重组人脂联素基因在减毒沙门氏菌中的表达

目的：构建携带人脂联素（AdipoQ）基因真核表达载体并在减毒沙门氏菌中表达,为AdipoQ对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的基因治疗提供依据.方法：从人脂肪组织中提取总RNA,通过实时荧光定量PCR（rRT-PCR）方法获得Adi-poQ基因并将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,构建pEG-FP-N1-AdipoQ重组载体.重组质粒经鉴定后再电转入减毒沙门氏菌SL7207中表达.结果：克隆的人AdipoQ基因744bp测序结果显示：1个碱基发生突变,654位：A→T,突变率为0.1%,氨基酸Glu→Asp.经SDS-PAGE,Western Blot检测融合蛋白Mr约为55×10^3（绿色荧光蛋白Mr约为27×10^3）,能够被AdipoQ抗体识别.结论：成功构建携带AdipoQ基因真核表达载体的减毒沙门氏菌株,AdipoQ基因能够在减毒沙门氏菌中表达并与绿色荧光蛋白融合.为进一步研究其在NAFLD中的作用机制奠定了基础.     

TGF-β1真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

目的：构建人转化生长因子-β1（TGF-β1）的真核表达载体,并检测其融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达,为阐明TGF-β1在肝纤维化发生、发展中的作用以及建立相应的基因沉寂治疗途径奠定基础.方法：从人的肝脏组织中提取总RNA,通过RT-PCR方法获得人TGF-β1基因,将其克隆到真核荧光表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒pEGFP-N1-TGF-β1,转染真核表达细胞COS-7中,通过荧光显微镜检测其表达,RT-PCR和Western Blot检测TGF-β1基因在真核细胞中的表达.结果：通过RT-PCR方法克隆人TGF-β1基因为1173bp,与目的基因片段大小相一致; 测序结果显示,于531位有1个碱基突变：T→C,为无义突变.通过RT-PCR和Western Blot检测到TGF-β1基因的表达,其融合蛋白分子质量约为52ku（绿色荧光蛋白分子质量约为27ku）,说明重组质粒在COS-7细胞内正常表达.结论：成功的构建了真核表达质粒pEGFP-N1-TGF-β1,并在真核细胞COS-7中表达,为进一步研究其在肝纤维化的基因治疗中奠定了基础.     

普贝生用于中晚期妊娠利凡诺引产失败的临床观察

目的探讨普贝生用于中晚期妊娠利凡诺引产失败的临床效果。方法24例中晚期妊娠利凡诺引产失败的患者分成普贝生组（n=12）和催产素组（n=12）,分别阴道后穹窿内放置普贝生和催产素2．51U加入5％葡萄糖500ml内静滴。观察促宫颈成熟效果、引产效果和副作用。结果普贝生组在促宫颈成熟效果和引产效果上显著高于催产素组（P〈0．05）。结论普贝生用于中晚期妊娠利凡诺引产失败后的补救效果肯定,值得推广。     

去骨瓣减压术在重型颅脑损伤中的应用及疗效研究进展

去骨瓣减压术在重型颅脑外伤的救治中有着重要地位,但其疗效一直存在争议。随着两项大型随机对照实验的完成,去骨瓣减压术降低患者死亡率的疗效得到了肯定,但伴随而来的更多严重伤残再一次引起了广泛的讨论。本文对近年来去骨瓣减压术在重型颅脑损伤中的应用及其治疗效果的研究进展作一综述。     

联合检测NSE、S100B、hs-CRP及NIHSS评分对急性脑梗死患者病情严重程度的评估价值

目的 探讨联合检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100B、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)及美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分对急性脑梗死患者病情严重程度的评估价值.方法 选取我院2019年1月至2020年3月收治的急性脑梗死患者80例,依据改良Rankin量表(mRS)评分将其分为重度组(mRS评分≥3...     

结核杆菌Edman株Ag85C基因的克隆表达与鉴定

目的克隆人结核杆菌Ag85C基因并在大肠杆菌中表达,研究其对结核病预防和治疗过程中的免疫保护作用。方法设计一对特异性引物,PCR扩增人结核杆菌Edman株Ag85C基因开放阅读框并定向克隆到原核表达载体pQE30,通过酶切、PCR和测序鉴定重组质粒,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组蛋白。结果构建了pQE30-Ag85C重组质粒;在大肠杆菌中表达了一分子量约30kDa的重组蛋白。结论重组质粒pQE30-Ag85C构建成功并在大肠杆菌中高效表达,为Ag85C保护性抗原位点分析和新型疫苗的研制奠定了基础。     

万东F99-Ⅳ型X线机故障维修1例

我院自1998引进万东F99-Ⅳ型500 mAX线机是一款无天轨、安装简便的专用拍片机[1].该机性能稳定、故障率低、使用方便,能完成全身各部位拍摄.该机安装至今总体运行较为理想,现介绍1例故障现象及维修方法. 1 故障现象 机器不能曝光,按下手闸Ⅰ后,旋转阳极启动,接着按下手闸Ⅱ后,机器无动作,毫安表无指示,电源电压表无压降,蜂鸣器不响,无法曝光.     

上海市闸北区1990—2008年甲乙类传染病疫情分析

为了解闸北区近19年传染病的流行趋势和演变规律,评价防制措施对传染病流行的影响,现对1990—2008年闸北区甲、乙类法定报告传染病进行流行病学分析。     

选择性肾动脉栓塞治疗肾脏疾病的临床应用

目的：评价选择性肾动脉栓塞治疗在肾癌、症状性肾血管平滑肌脂肪瘤和肾创伤出血病人中的应用价值。方法：采用改良Seldinger技术经皮股动脉穿刺插管，对68例进行选择性肾动脉栓塞治疗，其中30例为肾癌术前辅助治疗，应用明胶海绵颗粒栓塞；8例为晚期肾癌姑息性治疗，采用丝裂霉素＋碘油的乳剂行末梢栓塞，然后用明胶海绵行肾动脉主干栓塞；6例症状性肾血管平滑肌脂肪瘤，采用真丝线段栓塞；24例肾创伤出血，采用自身血块、明胶海绵或弹簧钢圈栓塞。结果：肾癌术前栓塞者，术中肿瘤易剥离，手术野清晰，出血量少，手术时间缩短；晚期肾癌姑息治疗和症状性肾血管平滑肌脂肪瘤者，栓塞术后1~3周临床症状显著改善，3个月后肿瘤体积明显缩小，平均缩小65.6%；肾创伤性出血者，止血迅速，不影响肾功能。全部病例在栓塞治疗后无严重并发症发生。结论：选择性肾动脉栓塞术是治疗肾脏疾病的一种微创、安全、有效的方法，并发症少，可用于肾癌术前辅助治疗、晚期肾癌的姑息性治疗及肾血管平滑肌脂肪瘤和肾创伤出血的治疗，值得临床推广应用。     

重温消渴再析瘀

中医学认为,消渴病并发症的发生多与其"瘀血"相关。本文认为消渴病的病机为"精微不得正化",致瘀原因为"高脂痰浊阻络"。由于高脂痰浊的形成是多病因、多脏腑的共同作用。因而,无论消渴病或消渴病并发症的临床表现均具有辨证多样性的特点,非传统理论认为的"阴虚燥热"、"津耗血枯"独为之。