磁场对家兔胃、胰液分泌影响的实验研究

利用磁场的生物学效应治疗某些消化道疾病,近年来引起了人们的重视。由于实验研究与临床应用的紧密结合,在治疗小儿急性腹泻方面取得了一些新的进展。我们曾进行了“磁场对动物肠吸收及运动影响的实验研究”发现在磁场作用下大白鼠小肠对水、葡萄糖、氨基酸、Na~ 、Cl~-的吸收都有明显增加①。同时还发现在磁场     

脂肪分化相关蛋白通过蛋白激酶C和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1促进THP-1巨噬细胞蓄积脂质

目的： 探讨脂肪分化相关蛋白促进THP-1巨噬细胞蓄积脂质的机制。方法： 使用高胆固醇饲料喂养新西兰兔12周，复制动脉粥样硬化动物模型。然后用Western blotting和免疫组织化学染色观察兔主动脉脂肪分化相关蛋白及蛋白激酶C的表达。THP-1巨噬细胞与氧化低密度脂蛋白孵育不同的时间，使细胞负荷胆固醇酯后，用RT-PCR的方法观察脂肪分化相关蛋白及酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1的表达，用PepTagassay琼脂糖凝胶电泳及分光光度法观察蛋白激酶C的活性。在负荷胆固醇酯的THP-1巨噬细胞中分别加入蛋白激酶C的激动剂佛波酯和抑制剂钙磷酸结合蛋白，观察脂肪分化相关蛋白的表达，同时使用油红O染色和高效液相色谱法测定细胞内脂质的变化。瞬时转染pcDNA3.1-HA-adi表达载体到THP-1巨噬细胞，复制高表达脂肪分化相关蛋白的细胞模型。在负荷、不负荷胆固醇酯或ACAT抑制剂存在的状态下，观察酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1表达及细胞内胆固醇酯的改变。结果： 与对照组相比，兔主动脉病变处脂肪分化相关蛋白及蛋白激酶C表达均显著增加。负荷胆固醇酯的THP-1巨噬细胞中脂肪分化相关蛋白及酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1表达上调，蛋白激酶C的活性升高。荷脂细胞与蛋白激酶C激动剂共孵育后，可以协同增强上调脂肪分化相关蛋白的效应，细胞内脂质增多；如果荷脂细胞同时与蛋白激酶C抑制剂共孵育，可以有效抑制荷脂所致的脂肪分化相关蛋白高表达，细胞内脂质减少。高表达脂肪分化相关蛋白的THP-1巨噬细胞能够使酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1表达增加，促进细胞内胆固醇酯蓄积。加入酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶抑制剂后，这些作用被减弱。结论： 脂肪分化相关蛋白可能是通过蛋白激酶C活性的改变影响酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1的活性，从而影响细胞内脂质的蓄积。     

动脉粥样硬化小型猪血浆C-反应蛋白水平的变化

目的:用贵州小香猪建立动脉粥样硬化动物模型,观察小型猪动脉粥样硬化发生发展与血浆C-反应蛋白水平的关系。方法:实验于2003-02/2004-03在南华大学心血管病研究所实验室进行。选择10只贵州小香猪单纯随机分为两组(n=5):①高脂高胆固醇组:喂饲高脂高胆固醇饲料2个月后麻醉状态下切开右侧颈总动脉放置6F动脉球囊导管,压力600～800kPa×180s,重复2次,然后在200～400kPa压力下从远端向近端拖拉球囊导管,并重复3次,术后饲以高脂高胆固醇饲料。②正常对照组:普通饲料喂养2个月后麻醉状态下分离右侧颈总动脉,但不进行血管内膜损伤。实验进行12个月,每2个月检测1次血浆总胆固醇、三酰甘油和高密度脂蛋白胆固醇水平和血浆C-反应蛋白水平,第12个月末处死动物取主动脉和冠状动脉,观察动脉粥样硬化斑块和脂质条纹发生情况。结果:10只小香猪全部进入结果分析。①高脂高胆固醇组小香猪血浆总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平从2个月末显著高于正常对照组(P<0.05),而血浆三酰甘油水平从4个月末开始升高,到6个月末才明显增加(P<0.05)。②高脂高胆固醇组小香猪血浆C-反应蛋白水平4个月末时即高于正常对照组(P<0.05),到6个月末明显高于正常对照组(P<0.05)。③在高脂高胆固醇组动物的主动脉、颈总动脉、髂动脉和冠状动脉可见动脉粥样硬化斑块和脂质条纹,该病变区占整个主动脉面积的(90.8±8.3)%;正常对照组未见斑块和脂质条纹。结论:采用血管内膜损伤法加高脂高胆固醇饲料喂养小型猪可建立动脉粥样硬化动物模型。动脉粥样硬化小型猪血浆C-反应蛋白水平升高,C-反应蛋白和动脉粥样化形成相关。     

氨基脲敏感性胺氧化酶的结构与功能

氨基脲敏感性胺氧化酶（Semicarbazide—sensitive amine oxidase．SSAO）是一组含铜和锟并对氨基脲敏感的多功能酶，广泛存在于哺乳动物体内脉管含量丰富的组织中，它影响内源性和外源性芳香族和脂肪族一元胺的代谢。SSAO主要以两种形式存在，一种是可溶性的形式，主要存在于循环血液中；一种是膜结合的形式，主要存在于脂肪细胞、     

离体灌流蟾蜍心脏单个心室肌细胞动作电位的记录

在引导心肌细胞动作电位时,以前的报道中,一些实验是采用离体心肌组织进行的,这样破坏了心脏的完整性;而一些是采用在体进行,虽然保持了心脏的完整性,但观察药物对心脏的影响时,药物不易快速排除。为此,我们采取了离体的灌流的心脏进行实验,这样既保持了心脏的完整性,又易快速清除心脏里的药物。兹将本方法介绍如下:     

动脉粥样硬化小型猪血浆C-反应蛋白水平的变化

目的：用贵州小香猪建立动脉粥样硬化动物模型，观察小型猪动脉粥样硬化发生发展与血浆C-反应蛋白水平的关系。方法：实验于2003—02／2004—03在南华大学心血管病研究所实验室进行。选择10只贵州小香猪单纯随机分为两组（n=5）：④高脂高胆固醇组：喂饲高脂高胆固醇饲料2个月后麻醉状态下切开右侧颈总动脉放置6F动脉球囊导管，压力600-800kPa&;#215;180s，重复2次，然后在200-400kPa压力下从远端向近端拖拉球囊导管，并重复3次，术后饲以高脂高胆固醇饲料。②正常对照组：普通饲料喂养2个月后麻醉状态下分离右侧颈总动脉，但不进行血管内膜损伤。实验进行12个月，每2个月检测1次血浆总胆固醇、三酰甘油和高密度脂蛋白胆固醇水平和血浆C一反应蛋白水平，第12个月末处死动物取主动脉和冠状动脉，观察动脉粥样硬化斑块和脂质条纹发生情况。结果：10只小香猪全部进入结果分析。①高脂高胆固醇组小香猪血浆总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平从2个月末显著高于正常对照组（P〈0．05），而血浆三酰甘油水平从4个月末开始升高，到6个月末才明显增加（P〈0．05）。②高脂高胆固醇组小香猪血浆C-反应蛋白水平4个月末时即高于正常对照组（P〈0．05），到6个月末明显高于正常对照组（P〈0．05）。③在高脂高胆固醇组动物的主动脉、颈总动脉、髂动脉和冠状动脉可见动脉粥样硬化斑块和脂质条纹，该病变区占整个主动脉面积的（90．8&;#177;8．3）％；正常对照组未见斑块和脂质条纹。结论：采用血管内膜损伤法加高脂高胆固醇饲料喂养小型猪可建立动脉粥样硬化动物模型。动脉粥样硬化小型猪血浆C-反应蛋白水平升高，C-反应蛋白和动脉粥样化形成相关。     

PPARγ反义寡核苷酸对THP-1巨噬细胞CD36表达的影响

目的观察过氧化体增殖物激活型受体1（PPARγ）反义寡核苷酸对THP-1巨噬细胞CD36表达及细胞胆固醇流入的影响,探讨PPAR7的作用及机制。方法用50mg／L氧化型低密度脂蛋白（OX—LDL）分别与不同浓度PPARγ的反义寡核苷酸（400nmol／L）、错义寡核苷酸（400nmol／L）或15μmol／LPPARγ激动剂ciglita-zone共同孵育THP—l巨噬细胞24h后,采用逆转录-聚合酶链反应和Western印迹分析分别检测CD36的表达,采用液体闪烁计数法检测[3H]胆固醇流入。,结果与OX—LDL组比较,PPARγ反义寡核苷酸下调巨噬细胞CD36的表达,且细胞胆固醇流入率下降（OX—LDL组为28．1％、反义寡核苷酸组为22．5％）。而ciglitazone则使巨噬细胞CD36的表达上调,胆固醇流入率明显增加（36．8％）。结论抑制PPARγ表达,可抑制THP-1巨噬细胞CD36的表达,并减少细胞胆固醇流入。     

载脂蛋白A-Ⅰ与ATP结合盒转运体A1

载脂蛋白A-Ⅰ(apolipoprotein,apoA-Ⅰ)是高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)所含主要的载脂蛋白成分,ATP结合盒转运体A1(ATP binding casstte transporter A1,ABCA1)是细胞膜脂类主动转运体.apoA-Ⅰ与ABCA1结合而被脂化是胆固醇逆转运(reverse cholesterol transport,RCT)的关键步骤,是HDL抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)性心血管疾病的主要机制之一.研究和认识apoA-Ⅰ与ABCA1的分子结构、功能以及二者在RCT中的相关性,对于揭示抗AS的机理具有重要意义.     

细胞质膜小凹/小凹蛋白1在实验性动脉粥样硬化小鼠血管壁中的表达变化

目的 研究细胞质膜小凹，小凹蛋白1在动脉粥样硬化病变中的表达变化，探索动脉粥样硬化发生过程中细胞胆固醇逆转运障碍的机制。方法采用高脂饲料喂养动脉粥样硬化敏感C57BL／6J小鼠24周，计算机图像分析系统计算动脉粥样硬化病灶面积和主动脉内膜和中膜厚度；电镜观察小凹在主动脉病变区的血管平滑肌细胞表达，Western印迹检测血管壁小凹蛋白1变化情况。结果动脉粥样硬化模型小鼠主动脉病变区的血管平滑肌细胞膜上存在有小凹结构，但排列稀疏，与正常血管平滑肌细胞相比明显减少，泡沫样改变的血管平滑肌细胞未见明显小凹结构的存在。通过Western印迹检测观察到，高脂组血管壁的小凹蛋白1蛋白表达量明显减少，与对照组比较具有显著差异。结论维持细胞内胆固醇平衡的重要结构小凹，小凹蛋白1在动脉粥样硬化病变中明显受损，可能是血管平滑肌细胞胆固醇逆转运障碍重要原因之一。