蛋白质缺乏对小鼠胸腺细胞花生凝集素受体的影响

本文用异硫氰酸荧光素标记花生凝集素(FITC-PNA)测定蛋白质缺乏小鼠胸腺细胞表面花生凝集素(PNA)受体的变化。结果表明,给予缺蛋白饲料后,小鼠体重不断减轻,胸腺组织逐渐萎缩,PNA阳性细胞数减少,荧光反应强度减弱。小鼠体重下降与胸腺细胞表面PNA受体的减少呈显著正相关(P<0.01)。提示蛋白质缺乏可对小鼠胸腺细胞的分化、成熟产生不良影响。     

蛋白质微阵列载体的选择及表面修饰方法

蛋白质微阵列又称蛋白质芯片，是近年来兴起的一项蛋白质组学研究技术，广泛应用于蛋白质组学研究、医学基础与临床诊断等，相比基因芯片上的DNA，蛋白质更为复杂和不稳定，固定在微阵列表面的蛋白质容易变性失活，因此研究和制作蛋白质微阵列的关键步骤之一就是要寻找合适的载体材料及其相应的表面修饰技术，以保证能够固定足够量蛋白质的同时保持蛋白质的活性。就近年来用于蛋白质微阵列的载体及其表面修饰方法进行综述。     

HLA-A·02/24限制的HBcAg表位特异性细胞毒T细胞克隆的建立及分析

目的建立HLA-A＊0201／2403限制的HBcAg表位特异性CTL细胞克隆。方法HLA-A＊0201／2403阳性HBV感染者的外周血单个核细胞（PBMC）分别用限制性表位肽HBc18-27和HBc117-125刺激,并以有限稀释法进行克隆化,期间单独使用植物血凝素（PHA）及联合使用表位肽刺激。用免疫荧光、流式细胞术以及乳酸脱氢酶释放实验对所获克隆进行鉴定。结果从HBc18-27活化的细胞中获得29株细胞克隆,其中28株为CD8^＋T克隆,均具有特异性细胞毒活性。从HBc117-125激活的细胞中获得12株CD8＋T克隆,其中9株有明显的细胞毒活性,另3株细胞毒活性则显著低下。克隆化过程中单独使用PHA及联合使用表位肽,克隆形成率分别为15.62％和14.58％。结论分别用表位肽HBc18-27和HBc117-125,能激活HLA-A＊0201／2403阳性HBV感染者的CD8^＋T细胞。建立CD8^＋T克隆过程中,表位肽的使用不能提高克隆形成率。     

体外细胞培养中甲肝病毒的连续传代及激光扫描共聚焦成像

观察甲肝病毒(HAV)在体外细胞培养中连续传代的特点及细胞内病毒荧光的激光扫描共聚焦成像。实验中采用了间接免疫荧光法(IF)与激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)结合技术，并与ELISA进行比较。ISCM技术发现将NJ-3株HAV接种于PLC／PRF／5细胞1h后细胞表面有病毒吸附，2-4h病毒吸附量增多，4h后逐步减少。在病毒随细胞连续传代中，至第7代病毒增殖量可达到稳定状态并至少可连续传77代，感染病毒的细胞可达95％以上；细胞传代或病毒收获的最佳周期为5d；经多次冻存、复苏，仍保持良好的细胞形态和产毒性能。结果表明ISCM技术能更早地检出细胞表面吸附的少量病毒和胞浆内微弱的HAAs荧光，而ELISA则需要较多量病毒才能显示阳性。提示前者更适合于少量病毒时的定性，特别是在初次病毒分离时；后者则适合于病毒量较多时的整体定量。     

某医院口腔科汞污染调查

银汞合金是口腔科常用的填补龋齿的材料。从1979～1981年全国五种职业中毒普查工作中所见,口腔补牙作业中汞中毒率为0.68%。为了解南京军区总医院口腔科汞污染的现状,改善工作条     

CD8~+T淋巴细胞非溶细胞功能抑制HepG2.2.15细胞表达HBV的实验研究

目的 观察慢性乙肝患者病毒特异性CD8+T细胞体外非溶细胞功能抑制HepG2.2.15细胞表达乙型肝炎病毒的作用.方法 选择低溶细胞活性的HBcAg肽特异性CD8+T细胞克隆(效应细胞)与HepG2.2.15细胞(靶细胞)以1:10共同培养,于24 h、48 h和72 h收集培养上清,通过检测其中细胞因子及HBV产物的变化,观察CD8+T克隆对HBV的抑制作用.用抗体中和法观察CD8+T细胞分泌的细胞因子被封闭后HBV抑制的变化.结果 HBV特异性CD8+T克隆与靶细胞共育后,培养上清可检出高水平IFN-γ和少量TNF-α.共育后对HBsAg、HBeAg和HBV-DNA的最高抑制率分别为71.2%、68.5%和78.3%,均在72 h.IFN-γ和TNF-α单独和同时被抗体封闭后,对HBV-DNA的抑制率显著下降.对靶细胞的最大细胞毒活性是7.2%(24 h).结论 IFN-γ和TNF-α是CD8+T细胞非溶细胞机制清除病毒的主要效应分子.     

免疫金银染色法在蛋白质微阵列检测TORCH感染的实验研究

目的研制基于免疫金银染色法的TORCH检测蛋白质微阵列。方法将TORCH抗原点样于已经被琼脂糖膜修饰的玻片表面,与待测血清和胶体金标记的抗人IgM(μ链)孵育,用银增强微阵列信号,肉眼观察或普通的平板扫描仪记录结果。以不同浓度的纯化人IgM制备标准曲线。结果蛋白质微阵列的灰度质和IgM的浓度呈线性关系。60份待测血清与ELISA法同时检测,诊断符合率为93.3%。结论该法具有高信息通量、低成本、制备与检测快速简单的优点。     

纳米金比色芯片检测和鉴定病原微生物

目的：建立一种简单、快速的比色芯片判断PCR产物存在与否的方法。方法：在多重PCR过程中掺入生物素化的dUTP(biotin-16-dUTP)制备生物素化的靶序列，与相应的生物芯片杂交后，用链霉亲和素-纳米金结合银染的方法鉴定4种不同大肠杆菌血清型。同时，为了与链霉亲和素-藻红蛋白染色方法进行比较，用这两种方法检测了大肠杆菌血清型O157：H7的rfbE扩增产物。结果：纳米金比色芯片检测结果与琼脂糖凝胶电泳的结果一致，芯片杂交的纳米金标记与荧光标记检测的结果相当。结论：纳米金比色芯片能够对4种不同的大肠杆菌血清型进行准确鉴定，而且不需复杂的仪器，适合现场检测监控环境中的微生物。     

硫胺素(维生素B_1)选择电极的制备与尿样本的测定

我们最近研制的传感器是应用特异性选择电极来测定样本中的硫胺素(维生素B_1)含量,测定效果满意。该电极的线性范围在10~(-2)～10~(-7)mol/L,下限可达5×10~(-8)mol/L。现报告如下:     

抗体蛋白质芯片及其在医学中的应用近况

在蛋白质组研究中，由于蛋白质芯片能够在一次实验中时少量样本中的大量目的蛋白质同时进行检测，这一技术已引起人们的很大兴趣。作为蛋白质芯片的一种，抗体蛋白质芯片在基础与临床研究中有着很大的潜在价值，本文中作者就抗体蛋白芯片的基本原理、技术特点以及其在医学中的应用近况进行综述。