氯化钠注射液,能有效减少术中低血压的发生,是安全可靠的措施。     

低浓度氟化氢接触者职业健康检查结果分析

目的了解氟化氢对作业人员健康的影响。方法对常州天合光能有限公司103名氟化氢接触者进行职业健康检查,并测定工作场所空气中氟化氢浓度。结果车间空气中氟化氢平均浓度为0.013 mg/m3。作业工人尿氟平均浓度为3.40 mmol/mol肌酐)。未发现疑似职业病或职业禁忌证。结论低浓度氟化氢接触有蓄积作用。未发现低浓度氟化氢与尿氟存在相关性。     

1例静脉滴注血塞通注射液致过敏性休克的护理

血塞通注射液的主要成分为三七皂苷，作用为活血祛瘀、通脉活络。临床用于中风偏瘫，淤血阻络症，动脉粥状硬化性脑梗塞，脑栓塞，视网膜中央静脉阻塞见淤血阻络症者。随着该药物的广泛应用，临床上偶见头痛、咽干、心慌、皮疹等轻微的不良反应，但出现过敏性休克少见。现将我院因静脉滴注血塞通注射液出现过敏性休克的抢救护理报告如下。[第一段]     

雪上一枝蒿甲素微透析探针体外回收率研究

该研究建立UPLC-MS/MS测定雪上一枝蒿甲素微透析探针回收率的分析方法,采用浓度差法(增量法,减量法)测定其体外回收率,并考察灌流液的p H,流速,浓度,温度对回收率的影响,以探讨微透析技术用于雪上一枝蒿甲素体内药动学研究的可行性。该试验建立的UPLC-MS/MS分析方法在要求范围内线性良好,色谱的专属性、回收率、精密度等均符合微透析样品的研究要求。增量法和减量法测得回收率无显著差异;相同条件下,探针的体外回收率随着流速的增加而降低,随着温度的升高而明显增加,与探针周围雪上一枝蒿甲素的浓度无关。结果表明,微透析技术可用于雪上一枝蒿甲素药动学研究,反透析法即减量法可用于雪上一枝蒿甲素体内微透析回收率的测定。