药物性肝损伤研究概述

药物性肝损伤（DILI）是造成药物研发失败、药物限制使用甚至撤出市场的主要原因之一,也是引发肝病的重要原因之一.然而,由于DILI症状的多样化和诊断金标准的缺乏,临床上很难将其确诊,也没有针对DILI的有效治疗方案,只能靠停药和对症支持治疗来缓解.应对DILI的最佳措施是在病发早期识别危害,以便能做到危害评价和危害回避,因此,开发新的DILI生物标志物是一条有效的应对途径,虽然目前并没有确定出新的标准,但有一些潜在的生物标志物已经得到认可.本文就DILI的危险因素、引发方式、临床分类、诊断和处理及生物标志物做一简要综述.     

白藜芦醇对曲格列酮诱发HepaRG细胞氧化损伤的影响

目的：探讨白藜芦醇对曲格列酮诱发HepaRG细胞氧化损伤的影响及可能作用机制。方法实验分组包括：正常对照组（含有0．1％DMSO的RPMI 1640培养基）、50μmol／L曲格列酮组、白藜芦醇3种浓度（3．75,7．5,15μmol／L）与50μmol／L曲格列酮的共处理组。 MTT法检测曲格列酮、白藜芦醇以及白藜芦醇与50μmol／L曲格列酮共同作用对HepaRG细胞的增殖抑制作用。以上各组作用48 h后检测各组细胞内活性氧（ reactive oxygen spe－cies, ROS）的含量,脂质过氧化（ lipid peroxidation ）和细胞凋亡程度,细胞的总抗氧化能力,以及细胞内过氧化氢酶（catalase, CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase, GSH－px）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）的活性。结果曲格列酮能明显导致HepaRG细胞产生氧化应激现象。与正常对照组相比,曲格列酮处理组ROS和脂质过氧化产物丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平以及细胞凋亡和坏死率均显著升高（P＜0．05）,总抗氧化能力大幅降低（P＜0．05）,CAT、GSH－px、SOD的活性均降低（P＜0．05）。加入不同浓度白藜芦醇共同作用后, ROS和MDA生成量有所下降（P＜0．05）,细胞凋亡和坏死率也相应下降（P＜0．05）,细胞总抗氧化能力以及以上3种抗氧化物酶的活性均有所提高（P＜0．05）,且有一定的剂量依赖关系。结论曲格列酮能引起HepaRG细胞产生明显的氧化应激作用,白藜芦醇能够显著改善由曲格列酮对 HepaRG细胞所造成的氧化损伤。     

生物胺系统抗抑郁药物依赖性评价研究进展

生物胺系统抗抑郁药物呈现出良好的经济效益和开发前景,近年来针对5-羟色胺(5-HT)/去甲肾上腺素(NE)/多巴胺(DA)三重靶点再摄取抑制作用的抗抑郁药物研发得到快速发展,但其可能伴随的副作用─滥用与成瘾,已成为世界公共卫生领域的严重问题.美国食品药品监督管理局(FDA)、欧洲药品管理局(EMA)和我国国家药品监督管...     

二乙基亚硝胺对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

为研究二乙基亚硝胺对淋巴细胞增殖的影响，采用噻唑兰比色法测定了静止激活Ｔ及Ｂ淋巴细胞的增殖率。结果表明ＤＥＮ灌胃染毒１周可抑制由ＣｏｎＡ和ＰＨＡ所诱导的脾Ｔ细胞增殖；其抑制率为ＣｏｎＡ７％－４９％，ＰＨＡ８％－４８％。ＤＥＮ对脂多糖诱导的Ｂ淋巴细胞增殖呈及性，即低浓度时增强，高浓度进抑制增殖。     

二乙基亚硝胺对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

为研究二乙基亚硝胺(DEN)对淋巴细胞增殖的影响,来用噻唑兰(MTT)比色法测定了静止及激活的T及B淋巴细胞的增殖率.结果表明DEN灌胃染毒1周(2.5,5和10mg/kg)可抑制由ConA和PHA所诱导的脾T细胞增殖;其抑制率为ConA7%～49%,PHA 8%～48%,DEN对脂多糖诱导的B淋巴细胞增殖呈双向性,即低浓度时增强,高浓度时抑制增殖.绿茶水溶性提取物可拮抗或阻断DEN对淋巴细胞增殖的抑制作用.     

二乙基亚硝胺对巨噬细胞吞噬功能的影响

为研究二乙基亚硝胺(DEN)对巨噬细胞活化和吞噬作用的影响,采用蜜噻蓝(MTT)及邻苯二胺比色法测定了小鼠腹腔巨噬细胞的活性和吞噬功能,结果表明DEN连续灌气染毒一周(5,10mg/kg)可明显降低腹腔巨噬细胞的数量和活性.此外,DEN还可抑制腹腔巨噬细胞对羊红细胞的吞噬作用,且呈剂量反应关系.DEN的这种抑制作用可能与其降低机体对致病微生物感染的抵抗力有关.     

基因芯片技术研究抗病毒药物Bay41-4109的肝毒性机制

背景与目的:研究新型抗乙肝病毒药物Bay41-4109的肝毒性机制.材料与方法:用典型诱导剂苯巴比妥作为对照,观察大鼠连续5d灌胃给予Bay41-4109后肝脏脏器系数的变化,并对肝脏进行组织学检查;用MTT比色法进行HepG2细胞毒性实验.然后利用大鼠和人的全基因组芯片,分析Bay41-4109对大鼠肝脏和人肝细胞基因表达谱的影响,并对基因芯片数据进行聚类分析和初步功能分析,采用RT-PCR对部分差异表达的基因进行验证.结果:Bay41-4109和苯巴比妥均引起大鼠肝脏脏器系数显著增高(P＜0.05),肝组织局部出现小的灶性坏死;Bay41-4109引起大鼠肝脏发生差异表达的基因主要与药物代谢及脂肪和能量代谢有关,其中有26个基因的改变与苯巴比妥一致.体外研究发现Bay41-4109在IC20和IC50浓度下引起HepG2细胞发生差异表达的基因主要与脂肪、氨基酸、能量代谢有关,与大鼠肝脏基因芯片结果一致.差异表达基因用RT-PCR能得到验证.结论:Bay41-4109的肝毒性与药物代谢酶表达异常以及脂肪能量代谢异常有关.     

高通量测序和实时荧光定量PCR分析何首乌肝损伤与肠道微生物组的关系

目的采用Illumina高通量测序技术和实时荧光定量PCR（Real-Time PCR,RT-PCR）法研究何首乌（PM）致肝损伤与肠道微生物组间的关系,并验证两种定量方法的一致性。方法雄性SD大鼠随机分为5组：对照组、脂多糖（LPS）组、LPS+对乙酰氨基酚（APAP）组、PM组和LPS+PM组;大鼠尾iv给予4.0 mg/kg LPS建立肝损伤模型,各组相应每天1次ig给予0.625 g/kg APAP和12 g生药/kg PM,记录大鼠体质量;分别于造模后2、14 h、5和8 d,对大鼠粪便中细菌16SrRNA基因的V4高变区进行Illumina高通量测序,根据测序结果得出的差异物种,采用RT-PCR进行验证;取造模后8 d大鼠肝脏组织,HE染色,光学显微镜观察。结果大鼠肝脏病理学检查结果显示,与对照组比较,LPS组大鼠存在肉芽肿,PM组无异常病变;与LPS组比较,LPS+PM大鼠肝细胞出现轻度变性和微小肉芽肿增多,LPS+APAP组可见微小肉芽肿和淋巴细胞浸润。Illumina高通量测序结果提示,与对照组比较,随着PM给药次数增加,单独给予PM的大鼠肠道微生物无显著变化;LPS+PM组表现为肠球菌科和毛螺旋菌科细菌逐渐增加,乳杆菌属细菌减少,且与LPS组有差异;RT-PCR结果显示,与对照组比较,随着PM给药次数的增加,单独给予PM的大鼠肠道微生物无显著变化;LPS+PM组肠球菌科、毛螺旋菌科细菌数显著增加（P<0.05）,乳杆菌属细菌数显著减少（P<0.05）,且与LPS组比较有显著差异。结论 PM肝损伤大鼠存在不同程度的菌群失衡,且Illumina高通量测序和RT-PCR检测结果具有良好的一致性,但Illumina高通量测序技术可获得更多的微生物信息,更具优势。