二苯乙烯苷抗氧化和抗炎作用的机制研究

目的： 以小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞为研究对象，探讨二苯乙烯苷（TSG）介导的抗氧化和抗炎作用及其调控机制。方法： 30、60和120 μmol/L的二苯乙烯苷预处理4 h，然后以1 μg/mL的脂多糖（LPS）刺激小鼠巨噬细胞（RAW264.7）12 h，并设置空白对照组、地塞米松（100 nmol/L）阳性对照和Nrf2抑制剂寒鸦子酸（brusato，50 μmol/L）干预组，其中地塞米松和brusatol预处理RAW264.7细胞4 h。观察光镜下RAW264.7细胞形态学的改变并统计其被激活比例；ELISA法检测培养液中TNF-α和IL-6的水平；通过DCFH-DA和Mito-SOX^TM荧光探针染色，流式细胞仪检测细胞内和线粒体内的ROS水平变化；免疫荧光法检测Nrf2的表达水平变化；Western blot检测核内Nrf2蛋白水平变化；Real-time PCR测定Nrf2下游抗氧化酶HO-1、SOD₂、SOD₁、CAT和GPX-1表达。结果： 与空白对照组细胞相比，LPS处理后RAW264.7细胞活化，胞体增大，形成大量伪足，培养基中TNF-α和IL-6增多。二苯乙烯苷可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞激活，降低培养基中TNF-α和IL-6，且效果优于阳性对照药物地塞米松。同时，二苯乙烯苷可促进Nrf2核转位，并促进下游抗氧化酶HO-1、SOD₂和CAT表达，减轻细胞内ROS生成。而brusatol可通过阻断Nrf2活性抑制二苯乙烯苷的抗炎作用。结论： 二苯乙烯苷可激活Nrf2及其下游抗氧化酶的表达，具有良好的抗炎和抗氧化作用，是一种炎症相关疾病的候选药物。     

外科专家临床笔录第2讲 骨科临床笔录(二)

5关节镜手术中应细心甄别半月板5.1病案摘要患者男性,26岁。6年前摔倒致膝关节受伤,到医院行膝关节X线片检查,未见异常。一直按照一般的扭伤处理,约2～3个月后才正常行走,但膝关节经常疼痛,天气变化时加重。直到最近患者打篮球时再次扭伤,偶     

40例高血压性基底节区脑出血病人行微创穿刺引流术的护理

高血压性脑出血是神经内科常见的急危重症,病死、病残率极高[1],近年来发病趋向年轻化。基底节区出血占高血压性脑出血的70%～80%,因其位于脑内深部,且多为患高血压病多年的中老年病人。这部分病人全身脏器功能及自身脑血管基础差,对手术及麻醉耐受性差,使理论上可以在直视下彻底清除血     

Rab7真核表达载体的构建及其在小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞中的表达

目的 构建Rab7的真核表达载体,研究其在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达.方法 RT-PCR方法分析Rab7在组织和细胞中的表达.以RAW264.7细胞的cDNA为模板,根据GenBank公布的小鼠Rab7全长序列设计引物,扩增Rab7基因的开放阅读框.将其与真核表达载体pcDNA3.1(-)连接,构建pcDNA-Rab7重组质粒.用脂质体将Rab7真核表达载体瞬时转染RAW264.7细胞,RT-PCR和Western blot法鉴定Rab7的过表达.结果 Rab7重组载体测序结果与GenBank中报道的Rab7序列的同源性为100％.RT-PCR和Western blot结果显示Rab7真核表达载体瞬时转染RAW264.7细胞后,Rab7表达显著增高.结论 成功构建了Rab7真核表达载体.为今后研究Rab7在巨噬细胞中的功能奠定了基础.     

超声刀与高频电刀腹腔镜胆囊切除术对血浆C-反应蛋白水平的影响

目的:分别使用超声刀与高频电刀行腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC),观察二者对机体血浆C-反应蛋白水平的影响.方法:选取40例行腹腔镜胆囊切除术(LC)患者,随机分为高频电刀组和超声刀组,每组各20例,比较两组患者术前及术后第1天体温、脉搏、血常规、肝功能部分指标( DBIL、AST、ALT)及C-反应蛋白的变化情况.结果:两组患者术后第1天体温、脉搏、血常规、肝功能部分指标及C-反应蛋白水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:腹腔镜胆囊切除术时,分别使用超声刀与高频电刀对机体血浆C-反应蛋白水平的影响均无统计学差异.     

老年胆囊结石手术治疗152例临床分析

目的:探讨老年人胆囊结石临床特点及手术治疗经验.方法:对152例60～ 83岁老年胆囊结石患者的临床特点、并存病、手术时机、手术方式及治疗结果进行分析.结果:急诊手术15例(9.9％),择期手术137例(90.01％);并存高血压、心脏病、肺部炎症、糖尿病等88例占57.9％(88/152),合并胆总管结石13例占8.6％ (13/152);传统开腹胆囊切除109例,腹腔镜胆囊切除24例,胆囊切除胆总管切开取石“T”管引流13例,胆囊大部分切除4例,胆囊造瘘术2例,全组病例术后恢复良好,治愈出院.结论:老年人胆囊结石要重视术前并存病的治疗,做好术前风险评估及围手术期的处理.     

甲基化抑制剂5-aza-2′-deoxycytidine对K562细胞SHP-1基因表达及细胞增殖与凋亡的影响

本研究探讨5-氮杂胞苷（5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-CdR）对K562细胞中抑癌基因SHP．1的转录调控作用及对K562细胞增殖凋亡的生物学影响,为寻找肿瘤治疗新靶点提供实验依据。采用MSP方法检测SHP-1基因甲基化状态,MTT法检测不同剂量（0．5,1,2μmol/L）5-aza-CdR作用K562细胞1,3,5天时对K562细胞存活率的影响,流式细胞术（FCM）分析5-aza-CdR作用1,3,5天时细胞周期及凋亡率的变化,实时定量PCR（FQ-PCR）和Westernblot方法检测5-aza-CdR处理前后SHP-1mRNA及蛋白表达水平、P-STAT5蛋白表达变化。结果表明,K562细胞中存在SHP-1基因的甲基化,5-aza-CdR作用使K562细胞中SHP-1mRNA和蛋白重新表达．而P-JAK2蛋白表达随之呈下降趋势;5-aza-CdR明显抑制K562细胞增殖,并与药物浓度及作用时间呈正相关。JAK2特异性抑制荆AG490明显抑制K562细胞增殖;5-aza-CdR可使K-562细胞凋亡率增加,且作用也呈时间依赖性,用药1,3,5天细胞凋亡率分别为9．3％,24．2％,37．7％。2μmoL／L的5-aza-CdR处理24小时后,G0／G1期细胞逐渐增多,G2／M期细胞逐渐减少,细胞阻滞在G0／G1期。5-aza-CdR作用1,3,5天时G：／M期细胞比例分别为30．7％,23．4％,19．3％。结论：特异性甲基化转移酶抑制剂5-aza-CdR能使K562细胞中沉默的SHP-1基因重新表达,并可能通过JAK／STAT路径活化抑制白血病细胞增殖并诱导其凋亡。     

甲基化抑制剂5-aza-2'-deoxycytidine对K562细胞SHP-1基因表达及细胞增殖与凋亡的影响

本研究探讨5-氮杂胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-aza-CdR)对K562细胞中抑癌基因SHP-1的转录调控作用及对K562细胞增殖凋亡的生物学影响,为寻找肿瘤治疗新靶点提供实验依据.采用MSP方法检测SHP-1基因甲基化状态,MTT法检测不同剂量(0.5,1,2 μmol/L)5-aza-CdR作用K562细胞1,3,5天时对K562细胞存活率的影响,流式细胞术(FCM)分析5-aza-CdR作用1,3,5天时细胞周期及凋亡率的变化,实时定量PCR(FQ-PCR)和Western blot方法检测5-aza-CdR处理前后SHP-1 mRNA及蛋白表达水平、P-STAT5蛋白表达变化.结果表明,K562细胞中存在SHP-1基因的甲基化,5-aza-CdR作用使K562细胞中SHP-1 mRNA和蛋白重新表达,而p-JAK2蛋白表达随之呈下降趋势;5-aza-CdR明显抑制K562细胞增殖,并与药物浓度及作用时间呈正相关.JAK2特异性抑制剂AG490明显抑制K562细胞增殖;5-aza-CdR可使K562细胞凋亡率增加,且作用也呈时间依赖性,用药1,3,5天细胞凋亡率分别为9.3%,24.2%,37.7%.2 μmol/L的5-aza-CAR处理24小时后,G0/G1期细胞逐渐增多,G2/M期细胞逐渐减少,细胞阻滞在G0/G1期.5-aza-CdR作用1,3,5天时G2/M期细胞比例分别为30.7%,23.4%,19.3%.结论:特异性甲基化转移酶抑制剂5-aza-CdR能使K562细胞中沉默的SHP-1基因重新表达,并可能通过JAK/STAT路径活化抑制白血病细胞增殖并诱导其凋亡.     

铁死亡对糖尿病及其并发症影响及中药干预进展

糖尿病是由于胰岛素分泌绝对或相对不足引起的以长期高血糖症为特征的一种代谢性疾病。随着糖尿病病情的进展,罹患糖尿病肾病、糖尿病心肌病、糖尿病合并非酒精性脂肪肝病等并发症的人数不断扩增,给患者及社会都带来沉重负担。铁死亡是近年来广受关注的一种细胞新型程序性死亡方式,主要是指在铁离子过载下,脂质过氧化物过度累积导致的细胞死亡。现已有多项研究发现糖尿病及其并发症中存在铁死亡现象,通过抑制铁死亡可极大减缓糖尿病及其并发症的发生和进展。中药是我国独具特色的瑰宝,具有多通路、多方向的优势且价廉、不良反应小的特色,已被广泛用于糖尿病及其并发症的治疗并取得较好疗效,为广大患者带来福音。从中药调节铁死亡的角度入手可能是未来治疗糖尿病及其并发症的新方向。该文简要阐述铁死亡机制,探讨铁死亡与糖尿病及其并发症之间联系,总结中药干预铁死亡治疗糖尿病及其并发症的研究现状,并提出建议,以期为中药治疗糖尿病及其并发症的深入研究提供参考依据。     

320排CT前瞻性和回顾性心电门控冠状动脉成像:放射剂量、图像质量及诊断结果的对照观察

目的 比较前瞻性心电门控及回顾性心电门控320排CT冠状动脉成像的放射剂量、图像质量及诊断结果.方法 对临床拟诊冠心病、心率<65次/分的500例患者依次分别采用前瞻性及回顾性心电门控冠状动脉成像扫描方案,分为P组(前瞻组)和R组(回顾组),评价两组的辐射剂量、图像质量及诊断结果.结果 P组和R组各有3750(15×250)个冠状动脉节段,P组和R组冠状动脉节段管径太小(<1.5 mm)难于评估分别占3.49%(131/3750)、3.78%(142/3750),可评估节段占96.51%(3619/3750)、96.12%(3608/3750),差异无统计学意义(P>0.05);P组和R组的图像评分差异无统计学意义(P>0.05).P组和R组平均辐射剂量为(3.36±1.00)mSv、(13.46±2.30)mSv,P组平均射线剂量较R组降低75.04%,差异有统计学意义(P<0.01).P组的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值为93.22%、99.21%、91.64%、99.05%,R组的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值为94.55%、98.80%、95.86%、98.54%,差异无统计学意义(P>0.05).结论 320排CT前瞻性心电门控扫描方案较回顾性辐射剂量明显降低,但冠状动脉图像质量及诊断结果与回顾性心电门控扫描无明显差异.