丹参酮ⅡA对COX-2激活Wnt/β-catenin信号通路介导的人肠癌细胞VEGF表达的调控作用

目的:探讨丹参酮ⅡA通过环氧化酶-2(COX-2)-Wnt/β-catenin信号通路调控人肠癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的作用机制。方法:分别采用PGE2和COX-2选择性抑制剂NS-398上调及抑制LoVo细胞COX-2表达,Western Blot检测COX-2对β-catenin蛋白表达的影响;分别采用丹参酮ⅡA、PGE2和/或GSK-3β选择性抑制剂SB-216763作用人肠癌HCT-116细胞24h,Western Blot法检测丹参酮ⅡA对COX-2和β-catenin蛋白表达的影响;ELISA法检测丹参酮ⅡA对VEGF表达的影响。结果:与对照组比较,PGE2能够显著上调LoVo细胞中COX-2蛋白表达,同时显著上调β-catenin在细胞总蛋白、浆蛋白和核蛋白中的表达水平;反之,COX-2抑制剂NS-398能够显著下调COX-2和β-catenin蛋白表达水平。丹参酮ⅡA能够显著下调COX-2和β-catenin蛋白在人肠癌LoVo细胞中表达水平,并且能够显著下调PGE2诱导的COX-2和β-catenin蛋白的高表达;同时,丹参酮ⅡA能够显著下调人肠癌LoVo细胞VEGF表达水平,并且能够下调PGE2和GSK-3β抑制剂SB-216763诱导的VEGF高表达。结论:丹参酮ⅡA通过抑制人肠癌细胞中COX-2的表达,阻止细胞中β-catenin的累积,从而阻断Wnt/β-catenin信号通路,下调VEGF表达,这可能是丹参酮ⅡA抗大肠癌血管新生的作用机制之一。     

东洞庭湖湖洲钉螺幼螺食性的观察

东洞庭湖湖洲钉螺幼螺食性的观察周利红，彭雪华，左家铮（湖南省寄生虫病防治研究所４１４０００）我们在东洞庭湖湖洲钉螺螺口动力学的研究中，发现每年５～６月为钉螺繁殖期，幼螺出现高峰。幼螺孵出初期，多营浮游生活，此种习性，有可能受洞庭湖生态系统中某一个营养...     

两种人类肝细胞系评价饮水氯化消毒副产物MX致DNA损伤作用的敏感性

背景与目的:研究两种人类来源的肝细胞在评价饮水氯化消毒副产物3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2(5氯)-呋喃酮(MX)DNA损伤作用的敏感性.材料与方法:应用单细胞凝胶电泳试验(彗星试验),研究人肝癌细胞株HepG2和人胚肝细胞L-02在评价饮水氯化消毒副产物MX DNA损伤作用的敏感性.结果:随着MX剂量增加,可引起HepG2(＞ 30 μmol/L)和L-02细胞(＞100μmol/L)DNA迁移度显著增加;中度以上损伤所占百分比在同剂量组中HepG2细胞大于L-02细胞,经比较分析,差异有统计学意义(χ2=20.985;8.0;11.97,P＜0.05).结论:应用单细胞凝胶电泳试验评价MX的DNA损伤作用,人肝癌细胞株HepG2比人胚肝细胞L-02更为敏感.     

JNK信号通路介导MDR1/P-gp调控人结肠癌多药耐药

目的:探讨在人结肠癌多药耐药细胞株HCT8/V中JNK信号传导通路与多药耐药1(MDR1)基因表达的关系.方法:MTT法检测人结肠癌多药耐药细胞株HCT8/V及其敏感株HCT8细胞对多种抗肿瘤药物的敏感性;抑制JNK信号通路的激活后,采用双荧光素酶活性报告基因检测MDR1启动子转录活性的表达;实时荧光定量PCR检测MD...     

丹参酮ⅡA调节COX-2对人结肠癌HCT-116细胞VEGF表达的影响

目的:研究中药丹参有效活性成分丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人结肠癌HCT-116细胞的生长抑制作用及其调控COX-2对HCT-116细胞VEGF表达的影响.方法:利用MTT法检测不同浓度的TanⅡA对人结肠癌HCT-116细胞的生长抑制作用,将pGL3-Basic-COX-2-promoter重组质粒和pRLTK内参质粒...     

左金丸醇提物抑制幽门螺旋杆菌感染人胃癌细胞增殖及诱导凋亡的实验研究

目的研究左金丸醇提物对幽门螺旋杆菌感染人胃癌MKN45细胞生长及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法以不同浓度(7.81、15.63、31.25、62.5、125、250、500μg/mL)的左金丸醇提物分别作用于幽门螺旋杆菌感染的人胃癌MKN45细胞,24、48、72h后用Western blot法检测不同浓度的左金丸醇提物作用于幽门螺旋杆菌感染人胃癌MKN45细胞时凋亡相关蛋白Bax、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的表达情况。结果幽门螺旋杆菌感染MKN45细胞组、左金丸醇提物低剂量(40μg/mL)组、左金丸醇提物高剂量(180μ/mL)组凋亡细胞百分比分别为:(0.28±0.105)%、(3.27±0.702)%、(7.7±0.721)%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05),凋亡率呈剂量依赖性;Western blot检测结果显示,左金丸醇提物低、高剂量作用幽门螺旋杆菌感染MKN45细胞24h后,PARP蛋白(89×103)、Bax蛋白表达明显增强,凋亡率上升,并呈现剂量依赖性。结论左金丸醇提物能抑制幽门螺旋杆菌感染人胃癌MKN45细胞的增殖并诱导细胞发生凋亡。调控凋亡相关基因Bax、PARP的表达可能是其诱导幽门螺旋杆菌感染的人胃癌MKN45细胞凋亡的分子机制之一。     

基质金属蛋白酶-9对结直肠癌侵袭转移的影响

 基质金属蛋白酶-9（MMP-9）是结直肠癌发生发展的重要促进基因,能够诱导结直肠癌细胞增殖、血管新生和肿瘤浸润,导致结直肠癌的侵袭转移。MMP-9对结直肠癌侵袭转移的影响既可独自完成又可与其他基因联合完成,是结直肠癌晚期转移的重要蛋白酶。     

饮水氯化消毒副产物MX对人胚肝细胞(L-02)的DNA损伤及凋亡作用

目的　研究饮水氯化消毒副产物 3 氯 4 二氯甲基 5 羟基 2 (5氢 ) 呋喃酮 (MX)致人胚肝细胞 (L 0 2 )DNA损伤及凋亡作用。方法　以L 0 2为靶细胞 ,采用单细胞凝胶电泳技术 (SCGE)和流式细胞术 (FCM)分别检测MX致L 0 2细胞DNA损伤及凋亡作用。结果　随着MX浓度的增加 ,L 0 2细胞DNA链断裂逐渐增加 ,且 10 0和 30 0 μmol L剂量组与溶剂对照组相比具有统计学显著性差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;MX各剂量组均引起L 0 2细胞凋亡率明显增加 ,与溶剂对照组相比具有统计学显著性差异 (P <0 0 0 1)。结论　饮水氯化消毒副产物MX可致L 0 2细胞DNA单链断裂和凋亡     

健脾解毒方诱导裸鼠人胃癌细胞凋亡相关基因表达的研究

目的:研究健脾解毒方对裸鼠人胃癌皮下移植瘤的抑制作用,利用基因芯片筛选其诱导裸鼠人胃癌细胞凋亡相关基因表达,分析其可能的作用靶点。方法:建立人胃癌MKN-45细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组:生理盐水对照组、替加氟化疗组100mg·kg-1·2d-1、中药健脾解毒方组(40g/kg)、健脾解毒方联合化疗药组(健脾解毒方40g/kg联合替加氟100mg·kg-1·2d-1,每组12只。给药14d后观察各组瘤体质量量和动物生存期,并利用Affymetrix Genechip U133 Plus2.0基因芯片筛选健脾解毒方诱导凋亡相关基因表达。结果:与对照组相比,健脾解毒方组瘤体质量量明显降低(P<0.01),生存期显著延长(P<0.01)。且健脾解毒方联合化疗药组对肿瘤的生长抑制作用明显优于单纯化疗组和单纯健脾解毒方组(P<0.05)。基因芯片分析结果显示,健脾解毒方治疗后表达丰度相差在2倍以上基因的有879个,其中与细胞凋亡相关的基因有358个。结论:健脾解毒方抗裸鼠人胃癌作用,联合化疗药可提高疗效,其抗癌机制与诱导胃癌细胞凋亡有关。     

青光眼视网膜节细胞病变中的自噬异常

<正>青光眼是以视网膜节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)进行性死亡和轴突溃变为病理特征的不可逆的严重致盲性神经退行性病变~([1-2])。眼压升高是其主要的危险因素。RGCs是唯一能将视网膜处理后的视觉信息编码为神经冲动传输到脑的神经元,其损伤与死亡是青光眼视功能丧失的主要原因。因而,探讨青光眼病变中RGCs的死亡机制,保护和维持RGCs的存活以及增强其功能,对于青光眼的防治至关重要。自噬又称为Ⅱ型程序性细胞死亡,是细胞器和大分子物质