沉默ARHGDIB对乳腺癌细胞阿霉素耐药的影响

目的探讨沉默ARHGDIB对乳腺癌细胞阿霉素耐药的影响。方法应用MTT法检测阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADR细胞活力以及耐药指数。采用qRT-PCR和Western blot法检测MCF-7和MCF-7/ADR细胞中ARHGDIB的表达。选用siRNA沉默ARHGDIB的表达,并检测MCF-7/ADR细胞株对化疗药物阿霉素的敏感性。结果阿霉素抑制MCF-7和MCF-7/ADR细胞存活的IC_(50)分别是32.35μmol/L和1 533.33μmol/L,耐药指数是47(P0.01)。在乳腺癌的阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADR中ARHGDIB的mRNA水平和蛋白水平均升高(P0.01)。沉默ARHGDIB可导致MCF-7/ADR细胞阿霉素耐药性的降低(P0.01)。结论沉默ARHGDIB可增强乳腺癌细胞对阿霉素的敏感性,部分逆转乳腺癌细胞的耐药性。     

抑制自噬对乳腺癌阿霉素耐药的逆转作用

目的探讨自噬在乳腺癌阿霉素耐药过程中发挥的作用。方法采用大剂量阿霉素间歇诱导MCF-7细胞;应用MTT法检测阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADM的耐药指数;通过qRT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光法检测自噬表达;选用自噬抑制剂3-Methyladenine(3-MA)抑制细胞自噬,并检测MCF-7/ADM细胞株耐药性的逆转情况。结果乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM成功建立,MCF-7/ADM细胞对ADM有明显的耐药性,阿霉素抑制MCF-7和MCF-7/ADM细胞存活的IC50值分别为1.0 971μg/ml和175.8 921μg/ml,耐药倍数为160(P0.01),且MCF-7/ADM细胞自噬表达升高,加入3-MA的实验组细胞耐药逆转倍数为1.16,差异有统计学意义(P0.05)。结论抑制自噬可部分逆转MCF-7/ADM细胞耐药。     

乳腺癌中自噬相关基因LC3与凋亡相关基因XIAP的表达及意义

目的观察自噬相关基因LC3和凋亡相关基因XIAP在乳腺癌组织中的表达,探讨其表达与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用组织芯片平台,应用免疫组化法检测121例乳腺癌组织中LC3、XIAP的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果乳腺癌组织中,LC3和XIAP的高表达率分别为84.2%(102/121)和90.9%(110/121)。LC3的高表达与HER-2过表达呈显著正相关(P0.05),XIAP的高表达与Ki-67和HER-2过表达呈显著正相关(P均0.05),但均与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、淋巴结转移、ER和PR表达无关(P均0.05)。经Spearman秩相关检验,LC3和XIAP在乳腺癌中的表达呈显著正相关(P0.05)。结论在乳腺癌中,高自噬活性与低凋亡现象并存,HER-2可能参与其中。     

Hsa-miR-133a对人乳腺癌细胞侵袭和迁移的影响

目的 探讨Hsa-miR-133a(miR-133a)对人乳腺癌细胞侵袭、迁移和增殖的影响,并初步分析miR-133a影响乳腺癌细胞侵袭及迁移的可能机制.方法 用脂质体介导的转染方法将miR-133a阻遏物(miR-133a inhibitors)转染人乳腺癌细胞株MCF-7,以inhibitor negative control (inhibitor NC)作为阴性对照.通过MTS试剂盒和Transwell侵袭实验检测细胞增殖能力和侵袭力;采用Transwell迁移实验及划痕试验检测细胞迁移能力;再利用生物信息学方法预测miR-133a的靶基因,并对其靶基因进行基因功能分析.结果 (1)miR-133a inhibitors组与inhibitor NC组间细胞增殖活性差异无显著性(P>0.05);(2)划痕后miR-133a inhibitors组细胞迁移能力比inhibitor NC组明显增强(P<0.05);(3)Transwell侵袭及迁移实验显示转染miR-133a inhibitors后,MCF-7细胞的侵袭及迁移能力均明显增强(P<0.01,P<0.05);④生物信息学方法预测miR-133a的靶基因中,部分发挥了促进细胞侵袭、迁移的生物学功能.结论 (1)MiR-133a对人乳腺癌细胞的侵袭及迁移能力可能存在负性调控作用,可能成为乳腺癌治疗的潜在候选靶点;(2)MiR-133a可能通过多种靶基因发挥其对肿瘤的调控作用.     

乳腺癌组织中转化生长因子β1的表达及其介导乳腺癌侵袭和转移的机制

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白和mRNA在乳腺痛组织中的表达,及其与明胶酶和明胶酶抑制物的关系.方法 建它组织芯片平台,应用免疫组化SP法检测160例乳腺痛组织TGF-β1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、组织金属蛋白酶抑制物(TIMP)-1和TIMP-2蛋白的表达;应用原位分子杂交方法检测乳腺癌组织中TGF-β1 mRNA的表达.结果 160例乳腺癌TGF-β1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白表达的阳性率分别为73.7%、96.9%、95.0%、87.5%和89.4%,TGF-β1 mRNA表达的阳性率为56.2%.TGF-β1的蛋白表达与腋窝淋巴结转移、TNM分期和c-erbB-2表达有关(P＜0.05,P＜0.05和P＜0.01),TGF-β1的mRNA表达与腋窝淋巴结转移有关(P＜0.05).TGF-β1蛋白表达阳性组中位总生存期(OS)为60个月,中位无复发生存期(RFS)为59个月;TGF-β1蛋白表达阴性组中位OS为61个月,中位RFS为61个月,两组生存率差异无统计学意义(P=0.090),无复发生存率有统计学意义(P=0.023).TGF-β1的蛋白表达与MMP-2和MMP-9的表达均呈正相关(r=0.170,P＜0.05;r=0.221,P＜0.01).结论 TGF-β1的表达与乳腺癌侵袭和转移密切相关,TGF-β1的蛋白产物通过调控MMP-2和MMP-9促进乳腺癌的侵袭和转移.     

内皮细胞特异性分子1在肾癌组织的表达

[目的]探讨内皮细胞特异性分子1(ESM-1)在肾癌中的表达及其意义.[方法]应用免疫组织化学S-P法检测52例肾癌、32例癌旁正常肾组织中ESM-1的表达,并与CD34进行比较.[结果]ESM-1在正常肾组织与肾癌中均有表达.主要表达于血管内皮,部分表达在肾小管上皮和肾癌细胞.肾癌血管内皮的ESM-1表达率(50%)显著高于正常肾组织的血管内皮(0.06%)(p<0.001);ESM-1 f的表达在正常肾小管上皮细胞与癌细胞无显著差异;ESM-1在肾颗粒细胞癌中的高表达率为63.16%,明显高于在肾透明细胞癌中的表达(21.21%)(p<0.01),而与肿瘤的组织学分级、淋巴结转移和肿块大小无明显差异.肾癌间质血管ESM-1和CD34的表达呈正相关(r=0.452,P＜0.001).[结论]ESM-1表达可能与肾癌的血管生成及发生、发展有关,ESM-1可作为血管内皮的潜在标志物,并有可能作为肾癌的辅助诊断及预后判断的参考指标.     

子宫内膜病变组织中Artermin的表达及意义

目的 观察Artermin(ARTN)在子宫内膜病变组织中的表达及其临床意义.方法 建立组织微阵列平台,应用免疫组化SP法检测38例正常子宫内膜、20例子宫内膜简单型增生、20例子宫内膜复杂型增生和47例子宫内膜样腺癌组织中ARTN蛋白的表达.结果 子宫内膜样腺癌中ARTN的阳性率为83.0%,明显高于正常子宫内膜、子宫内膜简单型增生和复杂型增生(P<0.01);子宫内膜样腺癌中ARTN的表达与肿瘤组织学分级、肿瘤子宫肌层浸润均有相关性(P<0.01,P<0.05).结论 子宫内膜样腺癌中ARTN的表达失调,其可能参与子宫内膜癌的发生、发展.     

人肝细胞癌中miR-23a和XIAP的表达及意义

目的 探讨miR-23a和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在人肝细胞癌(HCC)中的表达、相互关系及临床病理意义.方法 建立组织微阵列,采用原位分子杂交方法分别检测150例人HCC和136例相对应的癌旁组织中miR-23a的变化;利用免疫组化两步法检测XIAP蛋白和Ki-67蛋白的表达水平.结果 HCC组织和癌旁组织中miR-23a的高表达率分别为48.7%(73/150)和77.2%(105/136),两者差异有统计学意义(P=0.001),XIAP蛋白在HCC和癌旁组织中的高表达率分别为25.3%(38/150)和22.1%(30/136),两者差异无统计学意义;miR-23a高表达率在患者中男性高于女性(P=0.037)、HBsAg阳性高于HBsAg阴性患者(P=0.022)、大肝癌高于小肝癌(P=0.021)、Ⅰ~Ⅱ期高于Ⅲ~Ⅳ期(P=0.002);而XIAP蛋白高表达在患者中小肝癌高于大肝癌(P=0.001)、Ⅰ~Ⅱ期高于Ⅲ~Ⅳ期(P=0.009).此外两者均与患者年龄、是否合并肝硬化、组织学分级无关.经Pearson相关检验,miR-23a和XIAP蛋白在HCC中的表达呈显著负相关性(rs=-0.308,P<0.01).结论 miR-23a和XIAP可能参与HCC的发生与发展.     

下调PMEPA1表达对肝癌细胞HepG2增殖与转移的影响

目的 观察沉默前列腺跨膜雄激素诱导蛋白1(PME-PA1)对肝癌细胞HepG2增殖和迁移的影响.方法 应用qRT-PCR、免疫组化染色和Western blot方法检测PMEPA1在肝癌细胞HepG2中mRNA和蛋白表达情况.分析PME-PA1在肝细胞性肝癌(HCC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系.使用siRNA干扰肝癌细胞HepG2中PMEPA1的表达,并应用MTT法,Transwell法检测肝癌细胞HepG2的增殖及迁移能力.结果 PMEPA1蛋白在HCC组织中表达高于正常肝组织.肝癌组织内PMEPA1蛋白表达与HCC患者肿瘤大小(P=0.0366)和淋巴结转移(P=0.0358)密切相关.与HCC患者性别、年龄、AFP水平高低、脉管浸润、组织学分级及TNM分期等均无相关性.PMEPA1-siRNA肝癌细胞HepG2 PMEPA1蛋白及mRNA表达均下调(P<0.01).siPMEPA1转染细胞增殖能力及迁移能力均降低(P<0.01).结论 PMEPA1表达可能促进HCC的增殖和迁移.     

硫酸亚铁对溃疡性结肠炎模型大鼠氧化应激状态的影响

目的考察口服硫酸亚铁(FeSO4)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠氧化应激状态的影响。方法采用TNBS乙醇溶液复制UC大鼠模型,雄性SD大鼠60只,随机分为6组,每组10只,分别为正常对照组、模型对照组、FeSO4对照组(100 mg.kg-1.d-1)和FeSO4低剂量组(50 mg.kg-1.d-1)、中剂量组(100 mg.kg-1.d-1)和高剂量组(300 mg.kg-1.d-1),给药2周后分别观察大鼠的一般状态、组织病理学变化、组织及血清超氧化物歧化酶(SOD)与丙二醛(MDA)水平。结果FeSO4中、高剂量组大鼠体质量减轻,腹泻动物数增加,结肠组织损伤加重,血清与结肠组织SOD活性降低、MDA水平升高(P<0.05)。结论UC模型大鼠体内存在氧化应激,口服补充FeSO4可能会进一步加剧其体内氧化应激状态及结肠组织病理学损伤。