GE HawkEye-SPECT仪日常维护与质量控制

SPECT仪是核医学诊断中常规显像仪器,仪器常规的日常维护和保养及质量控制是可靠影像结果的重要保证[1-3]。本文对我科SPECT仪2002年6月至2011年6月的日常维护和质量控制进行分析总结,探讨SPECT仪的日常维护和保养及质量控制对图像质量保证的重要性,分析探讨如下。     

微载体技术高密度培养MRC-5细胞初探

目的 通过探索MRC-5细胞的微载体培养条件,以期建立MRC-5细胞的高密度培养方法.方法 用3种不同培养基（MEM、M199、DMEM）分别培养3.0×104/mL的MRC-5细胞,观察它们的细胞增殖及传代能力;在Spinner培养系统中,用1.0 g/L Cytopore 2和3.0 g/L Cytodex 3分别培养密度为3.70× 105/mL和2.98×105/mL的MRC-5细胞,观察两种载体对细胞生长代谢和细胞密度的影响,筛选出最适宜的培养基及微载体.使用5 L CelliGen310生物反应器对筛选获得的培养基及微载体进行MRC-5细胞的灌流培养初步摸索.结果 MRC-5细胞在MEM、M199、DMEM培养基中培养96 h细胞分别增殖了7.0、4.4和3.0倍;在MEM培养基中连续传代至5次以上,细胞增殖稳定,1：3传代72 h形成致密单层,而在M199和DMEM培养基中连续传代均未能获得理想的细胞形态.经96～120 h的培养后,使用1.0 g/L Cytopore 2培养的MRC-5细胞密度达到2.20× 106/mL高于使用3.0 g/L Cytodex 3的1.12×106/mL,且前者葡萄糖和乳酸代谢较后者更为活跃.首选MEM和Cytopore 2作为MRC-5细胞的灌流培养体系.在5L生物反应器中以1.0 g/L Cytopore 2和2.5LMEM培养基培养MRC-5细胞至144h,细胞密度达到1.54×106/mL.结论 初步建立的MEM Cytopore 2微载体细胞培养方法能够获得高密度、活性良好的MRC-5传代细胞.     

冻干甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)诱导的人体特异性细胞免疫应答

目的 了解接种冻干甲型肝炎(甲肝)减毒活疫苗[Hepatitis A(Live) Vaccine,Freeze-dried;HepA]后,机体能否产生特异性细胞免疫应答.方法 研究对象经HepA(H2株)1剂次免疫,流式法检测淋巴细胞亚群CD2 、CD4 、CD8 的百分率及表达干扰素(IFN)-γ及白细胞介素(IL)-4的阳性细胞百分率;T淋巴细胞的特异性增殖试验(MTT法)检测T淋巴细胞增殖反应;酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测淋巴细胞的IFN-γ分泌能力.结果 接种后2周,CD4 上升,以4周上升为显著,与接种前相比,差异有显著的统计学意义(t=2.571,P<0.05);接种后4周～3个月,淋巴细胞对特异性刺激物甲肝病毒的反应都有明显增强,与接种前相比,差异均有非常显著的统计学意义(t=3.215～3.959,P均<0.01);接种后2周,表达IL-4和IFN-γ的阳性细胞百分率上升,以IL-4为明显,与接种前相比,差异有显著的统计学意义(t=2.197,P<0.05);接种后3年,用ELISPOT法检测IFN-γ,阳性率为57.1%(8/14).结论 接种HepA(H2株)后,机体能有效地产生特异性细胞免疫应答.     

穴位注射治疗顽固性膈肌痉挛

膈肌痉挛,中医称呃逆。临床表现为不自主的打呃,重者可长达数周。许多方法治疗效果不佳,我们采用阿托品、苯巴比妥钠穴位注射治疗本病30例。取得了较好的效果,随访亦无复发,现将方法     

CpG基元作为免疫佐剂

非甲基化的CpG基元（5’侧翼为两个嘌吟,3’侧翼为两个嘧啶）能够诱发免疫应答,诱生IgM、γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素6(IL-6）、IL-12、IL-18、σ肿瘤坏死因子（TNF-α）。据此,作者设计了两段含该基元的寡核苷酸GCTAGACGTTAGCGT和TCAACGTT。作者构建了编码疟疾环子孢子蛋白（CSP）的DNA疫苗1012/PyCSP,去除1012/PyCSP的多接头,并用人组织纤溶酶原激活物基因的5’非翻译区和前导序列替代之,获得1020/PyCSP。在1020/PyCSP的增强子上游引入两拷贝的     

H2株冻干甲肝减毒活疫苗接种后血中T淋巴细胞亚群的变化

〔目的〕对接种H2 株冻干甲肝减毒活疫苗后机体血中T淋巴细胞亚群的变化进行动态观察。〔方法〕按一针接种程序 ,给每人接种 1瓶冻干甲肝减毒活疫苗 (H2 株 ) ,接种前及接种后 1、2、3、4、6、8周、3个月采取静脉血 ,用流式细胞仪检测全血T淋巴细胞亚群CD3 + 、CD4+ 、CD8+ 细胞的含量 ,并比较CD4+ /CD8+ 比值的变化。〔结果〕CD3 + 细胞在接种后 1-3周、CD4+ 细胞在接种后 1-2周呈现明显升高 ,分别与接种前作自身对照比较的t检验 ,差别有显著性意义(P <0 .0 5 )。〔结论〕H2 株冻干甲肝减毒活疫苗有良好的T细胞刺激能力。     

Vero细胞肠道病毒71型灭活疫苗的纯化及鉴定

目的建立Vero细胞肠道病毒71型(EV71)灭活疫苗的纯化工艺。方法病毒收获液经离心澄清、福尔马林灭活和超滤浓缩后,采用Sephacryl S-400 HR凝胶过滤层析和Source 30Q离子交换层析2步层析法纯化EV71,进行各项检定及分析后除菌过滤。结果经纯化的疫苗各项纯化指标均符合中国药典2010年版的要求,杂蛋白去除率>99.9%;病毒纯化液在电镜下观察到典型的EV71病毒颗粒,经SDS-PAGE及Western blot分析,检测到与文献报道大小相符的EV71 VP1、VP2、VP3及特异性免疫反应;制备成疫苗后免疫大鼠能产生特异性中和抗体。结论本实验建立了Vero细胞的EV71灭活疫苗的纯化工艺,纯化后制备的EV71灭活疫苗具有较好的免疫原性。     

BAC5-scFv的表达、复性及活性检测

目的探讨以包涵体形式表达的抗鼻咽癌单克隆抗体(mAb)BAC5的单链抗体(BAC5-scFv)的纯化、复性方法,并对其活性进行检测。方法扩增pET-22b-scFv质粒转化的大肠杆菌BL21(DE3)菌株,培养、破菌后,分离和变性包涵体,用Ni-NTA His Bind层析柱纯化变性的scFv。经稀释、透析及尿素梯度凝胶层析柱3种方法进行复性。用细胞免疫组化染色和蛋白印迹法(Western blot),鉴定复性后的BAC5-scFv的免疫活性。结果Ni-NTA His Bind亲和层析柱能有效纯化变性的scFv。以尿素梯度凝胶层析柱复性的蛋白回收率最高。免疫细胞化学染色法检测及Western blot分析证实,复性后的BAC5-scFv可与CNE2细胞上的抗原特异性结合。结论以包涵体形式表达的BAC5-scFv经变性、纯化及复性后,获得良好的免疫活性,为大量制备具有活性的BAC5-scFv,并用于鼻咽癌的放射免疫显像和治疗研究奠定了基础。     

131I治疗ATD治疗后白细胞减少Graves病近期疗效观察

目的观察131I治疗ATD治疗后白细胞减少Graves病的疗效及安全性。资料与方法在应用生白细胞治疗的基础上,对145例ATD治疗后出现白细胞减少的Graves病患者,进行131I治疗,观察治疗前、治疗后2周、1月、3月、6月的白细胞变化及治疗后6月的疗效。结果131I治疗2周及1个月后外周血白细胞与治疗前比较无显著性统计学差异(P>0.05),131I治疗3个月及6个月后外周血细胞与治疗前比较有显著性统计学差异(P<0.01),治疗3个月及6个月细胞明显高于治疗前。131I一次治疗6月后一次治疗痊愈率60%,总有效率为97.9%,甲低发生率15.8%。结论131I治疗ATD治疗后出现白细胞减少的Graves病安全有效,治疗前及治疗后1月持续升白细胞药物治疗能提高131I治疗的安全性     

18F-FDG SPECT/CT检查结合CA125检测在卵巢癌术后复发转移诊断中的价值

目的:探讨18F-FDG SPECT/CT检查结合CA125检测在卵巢癌术后复发病例的早期诊断价值。方法:对43例卵巢癌术后病例同时进行18F-FDG SPECT/CT检查和CA125检测,怀疑复发的病例进行CT/MRI检查和临床随访,以进一步确诊。结果:43例病人中,18F-FDG SPECT/CT检查发现核素异常浓聚24例,经CT/MRI检查和临床资料证实为转移灶19例,阳性率和假阳性率分别为44.2%、11.6%,特异性为83.8%。本组病例CA125升高13例,证实为转移灶病例中CA125升高12例,阳性率和假阳性率分别为27.9%、2.3%,特异性为96.9%。结论:18F-FDG SPECT/CT检查和CA125检测是卵巢癌术后复发的可靠检查方法。