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恩替卡韦与阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎的早期病毒学反应观察 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:观察恩替卡韦(ETV)与阿德福韦酯(ADV)治疗慢性乙型肝炎的早期血清生化指标与病毒学反应。方法:试验组口服恩替卡韦,每日0·5mg;对照组口服阿德福韦酯,每日10mg。定期检测肝功能和血清HBV DNA定量,以服药前数据作为基线值,服药后第4、12、24周分别作为快速病毒学反应(RVR)、初始病毒学反应(IVR)、早期病毒学反应(EVR)。结果:两组服药前HBV DNA基线水平无显著差异(P>0·05)。ETV组RVR、IVR、EVR期的HBV DNA降幅(logcp/ml)分别为2·60±0·85、3·22±1·24、3·06±1·29,显著高于同期ADV组的1·69±0·82、2·03±1·10、2·00±1·25(P<0·05);ETV组早期病毒学应答率和HBV DNA下降至检测水平以下者比例分别达到82%、51%,高于ADV对照组的69%、36%;ETV原发无应答比例(18%)低于ADV组(31%)。两组ALT完全复常的比例均为64%。ETV组有2例治疗后1月ALT显著升高,而在治疗3月后ALT完全恢复正常,血清HBV DNA下降至检测水平以下。结论:ETV组抗HBV作用相对较强,但与ADV的生化学应答相近。少数恩替卡韦治疗者出现短暂ALT显著升高,似乎其病毒学早期反应更好。 相似文献
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乙肝患者血清HBsAg与HBsAb双阳性的特殊模式分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的报告乙肝表面抗原(HBsAg)与表面抗体(HBsAb)双阳性患者血清中这2种标志物波动情况及S区编码碱基序列变异特点。方法收集本院2005年7月收治的2例患者血清标本(经酶联免疫吸附试验定量检测HBsAg与HBsAb均阳性)并随访2月;PCR法扩增血清中HBV的S基因并测序。结果1例患者初始血清HBsAg与HBsAb分别为0.11IU/ml、18.44mIU/ml,2月后HBsAg消失;另1例患者初始血清HBsAg与HBsAb分别为24.09IU/Ml、840.06mIU/Ml,2月后HBsAb不能检出。在二者初始血清中扩增出完整HBV的S基因片段,序列分析显示为基因型D和血清亚型ayw,共同抗原决定簇α的aa145位甘氨酸编码序列未发生缺失或突变。结论2例HBsAg与HBsAb双阳性患者血清中仍存在HBV,其抗原决定簇α区未发生因aa145位甘氨酸突变导致的免疫原性改变。 相似文献
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目的构建表达HCV非结构蛋白3(NS3)的重组腺病毒RAd/NS3,探讨其免疫小鼠后诱导机体产生特异性免疫应答的能力。方法PCR扩增编码NS3蛋白(329~935位氨基酸)的基因片段,定向克隆至重组腺病毒AdEasy-1系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,与腺病毒基因组质粒pAdEasy-1共转化BJ5183菌,利用细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒,转染293细胞,以包装、扩增重组腺病毒。将重组腺病毒以1×10^8 pfu剂量经皮下注射免疫BALB/c小鼠,并以100μg重组质粒pRC/NS3经肌内注射途径免疫小鼠为对照。ELISA法检测免疫小鼠血清抗体水平,^51 Cr释放法检测免疫小鼠细胞毒性T淋巴细胞体外杀伤功能。结果重组腺病毒经皮下免疫小鼠后可刺激机体产生较强的特异性体液免疫应答和细胞免疫应答,且免疫效果强于重组质粒pRC/NS3组,初次免疫后2周,前者20只小鼠抗-HCV全部阳转,而后者10只小鼠仅3只阳转,未观察到明显的不良反应。结论表达HCV NS3抗原的重组腺病毒载体疫苗能够诱导机体产生有效的体液和细胞免疫应答。 相似文献
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目的 构建乙肝核酸疫苗pCI/S2S,研究其接种小鼠后,接种局部肌肉特异性抗原蛋白的表达以及所诱生的免疫应答反应.方法 从慢性乙肝患者的混合血清中制备HBV DNA模板,扩增出基因片段S2S,与pCI载体进行连接,得到重组质粒pCI/S2S.将其肌肉注射接种BALB/c小鼠,在不同的时间点检测血清中抗-HBs及抗-preS2;并于第12周时用细胞毒性检测试剂盒(LDH)检测体外细胞毒性T细胞(CTL)活性,同时以免疫组织化学法检测小鼠接种部位HBsAg的表达.结果 小鼠肌肉接种pCI/S2S完成后1周血清抗-HBs、抗-preS2开始阳转,阳转率于6周或8周达高峰,且能诱生特异性CTL应答.此外,免疫组织化学法能在小鼠的接种局部肌细胞中检测出目的抗原蛋白的表达.结论 乙肝核酸疫苗pCI/S2S接种小鼠后,能在小鼠体内诱生特异性的体液免疫和细胞免疫应答. 相似文献
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目的 体外研究特异的小干扰RNA(siRNA)对肺腺癌细胞A549 hnRNP B1 基因表达及生长的抑制作用. 方法设计和构建由H1启动子驱动产生的特异的hnRNP B1 siRNA 表达质粒,转染至A549细胞,荧光定量PCR法及Western blot检测hnRNP B1基因的表达,MTT法检测该表达质粒转染后对A549细胞生长的影响.结果 针对hnRNP B1 基因构建的重组质粒具有明显的干扰效果,受特异hnRNP B1 siRNA 干扰的A549细胞hnRNP B1 mRNA及蛋白表达下调,细胞生长受到抑制.结论 应用RNA干扰技术可阻止hnRNP B1基因的表达,有望成为肿瘤基因治疗新的研究方向. 相似文献
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目的:了解体内外两种方法检测乙型肝炎DNA疫苗诱生BALB/c小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性的特点,比较其异同,建立与体外法互为补充,且更加直观、简便的活体CTL活性检测模型。方法:用HBV-S真核表达质粒pVAX1/S对SP2/0细胞进行转染,经鉴定后作为目的靶细胞(稳定转染并表达HBV主蛋白,命名为SP2/0-S细胞);对照靶细胞为稳定转染pVAX1空载质粒的细胞(命名为SP2/0-P细胞)备用。活体诱生实验:用目的或对照靶细胞分别使小鼠荷瘤,观察免疫及非免疫小鼠在各靶细胞负荷下的生存时间与肿瘤的生长情况,设置不同组合做同期对照观察,小鼠生存率的差异可以提示体内特异性CTL是否存在。体外诱生实验:采用经典CTL活性检测方法,LDH释放法成品药盒。SP2/0-S细胞与SP2/0-P细胞作为靶细胞,免疫鼠与非免疫鼠的脾细胞为效应细胞,按照不同效/靶比共孵育后以酶标仪检测LDH的释放活性。结果:活体诱生实验:免疫小鼠存活时间明显长于对照小鼠(P〈0.05)。体外诱生实验:免疫鼠CTL活性在彬靶比为50/1时出现最大杀伤活性,为36.9%,明显优于对照组(P〈0.05)。结论:体内外两种方法均能够检测到乙型肝炎DNA疫苗诱生BALB/c小鼠特异性CTL活性,实验中发现体外LDH释放法CTL活性并不高,但是总体上仍然能够反映CTL活性。而活体诱生实验操作相对简便,表现更为直观,可望成为与经典方法相互补充的新型实验模型。 相似文献
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preS2S/adw真核表达质粒构建及其表达的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:针对我国乙型肝炎(乙肝)病毒流行的血清型,采用美国药品及食物鉴定委员会承认的应用于疫苗临床使用的载体pVAX1,构建了肝病毒adw血清型核酸疫苗preS2S的真核表达质粒,对其在真核细胞中的表达进行初步研究。方法:采用PCR法扩增preS2S片段,插入pVAX1载体中,测定DNA序列后,转染SP2/0细胞,抽提转染后SP2/0细胞的总RNA,再用RT-PCR法扩增其中的preS2S片段,以检测其表达的基础,结果:测序证实了该片段为乙肝病毒adw型preS2S基因。PCR扩增法检测出的转染细胞中存在preS2S基因,结论:获得了adw血清型乙肝病毒preS2S的真核表达质粒,提示其能够在真核细胞中表达目的基因蛋白。 相似文献