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目的构建能高效干扰Trop2基因的si RNA,转染人喉癌HEP2细胞,并初步鉴定其干扰效果。方法以人Trop2基因为靶基因,设计合成3条针对不同作用位点的si RNA干扰序列,用脂质体法将各小干扰序列瞬时转染人喉癌HEP2细胞,同时设立阴性对照、空白对照,分别命名为W组(未转染组)、NC组(阴性对照组)、T1组(S1序列组)、T2组(S2序列组)及T3组(S3序列组),每组各5例。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,计算转染效率。转染24 h后,收集稳定后细胞,采用实时荧光定量PCR法检测各干扰序列对Trop2基因表达的抑制效果。结果荧光显微镜下观察,见HEP2细胞表达绿色荧光蛋白,证实si RNA已转入细胞,转染率达90%。RT-PCR法结果显示,与未转染组、阴性对照组相比,转染si RNA的人喉癌HEP2细胞中Trop2表达均受到抑制,与T2、T3组相比,T1组对Trop2 m RNA的抑制作用最明显,差异有统计学意义(0.470±0.063 vs 0.749±0.024,0.824±0.027,P<0.05)。结论成功构建并筛选出了能高效、特异沉默人喉癌HEP2细胞Trop2基因的si RNA序列,为进一步研究Trop2基因在喉癌中的作用机制及其基因治疗奠定了基础。 相似文献
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目的:对强肝胶囊联合熊去氧胆酸胶囊治疗慢性乙型肝炎的临床效果展开对比分析。方法:将48例慢性乙型肝炎患者分为治疗组和对照组,各24例,比较治疗效果。结果:两组患者临床治疗总有效率分别为87.50%和62.50%,比较差异有统计学意义(P <0.05);治疗组患者治疗后ALT、AST 和 TBIL 肝功能指标均显著低于对照组和治疗前的,差异有一定统计学意义(P <0.05)。结论:在治疗慢性乙型肝炎临床上强肝胶囊联合熊去氧胆酸胶囊获得良好临床效果。 相似文献
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55.
精细化内涵式管理和高效率运营是医院发展的两条主线,手术室作为高成本的资本密集型科室,在精细化内涵式管理和高效率运行方面的可挖潜力逐渐成为医院管理者关注的焦点。开台时间作为手术室管理和效率的关键点,近年来迅速进入国内外研究者的视野而倍受重视。美国一流医院准时开始手术率为76%[1]。北大医学院附属三院、广东省人民医院、广州中医药大学附属一院规定第一台手术开始不得晚于8:30,北京朝阳医院、宣武医院、华西医院、湘雅医院等要求最晚9:00开台。手术开台时间是手术室时间管理提高工作效率的重要指标,是反映医院管理能力和水平高低、整体协作能力和运转效率高低衡量标准之一[2]。手术开台时间的延误,不仅影响手术间的利用率,增加手术室成本,延长工作时间,也增加了患者的经济负担。本文笔者选取了近年某三甲医院的部分手术开台时间样本进行统计分析,从手术流程优化角度对各种影响手术开台效率的因素进行了分析,介绍了该医院围绕提高手术室工作效率的综合管理措施和效果,供读者讨论分析。 相似文献
56.
目的探讨离体条件下细胞穿透肽Tat-LK15运载小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)沉默RGC-5视神经节细胞(retinal ganglion cell line,RGC-5)神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,n NOS)基因的可行性,为在体条件下研究Tat-LK15运载siRNA沉默n NOS表达治疗神经病理性疼痛提供理论依据。方法 1通过凝胶阻滞分析测定Tat-LK15与siRNA的最佳交联比。流式细胞术检测Tat-LK15/FAM-siRNA以最佳交联比转染RGC-5细胞的转染效率;不同剂量Tat-LK15(1、2.5、5、10和20μg)孵育RGC-5细胞24 h,流式细胞术检测细胞凋亡率。2制备n NOS高表达的RGC-5细胞模型。3将RGC-5细胞随机分为5组:对照组、模型组、Tat-S组(Tat-LK15运载n NOS/siRNA转染模型细胞)、Lipo-S组(LipofectamineTMRNAi MAX运载n NOS/siRNA转染模型细胞)及Tat-N组(Tat-LK15运载NCsiRNA转染模型细胞),通过Q-PCR及Western blot检测各组nN OS表达水平。结果 Tat-LK15与siRNA质量比为2∶1时可完全包裹siRNA,达到最佳交联,此时其转染效率为(84.4±3.9)%。当Tat-LK15剂量为20μg(6.1μmol·L-1)时才出现一定细胞毒性,细胞凋亡率高于对照组[(10.3±1.1)%vs(7.4±0.9)%,P<0.05]。造模后RGC-5细胞nN OS表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,Tat-S组nN OS mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05),Tat-S组与Lipo-S组相比无差异(P>0.05)。结论Tat-LK15能高效转染siRNA,细胞毒性低,离体条件下可有效运载siRNA沉默nN OS的基因表达。 相似文献
57.
58.
维生素D受体和骨关节炎 总被引:3,自引:0,他引:3
骨关节炎 (osteoarthritis,OA)是一种以骨关节软骨退变及其软骨下骨反应性增生为特征 ,复杂的多因子发病机制的骨关节疾病。流行病学调查显示OA在发达国家是最常见的肌骨骼源性致残因素 ,OA对健康的威胁在女性疾病中排第 4位 ,男性疾病中为第 8位。在美国估计有 4 0 0 0万患者 ,其中 70 %~ 90 %年龄超过 75岁 ,并且至少侵犯一个关节 ,估计到 2 0 2 0年患者数将达到 6 0 0 0万。虽然OA的病因不明 ,但有关双胎和家族性的多方面研究证据已表明遗传因素起到了相当重要的作用[1] 。可能参与其中的基因包括维生素D受体基因、Ⅱ型前胶原基因、… 相似文献
59.
近年有研究发现,人类免疫缺陷病毒(HIV)不进展者体内一种名为抗-R7V的抗体含量很高,并且临床资料显示抗-R7V对HIV感染者具有一定的保护作用,使病情进展延缓或长期停留在无症状期,可以作为疾病进展的一个标志,为人们希望通过自身机体免疫控制HIV感染带来了曙光。对这类患者的研究有利于进一步阐明影响病毒复制的因素,也有助于制定治疗HIV/AIDS患者的新方案。含有R7V肽的酶联免疫吸附试验(ELISA)可以检测到HIV感染者体内的抗-R7V,与CD4计数和病毒载量联合应用,有助于医生决定治疗开始的时机。 相似文献
60.
目的观察各型慢性乙肝患者体内细胞免疫变化情况,为临床诊疗提供科学、量化的实验指标。方法用流式细胞术检测HBV感染后引起的慢性活动性肝炎、慢性迁延性肝炎和肝硬化病人共128例T淋巴细胞亚群,并和正常人进行对照。结果各型慢性乙肝病人的CD3 和CD4 T淋巴细胞绝对数均较正常人显著降低(t均>2.100,P均<0.05),CD8 T淋巴细胞在慢活肝病人组和正常对照组差异无显著性(t=0.728,P>0.05),慢迁肝和肝硬化患者则显著降低(t=2.043和2.862,P均<0.05),CD4 /CD8 在慢活肝和慢迁肝组显著低于正常人(t=0.216和0.223,P均<0.05),而在肝硬化组与正常人差异无显著性(t=1.784,P>0.05)。结论慢性乙型肝炎病人T淋巴细胞亚群出现明显异常变化,监测T淋巴细胞亚群有助于了解病情和观察疗效。 相似文献