Adipophilin促进RAW264.7细胞内ACAT1高表达

目的低密度脂蛋白在体内被氧化修饰后表现出强烈的致动脉粥样硬化效应。低密度脂蛋白在体内可被巨噬细胞氧化,且低密度脂蛋白被氧化修饰后形成的产物氧化型低密度脂蛋白被巨噬细胞大量吞噬转化为动脉粥样硬化斑块内出现的特征性病理细胞--泡沫细胞。但是巨噬细胞介导渗入血管内皮下的低密度脂蛋白的氧化修饰中的具体氧化机制尚不清楚。本实验观察低密度脂蛋白被小鼠巨噬细胞RAW264.7氧化的过程中,细胞膜上是否有即时形成的脂质?...     

炎症调控胆固醇逆向转运的机制研究

胆固醇逆向转运(RCT)是促进细胞内胆固醇流出并转运至肝脏进行代谢的过程,其功能异常在动脉粥样硬化(As)的发生发展中起着关键作用。糖尿病、肥胖等慢性代谢性炎症疾病促进As的进展,而体内炎症、脂肪因子参与调控RCT是其重要的调控机制之一。本期专题收集的研究论文和综述探讨了糖基化终末产物Nε-羧甲基赖氨酸、核因子κB(NF-κB)、脂肪因子Visfatin等对细胞内胆固醇流出及介导RCT中关键蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体A1、Sortilin、酯酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶(ACAT)等表达的影响,从不同角度阐释慢性代谢性炎症疾病调控RCT和心血管疾病发生发展的分子机制。     

甲氧滴滴涕对雄性大鼠生殖细胞毒性的影响

目的探讨甲氧滴滴涕(Methoxychlor,MXC)对雄性大鼠生精细胞的细胞周期影响。方法用流式细胞仪检测染毒雄性大鼠生精细胞周期变化。结果随着MXC染毒时间延长,实验组G0/G1期细胞数(5、10和15 d组分别为58.4%、45.8%和43.9%)与S期细胞数(5、10和15 d组分别为21.9%、20.8%和12.7%)减少,G2/M期细胞数(5、10和15 d组分别为19.7%3、3.4%和43.4%)增多(P<0.05);实验组单倍体细胞减少,二倍体与四倍体细胞增多(P<0.05);除5 d实验组的二倍体与四倍体细胞平均荧光强度增强外,其余实验组单倍体、二倍体和四倍体细胞平均荧光强度减弱(P<0.05),溶剂组变化差异无显著性(P>0.05)。结论MXC可以引起大鼠睾丸生精细胞S时相抑制,并出现G2期细胞阻滞。     

场景熟悉度对慢性吗啡处理诱导小鼠行为敏化的影响

目的 探求场景熟悉度对慢性吗啡处理诱导小鼠行为敏化的影响.方法 (1)实验一:分别在新颖场景(测试箱)和熟悉场景(鼠笼)中连续7天给予小鼠吗啡处理(10 mg/kg,皮下注射,1次/d);撤药后第7天,在测试箱中给予10 mg/kg吗啡点燃后观察其行为敏化效应.(2)实验二:连续7天给予小鼠吗啡处理(10 mg/kg,皮下注射,1次/d);撤药后第7 d,检测行为敏化的表达,其中配对组检测场景为伴药场景,非配对组检测场景为非伴药场景.结果 (1)实验一:吗啡注射与新颖场景配对能够诱导小鼠行为敏化,而与熟悉场景配对不能诱导小鼠行为敏化.(2)实验二:吗啡注射与新颖场景配对诱导的敏化行为只在吗啡配对的新颖场景中表达而在非配对的新颖场景中不表达.结论 小鼠行为敏化的建立与吗啡注射配对场景的熟悉度相关,并且其表达是场景依赖性的.     

磁场对家兔实验性高血压的影响

本文采用静脉缓慢滴注低浓度去甲肾上腺素,造成家兔高血压模型。穴位贴敷磁片,观察磁场对家兔血压、脉压、心率及减压N放电的影响。实验结果表明,磁场可使血压明显下降,脉压升高,心率稍有减慢但变化不显著,减压N放电频率减少。根据实验结果,文章初步探讨了磁场降压效应的机理。     

氨基胍对失血性休克家兔NO、TNF-α、ET、IL-6水平和NF-κB活性的影响

目的观察氨基胍对失血性休克家兔血清NO、TNF-α、ET与IL-6水平和NF-κB活性的影响,探索其作用机理。方法采用股动脉放血法复制家兔失血性休克模型,实验分为生理盐水组和氨基胍组;分别采用硝酸还原酶法、放射免疫法、酶联免疫吸附法（ELISA）测定失血性休克发生与复苏过程中血清NO、TNF-α、ET、IL-6表达与血液单核细胞NF-κB活性。结果休克前盐水组和氨基胍组血清NO、TNF-α、ET、IL-6含量与NF-κB活性处于较低水平,而休克时两组动物NO、TNF-α、ET、IL-6含量与单核细胞NF-κB活性均明显上调,两组间比较差异均无显著性;复苏后,氨基胍组NO、TNF-α、ET、IL-6含量与单核细胞NF-κB活性均明显降低,盐水组NO、TNF-α、ET、IL-6含量与单核细胞NF-κB活性均继续升高;结论氨基胍能有效降低失血性休克家兔血清NO、TNF-α、ET和IL-6水平。     

荷叶碱对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达与胆固醇流出的影响及机制

目的观察荷叶碱(NF)对巨噬细胞源性泡沫细胞ATP结合盒转运体A1(ABCA1)表达和胆固醇流出的影响及机制。方法体外培养人源性THP-1单核细胞,使用佛波酯(160 nmol/L)对其进行诱导,促进其分化为巨噬细胞,并在50 mg/L氧化低密度脂蛋白处理下,使其荷脂形成泡沫细胞,进行常规体外培养细胞。高效液相色谱检测泡沫细胞内脂质成分,液体闪烁计数仪检测泡沫细胞胆固醇流出的水平;实时荧光定量PCR和Western blot检测ABCA1表达情况。PPARγ抑制剂GW9662和LXRα抑制剂GGPP分别处理泡沫细胞,通过荧光定量PCR和Western blot检测荷叶碱对泡沫细胞PPARγ、LXRα和ABCA1表达的影响。结果荷叶碱显著减少泡沫细胞内的脂质成分,增加ABCA1表达与胆固醇流出水平。PPARγ抑制剂GW9662处理细胞后,显著降低了PPARγ、LXRα和ABCA1的表达。泡沫细胞在LXRα抑制剂GGPP处理下,也明显降低了LXRα和ABCA1表达。结论荷叶碱通过PPARγ/LXRα途径上调巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1的表达,促进胆固醇流出,减少细胞内脂质蓄积。     

γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病中的表达

研究表明,氧化/抗氧化失衡是慢性阻塞性肺疾病(COPD)主要发病机制之一。肺组织中重要的抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)对纠正氧化失衡,保护肺组织免受氧化损伤起关键作用。γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γGCS)是GSH合成的限速酶,调控GSH生成的速度和量。为此,我们的实验初步探讨γGCS在大鼠COPD中的作用。材料与方法　雄性Wistar大鼠14只,平均体重(2 0 0±2 0 )g ,随机分为COPD组和对照组,每组7只。每天熏香烟及2次气管内滴入2 0 0 μg脂多糖法制作COPD大鼠动物模型[1] 。按文献[2 ]方法测定γGCS活性。免疫组织化学法测定肺组织c fos、c j…     

肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响

目的　检测大鼠腹腔肥大细胞 (mastcell,MC)对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响。方法　SD大鼠体重约 2 0 0g ,雌雄不限 ,供采集MC和原代培养平滑肌细胞 (smoothmusclecell,SMC)。采用梯度密度离心分离MC ,提取MC上清液(含MC释放的各种炎症介质 )。用MC上清液和氧化型低密度脂蛋白 (oxLDL)处理SMC ,实验分四组 :对照组SMC在 5mL含10 %小牛血清的DMEM中培养 4 8h ;oxLDL组SMC在 5mL含 10 %小牛血清的DMEM中 (含oxLDL ,终浓度为 10 0mg L)培养 4 8h ;MC上清液组SMC在 5mL含 10 %小牛血清的MC上清液 (由含 1× 10 6 个MC的细胞悬液提取 )中培养 4 8h ;MC上清液 +ox LDL组SMC在 5mL含 10 %小牛血清的MC上清液 (由含 1× 10 6 个MC的细胞悬液提取 )中 (含oxLDL ,终浓度为 10 0mg L)培养4 8h。采用油红O染色检测SMC泡沫化。RT PCR检测SMCⅠ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA的表达 ,PCR引物序列Ⅰ型胶原为 5′ GACACTGAACCCTTTGTAATG 3′和 5′ GTGAAACTCCCGTCTGCT 3′ ,扩增片段长度为 399bp ;Ⅲ型胶原引物序列为 5′ AGCGGAGAATACTGGGTT 3′和 5′ TGTAATGTTCTGGGAGGC 3′ ,扩增片段长度为 2 88bp ;内参照采用β actin ,引物序列为 5′ GTGGGGCGCCCCAGGCACCA 3′和 5′ CTCCTTAATGTCACGCACGATTTC 3′,扩     

ApoAⅠ/ABCA1通过STAT3/TTP途径调节炎症因子mRNA降解

目的观察ApoAⅠ对脂多糖(LPS)诱导的THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞炎症因子表达的影响,并从ABCA1介导激活的STAT3/TTP信号途径入手探讨其分子机制。方法采用ELISA检测炎症因子表达;构建含肿瘤坏死因子α(TNF-α)启动子的CAT报告基因,转染THP-1细胞,采用ELISA检测TNF-α启动子活性;定量PCR检测TNF-α等炎症因子mRNA表达;免疫印迹技术检测pSTAT3、TTP和HuR等蛋白表达;RNA-EMSA检测TTP与RNA复合物;构建TTP、STAT3 siRNA,转染细胞。结果用10μg/L LPS和/或10 mg/L ApoAⅠ处理THP-1源性泡沫细胞4 h,结果显示ApoAⅠ明显抑制LPS诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6的表达;CAT报告基因显示,ApoAⅠ并不明显影响LPS诱导的TNF-α启动子活性;LPS处理细胞3 h,加入放线菌素D(Act D)终止转录,检测TNF-αmRNA表达量(0、30、60及120 min),结果显示ApoAⅠ明显增加LPS作用下TNF-α的mRNA降解;ApoAⅠ明显促进LPS作用下TTP的表达,而对HuR的表达没有明显影响,TTP ...